上海市宝山区行知实验中学2023年高考生物四模试卷含解析

2023年高考生物模拟试卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．“种豆南山下，草盛豆苗稀。晨兴理荒秽，带月荷锄归。”该诗句体现了许多生态学原理。下列相关叙述错误的是（）A．“南山下”所有的豆科植物构成了一个种群B．“草盛豆苗稀”说明不同植物间有竞争关系C．“晨兴理荒秽”说明人类能调整生态系统中能量流动方向D．诗句中的信息能体现出人类活动可以影响群落演替的方向2．核糖体RNA(rRNA)通过转录形成，与核糖核蛋白组装成核糖体前体，进一步成熟，成为翻译的场所。翻译时rRNA参与催化肽键的连接。下列相关叙述错误的是A．rRNA的合成需要核DNA做模板B．原核生物中也有合成rRNA的基因C．mRNA上结合多个核糖体可缩短一条肽链的合成时间D．rRNA可降低氨基酸间脱水缩合所需的活化能3．果蝇的性染色体有如下异常情况：XXX与OY（无X染色体）为胚胎期致死型、XXY为可育雌蝇、XO（无Y染色体）为不育雄蝇。摩尔根的同事完成多次重复实验，发现白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交，1/2000的概率出现白眼雌蝇和不育的红眼雄蝇。若用XA和Xa表示控制果蝇红眼、白眼的等位基因，下列叙述错误的是A．亲本红眼雄果蝇不正常的减数分裂产生异常的精子致使例外出现B．亲本白眼雌蝇不正常的减数分裂产生异常的卵细胞致使例外出现C．F1白眼雌蝇的基因型为XaXaYD．不育的红眼雄蝇的基因型为XAO4．下列关于基因突变的叙述，正确的是（）A．基因突变是DNA分子上碱基对缺失、增加或替换引起的核苷酸序列的变化B．血友病、色盲、多指、白化病等致病基因的出现说明基因突变具有不定向性C．分裂间期较分裂期更易发生基因突变，主要是因为间期持续的时间更长D．基因突变必然形成新基因，而其控制合成的蛋白质的氨基酸序列不一定改变5．2019年诺贝尔生理学或医学奖颁给了三位科学家以表彰他们在揭示细胞感知和适应氧气供应机制中所做的贡献。缺氧条件下缺氧诱导因子（HIF-1）与缺氧反应元件（HRE）结合后调控基因表达使细胞适应低氧环境。HIF-1由两种不同的DNA结合蛋白HIF-1a和ARNT组成，在正常氧气条件下，HIF-1a会被蛋白酶体降解而无法发挥作用（如图所示）。下列说法错误的是（）A．组成HIF-1a的单体是氨基酸，在常氧条件下，人体的HIF-1a的含量会降低B．HIF-1a的降解过程中仅需蛋白酶体C．研究发现缺氧时HIF-1a含量会升高，但HIF-1a的mRNA表达量较常氧时并未增加，由此推测可能是缺氧使HIF-1a稳定性增强D．研究发现肿瘤细胞能利用低氧调节机制增加细胞内氧气含量，提高代谢效率，从而使肿瘤细胞增殖，故可研制药物降低肿瘤细胞内HIF-1a的含量，抑制肿瘤细胞增殖达到治疗的目的6．下列关于“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”实验的操作，正确的是（）A．镜检计数时，不计入压在方格角上的细胞B．在含有培养液的试管静置之后，用滴管从试管中吸取培养液C．应在每天的同一时间从同一培养瓶中吸出等量培养液进行计数D．整个实验期间，有4天需要用血细胞计数板对酵母菌进行计数7．如下图是果蝇染色体上的白眼基因示意图，下列叙述正确的是（）A．S基因是有遗传效应的DNA片段，包括编码区和非编码区B．白眼基因片段中，含有成百上千个核糖核苷酸C．基因片段中有5种碱基，8种核苷酸D．基因中有一个碱基对的替换就会引起生物性状的改变8．（10分）下列有关物质的鉴定时所采用的试剂、实验操作方法及实验现象的描述，正确的是ABCD材料花生种子切片淀粉溶液蔗糖溶液豆浆溶液试剂苏丹Ⅲ溶液碘液本尼迪特试剂双缩脲试剂水浴加热不加热不加热加热加热观察显微镜观察显微镜观察肉眼观察肉眼观察现象橙黄色溶液变蓝色红黄色沉淀紫色溶液A．A B．B C．C D．D二、非选择题9．（10分）COVID-19感染者的主要症状是发热、干咳、全身乏力等，其中发热与机体的免疫增强反应有关。COVID-19感染人体后，作用于免疫细胞，后者分泌白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子和干扰素，这些物质可作为内源性致热原进一步引起发热症状。根据所学知识回答下列问题：（1）白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子和干扰素等属于免疫系统中的_______。（2）内源性致热原直接或通过中枢介质作用于下丘脑____________的神经细胞，通过系列生理活动使产热增加，如肝脏和骨骼肌细胞中有机物氧化放能增强；散热减少，如_____________（至少答两点），体温达到一个更高的调定点，此时机体的产热量______（填“大于”、“小于”或“等于”）散热量。（3）研究表明，在一定范围内的体温升高(41℃～42℃)对特异性免疫应答有普遍增强影响，其中包括T细胞介导的_________和B细胞介导的_______。10．（14分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。11．（14分）基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图，请据图回答下列问题：（1）从基因文库中提取的目的基因通过PCR技术进行扩增时，所用的酶与细胞内同类酶的差异在于该酶______________。（2）进行①过程时，需用______________酶切开载体以插入目的基因。若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过表达载体而不能直接将目的基因导人受体细胞，原因是应___________________（答出两点即可）。（3）若图中宿主细胞为大肠杆菌，一般情况下②过程不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是____________________________；已转化的宿主细胞（大肠杆菌）指的是____________________________。（4）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验中应选用______________的大肠杆菌作为受体细胞，在蛋白质纯化的过程中应添加______________的抑制剂。12．动物的反射活动之所以能协调，就是因为中枢内既有兴奋活动又有抑制活动；如果中枢抑制受到破坏，则反射活动就不可能协调。（1）图1表示一种神经中枢抑制产生的机制，图中若①先兴奋会导致③兴奋，但若②先兴奋后①再兴奋，③却不产生兴奋，这说明神经元②为___兴奋/抑制）性神经元，分析其产生作用可能的机理是___。（2）图2表示另一种神经中枢抑制产生机制，图中神经细胞①兴奋，传递至突触A处使其末梢释放___进入___，再与突触后膜上的___结合，导致③兴奋，传递至突触B时释放化学物质引起突触后膜上Cl-通道打开，大量Cl-进入细胞①、②上的突触后膜，带来的结果是细胞①、②产生___该过程对于细胞①体现了神经调节中典型的___调节机制。（3）破伤风杆菌产生的破伤风毒素可选择性阻止图2中细胞③释放神经递质，试推测破伤风患者可能出现肌肉___（松弛/痉挛）的症状。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【解析】

本题以陶渊明《归园田居•其三》中的诗句为背景，主要考查种群概念、群落结构和演替、生态系统的能量流动等生物学基本原理，同时弘扬了中华传统文化。【详解】A、某一区域中，豆科植物种类繁多，并不只是一个物种，A错误；B、在豆苗和杂草之间存在竞争关系，B正确；C、在豆苗阶段，豆苗在和杂草的竞争中处于劣势，有必要除草，以利于豆苗生长，让能量更多地流向对人类最有益的部分，即人类活动能调整生态系统中能量流动关系，这也是研究生态系统能量流动的意义之一，C正确；D、人类在某一片土地上种庄稼，则该群落向着人类需要的农田群落的方向演替，若弃耕，农田群落可能演替为草原群落或森林群落，所以人类活动会影响群落的演替方向，D项正确。

故选A。2、C【解析】

1、基因的表达即基因控制蛋白质的合成过程，包括转录和翻译两个主要阶段。

（1）转录：是指以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对原则，合成RNA的过程。

转录的场所：细胞核；

转录的模板：DNA分子的一条链；

转录的原料：四种核糖核苷酸（“U”代替“T”与“A”配对，不含“T”）；

与转录有关的酶：RNA聚合酶；

转录的产物：mRNA，tRNA，rRNA。

（2）翻译：是指以mRNA为模板，合成具有一定氨基酸排列顺序的蛋白质的过程。

翻译的场所：细胞质的核糖体上。

翻译的本质：把DNA上的遗传信息通过mRNA转化成为蛋白质分子上氨基酸的特定排列顺序。

2、RNA分子的种类及功能：

（1）mRNA：信使RNA；功能：蛋白质合成的直接模板；

（2）tRNA：转运RNA；功能：mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者；

（3）rRNA：核糖体RNA；功能：核糖体的组成成分，蛋白质的合成场所。【详解】rRNA是以DNA的一条链为模板转录形成的，因此rRNA的合成需要DNA做模板，A正确；原核生物也有核糖体也需要rRNA，所以原核生物中也有合成rRNA的基因，B正确；每个核糖体上都可以合成一条肽链，多个核糖体分别完成多肽链的翻译，C错误；rRNA能催化肽键的连接，可见其具有催化功能，即可降低氨基酸之间脱水缩合所需的活化能，D正确。

故选C。【点睛】本题主要考查基因表达的有关知识，解答本题的关键是掌握转录和翻译的过程以及多聚核糖体合成蛋白质的过程和意义。3、A【解析】

正常情况下，白眼雌蝇XaXa与红眼雄蝇XAY杂交，后代中雌果蝇应该为红眼XAXa，雄果蝇应该为白眼XaY。出现的白眼雌蝇应该为XaXaY，不育的红眼雄蝇应该为XAO。【详解】白眼雌蝇（XaXa）与红眼雄蝇（XAY）杂交，F1出现的白眼雌蝇为XaXaY，是异常卵细胞（XaXa）和正常精子（Y）结合的结果。不育的红眼雄蝇为XAO，是异常卵细胞（O）和正常精子（XA）结合的结果；因此，A错误，B、C、D正确。故选A。【点睛】本题的关键是确定异常后代的基因型为XaXaY和XAO，进而分析出是母本减数分裂异常所致。4、D【解析】

有关基因突变，考生需要注意以下几方面：1、基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换。2、基因突变的类型：自发突变和人工诱变。3、基因突变的特点：基因突变具有普遍性、低频性（个体的基因突变率低，但种群中个体数，其突变率较高）、随机性、不定向性、多害少利性。4、体细胞突变一般不遗传给子代，生殖细胞突变一般可以遗传给子代。5、基因突变的意义：基因突变是新基因产生的途径；基因突变能为生物进化提供原材料；基因突变是生物变异的根本来源。6、基因突变不改变生物性状：①体细胞中某基因发生改变，生殖细胞中不一定出现该基因；②若该亲代DNA上某个碱基对发生改变产生的是一个隐性基因，并将该隐性基因传给子代，而子代为杂合子，则隐性性状不会表现出来；③根据密码子的简并性，有可能翻译出相同的氨基酸；④性状表现是遗传基因和环境因素共同作用的结果，在某些环境条件下，改变了的基因可能并不会在性状上表现出来等。【详解】A、基因突变指的是基因中核酸分子中碱基对的缺失、增加或替换，是基因结构的改变，A错误；B、血友病、色盲、多指、白化病等致病基因的出现说明基因突变具有普遍性，B错误；C、分裂间期由于进行DNA复制易发生基因突变，与其持续的时间长无关，C错误；D、基因突变产生新基因，由于密码子具有简并性，基因中碱基序列发生改变，其控制合成的蛋白质中的氨基酸序列不一定发生改变，D正确。故选D。5、B【解析】

根据题干所给信息分析，在低氧环境下，HIF能促进缺氧相关基因的表达从而使细胞适应低氧环境。说明在低氧环境下，细胞中HIF-1a的含量会上升。缺氧诱导因子（HIF-1）会被蛋白酶体降解，说明HIF-1a的化学本质是蛋白质。据图示分析可知，在常氧、VHL、脯氨酰烃化酶、蛋白酶体存在时，HIF-1a会被蛋白酶体降解而无法发挥作用。【详解】A、HIF-1a属于蛋白质，其单体是氨基酸，在常氧条件下，HIF-1a会被蛋白酶体降解，人体的HIF-1a的含量会降低，A正确；B、据图示分析可知，在常氧、VHL、脯氨酰烃化酶、蛋白酶体存在时，HIF-1a才会被蛋白酶体降解，B错误；C、缺氧时HIF-1a含量会升高，但HIF-1a的mRNA表达量并未增加，可能的原因是缺氧使HIF-1a稳定性增强，不容易被降解，C正确；D、肿瘤细胞能利用低氧调节机制增加细胞内氧气含量，提高代谢效率，从而使肿瘤细胞增殖，故可研制药物降低肿瘤细胞内HIF-1a的含量，抑制肿瘤细胞增殖达到治疗的目的，D正确。故选B。6、D【解析】

探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化实验的相关注意事项：（1）显微镜计数时，对于压在小方格边线上的酵母菌，应只计固定的相邻两个边及其顶角的酵母菌；（2）从试管中吸出培养液进行计数前，需将试管轻轻振荡几次，目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，减少误差；（3）结果记录最好用记录表；（4）每天计数酵母菌量的时间要固定；（5）培养和记录过程要尊重事实，不能主观臆造。【详解】A、镜检计数时，压在方格边上的酵母菌，需要计数相邻两边及其顶角的个体数，否则会产生误差，A错误；B、吸取培养液计数前要将试管轻轻振荡几次，目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，减少误差，B错误；C、应在每天同一时间从同一培养瓶去培养液计数，不要求等量，C错误；D、实验期间的第一、二、四、七天需用血细胞计数板对酵母菌进行计数，D正确。故选D。【点睛】本题考查探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验步骤、实验结果等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。7、A【解析】

基因是具有遗传效应的DNA片段，含有成百上千个脱氧核苷酸，DNA分子是以4种脱氧核苷酸为单位连接而成的长链，这四种脱氧核苷酸分别含有A、T、C、G四种碱基。【详解】A、基因是具有遗传效应的DNA片段，包括编码区和非编码区，A正确；

B、基因中含有成百上千个脱氧核苷酸，B错误；

C、由于密码子的简并性等，基因中有一个碱基对的替换不一定会引起生物性状的改变，C错误；

D、组成基因片段中的基本单位是脱氧核苷酸，有4种碱基，4种脱氧核苷酸，D错误。

故选A。【点睛】熟悉基因的本质与结构组成是分析判断本题的关键。8、A【解析】

斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀），斐林试剂只能检验生物组织中还原糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）存在与否，而不能鉴定非还原性糖（如淀粉、蔗糖）；蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应；脂肪可用苏丹Ⅲ染液（或苏丹Ⅳ染液）鉴定，呈橘黄色（或红色）；淀粉遇碘液变蓝。【详解】花生种子中富含有脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，或被苏丹Ⅳ染液染成红色，不需加热，用显微镜观察，A正确；淀粉遇碘液变蓝，不需要显微镜观察，B错误；本尼迪特试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀），蔗糖不是还原性糖，C错误；蛋白质需要用双缩脲试剂检测，实验时，先加入A液，后加入B液，溶液呈紫色，不需加热，D错误.故选:A。【点睛】本题考查生物组织中化合物的鉴定，解题的关键是牢记每种化合物鉴定时使用的试剂，反应的颜色，需要特别注意的是是否需要加热。二、非选择题9、免疫活性物质体温调节中枢汗腺分泌减少，毛细血管收缩，血流量减少等于细胞免疫体液免疫【解析】

免疫系统组成：免疫器官、免疫细胞和免疫活性物质。免疫包括非特异性免疫（第一道防线：皮肤、粘膜等；第二道防线：体液中杀菌物质和吞噬细胞）和特异性免疫（第三道防线：体液免疫和细胞免疫）。【详解】（1）免疫活性物质指由免疫细胞或其他细胞产生的发挥免疫作用物质，如：抗体、淋巴因子、溶菌酶等。因此免疫细胞分泌的白介素-1、白介素-6、肿瘤坏死因子和干扰素属于免疫系统中的免疫活性物质。（2）体温调节中枢在下丘脑，内源性致热原可直接作用于体温调节中枢的神经细胞，散热减少的途径包括：汗腺分泌减少，毛细血管收缩，血流量减少。人体维持体温恒定的原理是机体的产热量=散热量，体温达到一个更高的调定点，此时机体的产热量等于散热量。（3）在一定范围内的体温升高（41℃～42℃）对特异性免疫应答有普遍增强影响，其中包括T细胞介导的细胞免疫和B细胞介导的体液免疫。【点睛】答题关键在于掌握免疫调节和体温调节过程，建立知识内在联系，形成知识网络。10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产生的影响）。因此，将含有新蛋白A基因的重组质粒和含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用抗原——抗体杂交方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较抑菌圈的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，是因为蛋白A基因的发酵产物对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高。【点睛】本题主要考查基因工程、PCR技术等相关知识，考生需要理解和记忆相关知识，并学会应用所学知识正确答题。11、耐高温（或具有热稳定性）限制（或限制性核酸内切）目的基因无复制原点、目的基因无表达所需启动子目的基因无表达所需的终止子未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力弱已导入目的基因并且目的基因能稳定遗传和表达的细胞蛋白酶缺陷型蛋白酶【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）利用PCR技术扩增目的基因时，需要特殊的耐高温的DNA聚合酶。（2）在构建基因表达载体时，需用限制酶将载体切开，以便目的基因的插入；若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过表达载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是目的基因无复制原点、目的基因无表达所需启动子和终止子。（3）若受体细胞是大肠杆菌（微生物），由于未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源D