金安O荧光染色法、抗酸染色法用于结核病细菌学检验的临床价值

金安O荧光染色法、抗酸染色法用于结核病细菌学检验的临床价值摘要：目的：探析金安O荧光染色法、抗酸染色法用于结核病细菌学检验的临床价值。方法：选取本院2020年5月~2020年12月收治的结核病患者120例为检查对象。采集患者痰液样本，分别应用金安O荧光染色法、抗酸染色法进行细菌学检验。对两种检查方法的诊断价值进行分析。结果：金安O荧光染色法阳性率明显高于抗酸染色法，差异显著(PV0.05)。结论：金安O荧光染色法在诊断结核病相比于抗酸染色法具有更高的准确率，联合应用将提高准确率。关键词：金安0荧光染色法；抗酸染色法；结核病；细菌学检验结核病属于较为严重慢性传染病，属于结核分枝杆菌通过呼吸系统、消化系统、血液循环等感染人体造成发病。在疾病早期，症状不明显，随着疾病的发展患者可表现出乏力、体重减轻、出冷汗等全身症状，对患者健康和生活产生较大影响［1。］以往临床诊断结核病通常使用抗酸染色法，但是检出率较低，难以满足需求。近年来发展出使用金安0荧光染色法，可产生较高检出率。本研究对两种细菌学检验方法进行比较分析，现将结果报告如下。1资料与方法临床资料选取本院2020年5月~2020年12月收治的结核病患者120例为检查对象。其中男性患者74例，女性患者46例。年龄范围22~58岁，年龄均值(46.35±4.26)岁。患者在清晨漱口，采集从深部咳出2~3ml痰液作为样本，放置在无菌器皿中，送检。将痰液标本涂抹在玻片上，使用火焰加热干涸固定，等待晾干，准备检验。方法1.2.1仪器与试剂金安O染色液：青岛海博生物；抗酸染色液：按照相关标准本院实验室进行配制。荧光显微镜：奥林巴斯，BX53；光学显微镜：奥斯威，M303-HK830。金安O荧光染色法选取患者痰涂片，进行金安O荧光染色。在玻片上滴加金安O染色液，染色15min，随后用流水冲洗。使用0.5%盐酸酒精褪色1~2min，直至玻片接近无色，流水轻柔冲洗。使用0.5%高锰酸钾复染液复染3min，流水缓慢冲洗，等待晾干。取晾干的涂片，放在荧光显微镜下观察。抗酸染色法选取患者痰涂片，进行抗酸染色。在拨片上滴加碳酸复红染色液，将样本覆盖完全，使用明火加热染色5min，使用流水冲洗。使用褪色剂将样本褪色到可见红色，后使用流水冲洗。使用亚甲蓝复染液染色30s，使用流水冲洗，等待晾干。将晾干的样本放置在光学显微镜下观察。显微镜观察金安O荧光染色样本放在荧光显微镜下观察，蓝紫光滤片，物镜40倍，目镜10倍，背景黑色，抗酸杆菌淡黄色。抗酸染色样本放在光学显微镜下观察，目镜40倍，油镜100倍，背景淡蓝色，抗酸菌为红色，其他细胞、细菌为蓝色。1.3观察指标1.3.1金安O荧光染色法镜下背景黑色，抗酸菌黄绿色，菌体杆状，略微弯曲。观察样本300个视野后，无抗酸杆菌，计抗酸菌（-）；50个视野发现10~49个抗酸菌，计抗酸菌（+）；单个视野发现1~9个，计抗酸菌（++）；单个视野发现10~99个抗酸菌计抗酸菌（+++）；单个视野发现±100个抗酸菌，计抗酸菌（++++）[2]1.3.2抗酸染色法镜下背景淡蓝色，抗酸菌红色。观察300个视野，无抗酸菌，计抗酸菌（-）；100个视野发现抗酸菌3~9个，计抗酸菌（+）；10个视野发现抗酸菌1~9个，计抗酸菌（++）；1个视野发现1~9个，计抗酸菌（+++）；1个视野发现抗酸菌±10个，计抗酸菌（++++）［叽统计学分析软件选SPSS23.0•计数资料按照［n（%）］表示，X2检验。PV0.05为统计学意义。2结果2.1不同方法阳性率金安O荧光染色法总阳性率明显高于抗酸染色法，差异显著（PV0.05）。见表1.表1不同方法阳性率［n（%）］方n++++++++++总阳法性金1安O20染色17(14.17)12(10.00)10(8.33)17(14.17)56(46.67)抗17(5.811(9.9(7.14(1141(34酸染203)17)5).67).17)x24.6300.0480.0570.3333.893P-0.0310.8260.8110.5640.0483讨论在诊断结核病时，最为快速有效的方法仍然是抗酸染色法以及细菌培养法。其中抗酸染色法是具有70年历史的细菌检验方法，但是其诊断的灵敏度较低，漏诊的概率较高［4］。而细菌培养法需要消耗较长的时间，临床医生不能及时获取到患者的实验室检查结果，难以对患者进行准确诊断，也不同为患者制定个体化的治疗方案，而应用常规抗结核治疗手段不能对患者的疾病产生良好的治疗效果［5］。因此需要加强对结核病诊断的研发和验证，对病原体加快获取，使用有效快速的检出结核分枝杆菌的方法是目前诊断、控制结核病的基础。在本次研究中，对本院结核病患者的痰液标本分别应用金安O荧光染色法、抗酸染色法进行细菌学检验，其中前者的总体阳性检出率明显高于后者，并在抗酸菌（+）检出率方面与后者差距显著（PV0.05）。说明金安O荧光染色法在诊断病变活动性较轻、排菌量较少的结核病诊断意义显著。综上所述，金安O荧光染色法在诊断结核病时，操作便捷，灵敏度高，适用于早期诊疗结核病。参考文献：孙林雍,严嘉琦,陈昶,陈昱,邹艳,陈杰,唐源.荧光定量PCR与抗酸特殊染色对疑似骨关节结核中结核分枝杆菌的检测对比J].临床与实验病理学杂志,2020,36(9):1105-1107.倪德胜.荧光定量PCR检测结核杆菌临床应用价值探究[J].临床检验杂志(电子版),2019,008(003):71-72.杨元利，张永峰，窦权利.老年肺结核病130例临床分析[J].陕西医学杂志,2019,48(12):1691-1693.刘力娟，王厚芳，孙芾.结核分枝杆菌及利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技