专题二 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（第二课时）课件 【新教材备课精研】高中生物选修一

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第二课时专题二课题2㈢.设置对照：

设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。实例：P23原因：

⑴土样不同，⑵培养基污染或操作失误(或者是混入了其他的含氮物质)方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验结果预测：如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。二.实验的具体操作

㈠.土壤取样

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。㈡.制备培养基：制备以尿素为唯一氮源的选择培养基◆应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。（三）样品的稀释

◆分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。

细菌稀释度为104、105、106放线菌稀释度为103、104、105真菌稀释度为102、103、104◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。㈣.取样涂布㈤.微生物的培养与观察在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

培养不同微生物往往需要不同培养温度细菌：30～37℃培养1～2d放线菌：25～28℃培养5～7d霉菌：25～28℃培养3～4d◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。◆为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先规划时间。不同种类的细菌形成的菌落，在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一度的特征，菌落特征可作为菌种鉴定的重要依据。微生物的培养与观察三.结果分析与评价(一）培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落

通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。（二）样品的稀释操作是否成功及重复组的结果是否一致

提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。

在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。四.课外延伸

测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到

伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过计数得出水样中大肠杆菌的数量。

含抗生素的选择培养基——选择出酵母菌或霉菌

（抑制细菌繁殖）

含高浓度Nacl的选择培养基——选择出金黄色葡萄球菌1.下列说法不正确的是（）

A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶

B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值

C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。B2.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，