2022年医学专题-细菌感染的检查方法与法治原则

支原体、衣原体、立克次体

主讲(zhǔjiǎng)老师：江振友

第一页，共六十五页。支原体属和脲原体属

第二页，共六十五页。支原体（Mycoplasma）

1.能在人工培养基中生长2.能独立生活(shēnghuó)3.最小原核细胞型微生物4.无细胞壁5.二分裂繁殖

6.多形态性,“油煎蛋样”菌落第三页，共六十五页。分类

柔膜体纲(Mollicutes)支原体目(MycoPlasmatales)下分3个科：①支原体科（MycoPlasmataceae）；2个属:支原体（Mycoplasma）脲原体（Ureaplasma）②无胆甾原体科（Acholeplasma-taceae），生长时不需要(xūyào)外源性胆固醇；③螺原体科（Spiroplasmataceae），生长至一定阶段呈螺形。第四页，共六十五页。人体分离:20种，其中8种是致病或条件致病菌:肺炎(fèiyán)支原体(M.pneumoniae,Mpn)生殖支原体(M.geuitalium,Mg)人型支原体(M.hominis,Mh)发酵支原体(M.fermentants,Mf)穿透支原体(M.penetrans,Mpe)梨支原体(M.pirum,Mpi)关节炎支原体(M.arthritidis,Mart)

解脲脲原体(U.urealyticum,Uu)

第五页，共六十五页。支原体与细菌(xìjūn)L型比较性状支原体细菌L型滤过性有有细胞壁无无油煎蛋状菌落形成形成对青霉素抵抗抵抗对胆固醇需要生长需要不一定需要来源自然界、人与动物由细菌在环境条件下诱导形成回复变成细菌不能能遗传性与细菌无关与原细菌相同第六页，共六十五页。肺炎支原体形态与结构(jiégòu)

大小:可通过滤器,光镜下可观察细胞壁:无形态:球形、球杆形、分枝丝状或念珠状等细胞膜:三层:1.蛋白质2.脂质(胆固醇较多)3.蛋白质染色:姬姆萨染色法:淡紫色或蓝色核酸:二种(DNA和RNA)第七页，共六十五页。第八页，共六十五页。第九页，共六十五页。生长(shēngzhǎng)繁殖繁殖方式:二分裂方式球体延伸、分节断裂(duànliè)、出芽、分枝繁殖周期:3小时营养要求:较高,含动物血清、酵母浸液酸碱度:pH7.8～8．0气体环境:5％CO2或5％CO2与95％N2温度与时间:37℃,3d～10d菌落特征:“油煎蛋”状菌落第十页，共六十五页。第十一页，共六十五页。表25—2支原体与脲原体的某些(mǒuxiē)生物学特性

第十二页，共六十五页。抗原(kàngyuán)构造主要抗原(kàngyuán)成分:1.蛋白质P1蛋白抗原:表面抗原致病:粘附2.脂质中的糖脂抗体:产生补体结合抗体生长抑制抗体代谢抑制抗体第十三页，共六十五页。抵抗力理化因素:比细菌敏感(mǐngǎn)(因无细胞壁)热:弱,50℃经30min死亡－20℃可长期保存耐碱酸和有机溶剂:较敏感(消毒剂、清洁剂)四环素族、红霉素、卡那霉素、氯霉素:敏感青霉素:不敏感第十四页，共六十五页。致病性外源性感染上呼吸道感染:感冒、咽炎(yānyán)、气管炎支原体性肺炎（Mycoplasmalpneumonia）(原发性非典型肺炎)（primaryatypicalpneumonia）临床表现和胸部X线:肺炎链球菌引起的典型肺炎不同类似病毒性肺炎第十五页，共六十五页。世界各地,密集人群,儿童及青少年多见秋冬季发病率高,每隔3～5年出现一次流行飞沫传播潜伏期2W～3W,感染起病缓慢临床主要症状:发热（约39℃）、头痛、持续性顽固咳嗽、胸痛等。病人(bìngrén)带菌、排菌状态可持续6W～8W肺外合并症（神经系统、消化系统及心脏等）发病率高，严重者可致死致病性:粘附是先决条件也和超敏反应有关(共同抗原)第十六页，共六十五页。免疫性抗体：多种(CF抗体、生长抑制抗体、杀支原体抗体等)呼吸道sIgA:有一定作用非特异冷凝集素:1.和自身(zìshēn)免疫有关2.患者阳性率为50％，常用于辅助诊断。

第十七页，共六十五页。微生物学(wēishēnɡwùxué)检查法病原分离特异核酸的检测血清学诊断抗原(kàngyuán)检测冷凝集试验第十八页，共六十五页。病原(bìngyuán)分离标本：咽拭子或痰液培养基：双相培养基（含马血清、酵母浸液）

SP-4培养基（提高分离率30％～40％）气体环境：5％～10％CO2温度与时间：37℃，l～2W可疑菌落：1.糖发酵2.溶血性3.血细胞吸附(xīfù)4.特异抗血清生长抑制试验等

第十九页，共六十五页。特异(tèyì)核酸的检测（1）聚合酶链反应(PCR)：优点：特异性好敏感性高快速、简便靶基因：16SRNA基因P1蛋白基因方法：套式PCR(nPCR)复合PCR限制性片段长度多态性分析(RFLP)随机引物PCR(RAPD)（2）基因探针根据碱基严格互补配对的特性特异性强，敏感性不如(bùrú)PCR技术第二十页，共六十五页。血清学诊断(zhěnduàn)

（1）补体结合试验（CFT）：双份抗体效价升高4倍以上诊断（2）间接血凝试验（IHA）：测抗体,2—3周高峰(gāofēng)（3）酶联免疫吸附试验(ELISA)：测IgM、IgG和IgA敏感性高（4）间接免疫荧光试验：检测IgM、IgG特异性较强第二十一页，共六十五页。抗原(kàngyuán)检测

方法1:间接法或直接法抗体:荧光标记多克隆抗体或单克隆抗体检测标本:呼吸道分泌物中抗原86%可阳性方法2:双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测标本:呼吸道分泌物中抗原可检出105CFU/ml方法3:酶联免疫吸附试验捕获(bǔhuò)法抗体:抗P1单克隆抗体检测标本:P1蛋白可检出104CFU/ml特异性强,3小时即可第二十二页，共六十五页。冷凝(lěngníng)集试验辅助诊断(zhěnduàn)非典型肺炎针对红细胞膜Ⅰ抗原冷凝集素属IgM5d～10d出现，2W～3W高峰辅助诊断效价:64～128倍以上双份效价升高4倍以上特异性和敏感性较低第二十三页，共六十五页。防

冶药物:四环素类(近年来耐药性增加)大环内酯类:首选(shǒuxuǎn)(红霉素、克拉霉素、阿奇霉素)喹诺酮类疫苗:减毒活疫苗基因工程疫苗第二十四页，共六十五页。其它(qítā)支原体寄生部位:鼻咽腔及泌尿生殖道粘膜属于正常菌群,引起条件性感染口腔支原体:慢性(mànxìng)呼吸道感染唾液支原体:齿槽溢脓生殖支原体:生殖道、呼吸道和关节腔的炎症,流产、早产和新生儿肺炎发酵支原体:类风湿性关节炎AIDS相关(分离率明显升高)人型支原体:渗出性咽炎、非淋菌性尿道炎

(nongonococcalurithritis,NGU),卵巢脓肿、产褥败血症第二十五页，共六十五页。脲原体属(Ureaplasma)

从支原体分出的独立的新属正常(zhèngcháng)菌群:绝大多数有致病性:解脲脲原体（U.urealyticum,Uu)

1954年从NGU患者的病灶处分离类似肺炎支原体能水解尿素第二十六页，共六十五页。生物学性状(xìngzhuàng)

形态:圆形或球杆状染色:革兰染色阴性温度和酸碱度:37℃,pH6.0菌落:很小(15μm～60μm,放大200倍),称T株（Tinycolonystrain）敏感性:敏感:四环素、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素、0.05%醋酸铊、125μg/ml5-碘-2’脱氧尿苷不敏感:青霉素生化(shēnɡhuà)特性:水解尿素产氨第二十七页，共六十五页。第二十八页，共六十五页。致病性

存在:人和动物的口腔、呼吸道、泌尿生殖道血清型:解脲脲原体(Uu)有14个血清型传播途径:性接触传播、母婴传播所致疾病(jíbìng)

(STD)泌尿生殖道感染:NGU、盆腔感染、宫颈炎、阴道炎、输卵管炎、慢性前列腺炎、附睾炎、男女不孕症、反复流产、早产、死胎新生儿疾病:呼吸道病变、肺炎、脑膜炎第二十九页，共六十五页。引起男性不孕的原因：①Uu吸附于精子表面，使其运动受阻，并蔽盖了精子识别卵细胞的部位②Uu产生神经氨酸样物质，干扰(gānrǎo)精子与卵细胞结合。③Uu与精子膜有共同抗原，从而产生抗精子抗体第三十页，共六十五页。

立克次体(lìkècìtǐ)属和巴尔通体属

第三十一页，共六十五页。立克次体(lìkècìtǐ)属立克次体特征：①比细菌小,能通过滤器,光镜可见②以节肢动物为传播媒介,有储存宿主③专性细胞内寄生(胞浆内),原核细胞微生物④二分裂繁殖⑤有两种核酸(hésuān)(DNA和RNA)，酶系统不完整⑥多数人畜共患⑦对抗生素敏感所致疾病:发热出疹性疾病对人致病的:立克次体属东方次体属埃立克体属柯克斯体属第三十二页，共六十五页。立克次体(lìkècìtǐ)分类及其致病情况见表26-1

第三十三页，共六十五页。生物学性状(xìngzhuàng)大小:(0.3μm-0.6μm)×(0.8μm-2.0μm)形态:类似球杆菌,多形性(球形、哑铃形、长杆状或丝状等)染色:Giemsa染色法:紫色或蓝色

马氏染色法(Macchiavellostain):红色排列:散在于细胞浆中、核旁成堆(斑点热立克次体在胞浆或核内)培养:专性细胞内(活细胞内)寄生培养方法:鸡胚卵黄囊内接种组织(zǔzhī)细胞培养动物接种第三十四页，共六十五页。抵抗力:

热、消毒剂:较弱(56℃,数分钟,0.5%石碳酸、0.5%来苏,75%酒精中数分钟)抗生素:敏感:氯霉素和四环素不敏感:磺胺类低温、干燥:较强(-20℃或冷冻干燥半年以上)抗原构造：群特异性抗原,种特异性外膜抗原外斐反应(Weil-Felixreaction):斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X菌株有共同的耐热多糖类抗原。利用这些变形杆菌菌株代替立克次体抗原，进行定量非特异凝集反应（交叉凝集反应），以检测人或动物血清中的相应抗体。协助诊断(zhěnduàn)斑疹伤寒,恙虫病,滴度超过1:160有意义.第三十五页，共六十五页。致病性传播方式：普氏立克次体：头虱(tóushī)和体虱（肠上皮细胞）人是唯一宿主斑点热立克次体：第一宿主是蜱（唾液腺）第二宿主是啮齿类动物第三十六页，共六十五页。致病机理

过程:侵入->小血管内皮细胞中繁殖->破坏细胞->细胞肿胀、浸润、堵塞血管腔形成血栓->皮肤:斑疹->实质器官:相应(xiāngyīng)临床表现

毒性物质:内毒素

磷脂酶A第三十七页，共六十五页。所致疾病1.流行性斑疹伤寒(epidimictyphus)

不属于人畜共患病

病原体:普氏立克次体(R.prowazekii)

媒介:人虱宿主:人季节:冬春季症状:5～21d潜伏期->高热、头痛、肌肉痛等->4～5d:皮疹->神经、心血管和其他器官病后免疫(miǎnyì):持久,与地方性斑疹伤寒有交叉免疫

第三十八页，共六十五页。2.地方性斑疹伤寒(bānzhěnshānɡhán)(endemictyphus)

(鼠型斑疹伤寒)

属于人畜共患病病原体:斑疹伤寒立克次体(R.typhus)宿主:鼠为天然贮存(zhùcún)宿主传播方式:鼠蚤或虱->鼠间->人->人虱->人疾病:较轻，缓慢，持续时间短，很少侵害中枢神经系统病后免疫:持久，并与流行性斑疹伤寒有交叉免疫

第三十九页，共六十五页。3.恙虫(yànɡchónɡ)病(scrubtyphus)

病原体:恙虫病东方次体(O.tsutsuganushi)传播:寄生于恙螨体内，可经卵传代。人若进入恙螨的孳生地，可能受感染(亦称“丛林热”)症状:10～14d潜伏期->突然高热，被叮咬处:发红,丘疹,水疱,溃疡，周围红晕，上有黑色痂皮，称为焦痂(特征)。附近的淋巴结肿大，皮疹。治疗(zhìliáo)拖延肺炎、脑炎、DIC。第四十页，共六十五页。微生物学(wēishēnɡwùxué)检查法

(一)血清学诊断1.外斐反应(非特异性)诊断:立克次体和东方次体效价在1：160以上，或病程(bìngchéng)中效价增长2.补体结合(CF)反应(特异性)所用抗原:可溶性抗原(群特异抗原)洗涤过的颗粒抗原(种特异抗原)诊断:斑疹伤寒群、斑点热群、恙虫病、Q热(二)立克次体分离鉴定

动物:小鼠(恙虫病)雄性豚鼠(斑疹伤寒)第四十一页，共六十五页。防治(fángzhì)原则1.灭虱、灭蚤、灭鼠(mièshǔ)2.改进环境、个人卫生3.死疫苗4.广谱抗生素有效

第四十二页，共六十五页。巴尔通体属(Bartonella)

特点:1.形态结构与立克次体相似2.可以人工培养(péiyǎng)而非严格细胞内寄生模式种:杆状巴尔通体(B.bacilliformis)第四十三页，共六十五页。生物学性状(xìngzhuàng)

形状:1.血涂片:球形、椭圆形或弓形杆状；单个或成群,偶见链状2.组织中:内皮细胞原浆中,单体或圆形团块，G-，常用Giemsa或镀银染色法。3.培养(péiyǎng)中:单鞭毛培养条件:1.需氧2.常用10%兔血清和0.5%血红蛋白的半固体培养基3.可在无细胞培养基中生长4.28℃-37℃,10d以上第四十四页，共六十五页。致病性

自然宿主:人媒介:节肢动物（疣肿白蛉）所致疾病:1.奥罗亚热-秘鲁疣

(Oroyafever-verrucaperuviana)

病原体:杆状巴尔通体阶段:第1阶段:发热，贫血(奥罗亚热)第2阶段:以血管(xuèguǎn)损害为基础的肉芽肿(秘鲁疣)诊断方法:1.血涂片2.用半固体培养基分离培养

第四十五页，共六十五页。2.细菌性血管瘤(bacillaryangiomatosis)病原体:亨氏巴尔通体(B.henselae)罗卡利马巴尔通体(B.rochalimaea)

易感人群:免疫力低下（尤其AIDS）病变(bìngbiàn)组织学特征:毛细血管增生等(血管瘤)培养基:巧克力色琼脂含5%兔血的心脑浸汁琼脂3.猫抓病(cat-scratchdisease)(猫抓热)病原体:亨氏巴尔通体症状:猫抓伤后2w,发热,淋巴结肿大，破溃排脓，亦可头痛、咽痛或出现结膜炎特点:自限性疾病检查法:病变组织切片镀银染色免疫荧光染色第四十六页，共六十五页。

衣原体属

第四十七页，共六十五页。衣原体（Chamydia）特点:1.能通过细菌滤器,光镜下可观察2.有独特发育周期3.不能人工培养,不能独立生活,

为专性细胞内寄生4.原核细胞型和病毒的区别:

⑴有细胞结构⑵细胞壁类似G-⑶两种类型(lèixíng)的核酸(DNA和RNA)⑷有核糖体⑸以二分裂方式繁殖,有独特的发育周期⑹对多种抗生素敏感(四环素和红霉素)第四十八页，共六十五页。分类存在:人类、哺乳动物及禽类体内分类依据:1.抗原构造2.包涵体糖原(tánɡyuán)的有无3.对磺胺类药物的敏感性分类(4个种):1.沙眼衣原体（C.trachomatis）（人）亚种（1）沙眼生物变种（Biovartrachoma）14个血清型（2）性病淋巴肉芽肿变种(Biovar

lymphogranunlomavenereum,LGV)4个血清型（3）鼠生物变种（Biovarmouse）2.鹦鹉热衣原体（C.psittaci）（人）3.肺炎衣原体（C.pneumonia）（人）4.家畜衣原体(C.pecorum)

第四十九页，共六十五页。表27-13种致病性衣原体的比较(bǐjiào)

第五十页，共六十五页。生物学性状(xìngzhuàng)生活周期包括原体和始体两阶段光镜下：两种形态：

原体（elementarybody）

始体（initialbody）原体（elementarybody）1.形状：球形，0.2～0.4μm电镜下：核质致密和少量核糖体细胞壁坚韧

存在于细胞外2.功能:（1）有很强的感染性（吸附）（2）发育成始体：吸附->被吞噬->胞膜在原体周围(zhōuwéi)形成空泡->原体在空泡中增大->始体第五十一页，共六十五页。始体（initialbody）1.形状：球形，较原体大(0.8～1.5μm)，无致密核质，有纤细网状结构---

也称为网状体（reticulatebody）2.发育周期:原体->->始体->空泡内->

二分裂->子代原体->包涵体（inclusionbody）->原体成熟->释放(shìfàng)->再感染(24～48h)(无细胞外周期)3.是繁殖型，无感染性染色：1.Macchiavello染色法或Giemsa染色法原体：红色或紫色始体：深蓝色2.碘染色法：沙眼衣原体原体：褐色（因包涵体含糖原）第五十二页，共六十五页。第五十三页，共六十五页。第五十四页，共六十五页。培养

方法：1.鸡胚卵黄(luǎnhuáng)囊2.各种传代细胞(Hela细胞,McCog细胞)3.动物实验：某些可感染小鼠

培养时间：48～72h后观察：包涵体原体颗粒始体颗粒第五十五页，共六十五页。抗原(kàngyuán)构造

1．属特异性抗原成分：脂多糖方法：CF试验和IF法2．种特异性抗原成分：外膜蛋白（MOMP）方法：IF法和中和试验(NT)3．血清型特异性抗原成分：MOMP方法：单克隆抗体微量免疫(miǎnyì)试验

血清型:(1)沙眼生物变种:14个（A-K、Ba、Da,Ia）(2)LGV:4个(L1、L2、L2a和L3)第五十六页，共六十五页。抵抗力

热:敏感，60℃10min或37℃48h寒冷：-50℃数年化学消毒剂：0.5%石炭酸，24h75%乙醇(yǐchún)，半分钟抗生素：利福平、四环素、红霉素、磺胺敏感

青霉素:不敏感第五十七页，共六十五页。致病机理(jīlǐ)

致病物质：内毒素相似的物质致病机理：1.抑制细胞(xìbāo)代谢，使细胞(xìbāo)溶解2.引起超敏反应3.形成肉芽肿传播途径：眼－眼眼－手－眼性接触传播产道感染呼吸道感染

(不通过节肢动物传播)第五十八页，共六十五页。所致(suǒzhì)疾病

1.沙眼（trachoma）（慢性传染性角结膜炎）病原体：沙眼生物变种(biànzhǒng)的A、B、Ba、C血清型传播途径：眼—眼，眼—手—眼慢性炎症,可致盲汤飞凡等（1956年，鸡胚接种法）2.包涵体结膜炎(inclusionconjunctivitis)病原体：沙眼生物变种中除A和C以外好发