生物性检材的个人识别

生物性检材的个人识别第一页，共一百三十页，2022年，8月28日第十三章生物性检材的个人识别编者张霁（四川大学）第二页，共一百三十页，2022年，8月28日第一节概述第三页，共一百三十页，2022年，8月28日什么是个人识别？如何进行个人识别？什么是遗传分型？什么是遗传标记？如何进行DNA分型？如何解释DNA证据？个人识别的意义？第四页，共一百三十页，2022年，8月28日个人识别分析生物性检材以揭示个体身份的鉴定工作

现场遗留物凶器各种生物检材嫌疑人/受害者遗传分型

结果分析、比对遗传分型第五页，共一百三十页，2022年，8月28日什么是遗传分型?

所谓分型，是指通过一定的技术手段确定个体特定遗传标记的表型或基因型。第六页，共一百三十页，2022年，8月28日法医遗传标记分类血型，,广义，血液的遗传差异血型，狭义，血液细胞由遗传决定的抗原差异红细胞型（ABO）白细胞型（HLA）血小板型血液蛋白质遗传多态性酶型红细胞酶型（PGM1）血清酶型血清型同种异型（Gm）血清蛋白电泳多态性（GC）DNA遗传标记DNA长度多态性(STR)DNA序列多态性(mtDNA)第七页，共一百三十页，2022年，8月28日DNA分型DNA遗传标记有足够的多态性，理论上可以通过DNA分型，而不必通过测定全基因组序列来进行个人识别DNA分型能从任何含有细胞的体液或组织中得到相同的结果能够对陈旧斑痕极微量的检材分型分析结果能构成计算机数据库快速分型的能力，可以尽快排除无辜的犯罪嫌疑人，使鉴定工作不至于延误案件调查。第八页，共一百三十页，2022年，8月28日生物性检材的特点环境、保存条件所产生的影响和某些不确定性！第九页，共一百三十页，2022年，8月28日分析生物性检材的策略观察形态学特征进行化学、免疫学、生物化学与分子生物学实验检测由简单到复杂，逐步排除，逐步缩小范围的实验分析策略减少不确定性，实现个人识别。第十页，共一百三十页，2022年，8月28日检材的发现、采集、包装和送检要点提示：提取物证检材的基本原则如何保存液体或湿润的生物检材为什么检材不能用福尔马林固定塑料袋装生物检材有何不妥物证检材提取、包装、送检主要注意事项第十一页，共一百三十页，2022年，8月28日检材的发现、采集、包装和送检

—检材的发现

散在分布;对不明显的生物性检材，需要针对生物性检材各自不同的特点和理化性质，利用不同的理化手段，努力去寻找发现。例如：血痕：鲁米诺喷雾—荧光精斑：紫外线照射—银白带暗紫晕荧光第十二页，共一百三十页，2022年，8月28日检材的发现、采集、包装和送检

—检材的收集确保证据链的有效性：

翻动现场物件或提取生物性检材前，先拍照、绘图、测量和记录其原始状态，切勿破坏原有生物性检材或添加无关痕迹或物品。提取生物性检材的方法根据物品种类而异。

可参照《中华人民共和国公共安全行业标准——法医学物证检材的提取、保存与送检》GA/T169—1997。第十三页，共一百三十页，2022年，8月28日检材的发现、采集、包装和送检

—检材的包装和送检尽快送检；不能用福尔马林固定；福尔马林会导致DNA降解、DNA分子与其它生物分子之间的交联，影响DNA分析。低温保存或晾干保存；纸袋包装。第十四页，共一百三十页，2022年，8月28日生物性检材的检验程序和要求为确保证据链的有效性及合法性，从检材受理到最终的检验报告，都需要严格遵循法医生物性检材检验的一般程序进行。第十五页，共一百三十页，2022年，8月28日第二节

血痕检验第十六页，共一百三十页，2022年，8月28日要点提示：血痕检验的目的血痕检验的一般程序血痕预实验的目的、方法和意义血痕确证实验的目的、方法和意义种属鉴定的方法和原理血痕的个人识别第十七页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕检验的目的送检检材是否是血；是人血还是动物血；测定遗传标记进行个人识别；其它检验，如出血量、出血时间、及出血部位推断等。第十八页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕检验的一般程序肉眼检查；预试验；确证试验；种属鉴定；遗传标记测定及性别鉴定；出血部位、出血量、血痕陈旧度等推断。第十九页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的肉眼检查血痕的数量、分布、位置、大小、形状、范围、色泽、它们的相互关系以及它们与现场其它物品的相互关系。作用：案件性质分析；现场重建等第二十页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的预实验目的：从大量的可疑血痕中筛除不是血痕的检材。基本原理：血红蛋白正铁血红素过氧化氢新生态氧联苯胺等有色反应第二十一页，共一百三十页，2022年，8月28日预实验的意义具有过氧化物酶活性的物质广泛存在，如脓液、鼻涕、排泄物、植物汁等。预实验阳性提示可能是血痕；灵敏度高。预实验阴性可以排除是血痕。第二十二页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕预实验-联苯胺试验血痕过氧化氢新生态氧联苯胺无色联苯胺蓝蓝色第二十三页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的确证实验目的：证明检材是血痕。原理：血红蛋白或其衍生物检测。血红蛋白正铁血红素变性珠蛋白血红素含氮化合物（如吡啶）NaOH血色原结晶高山氏试剂: 10%NaOH 3ml 30%葡萄糖 10ml

吡啶 3ml第二十四页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的种属鉴定目的：确定血痕是否是人血。意义：动物血中含有与人血遗传标记相似的物质，如A及B样抗原。存在误将动物血判为人血而测定遗传标记。原理：种属特异性生物分子检测。种属特异性蛋白抗体——人血红蛋白抗体，人血清蛋白抗体；种属特异性核酸——Alu序列。方法：免疫学、生物化学及分子生物学方法。第二十五页，共一百三十页，2022年，8月28日种属鉴定—免疫学方法抗人血红蛋白血清抗人血清蛋白血清环状沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体相遇且比例合适时，形成抗原抗体复合物，在抗原与抗血清的界面出现可见的白色沉淀环。酶联免疫吸附试验：辣根过氧化物酶标记抗人IgG单克隆抗体，抗原抗体反应后，通过酶促底物显色。第二十六页，共一百三十页，2022年，8月28日种属鉴定—分子生物学方法Alu序列人的Alu序列有别于其它哺乳动物人的Alu序列引物：

Alu9.1 5'-GGCACTTTGGGAGGCCAAGG Alu9.2 5'-TACAAGCTTGTGCCACCATGCCAAC第二十七页，共一百三十页，2022年，8月28日种属鉴定—分子生物学方法PCR体系：50μl20ngDNA10×PCR缓冲液5μl0.2μmol/ml引物200μmol/LdNTP1.5mmol/LMgCl20.45%Triton-1001UTaq酶2%琼脂糖电泳EB染色PCR产物130bpPCR循环参数：94℃变性5min94℃30s55℃30s 循环30次72℃1min72℃保温10min。第二十八页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的个人识别基因表达产物水平的遗传标记测定 红细胞ABO血型 红细胞酶型 血清型DNA多态性分析性别鉴定第二十九页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的ABO血型检测特点：红细胞膜上ABO血型抗原密度高，抗原性强，仅需少量检材就能分型；ABO血型抗原决定簇为糖链，对环境中理化因数的影响有较强的抵抗力，即使陈旧血痕也能分型；ABO血型抗原也广泛分布在人体各种组织器官中，为结果比对提供了广泛的检材来源。第三十页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的ABO血型检测

—吸收实验原理：有A、B抗原时，能与相应的抗-A、抗-B抗体发生特异性的抗原抗体反应，使抗血清中的游离抗体减少或消失，不再与相应的指示红细胞发生凝集反应或凝集反应强度明显减弱。若血痕中无A、B抗原，则不能抑制抗血清中的相应抗体，抗体与指示红细胞的凝集反应强度不改变。第三十一页，共一百三十页，2022年，8月28日吸收实验结果判读抗血清稀释倍数 抗-A+A红细胞抗-B+B红细胞抗-H+O红细胞检材与对照248163264248163264248163264血型判定未吸收的抗血清+++++-+++++-++++--效价明确已知A血痕已知B血痕------+++++-+++++-------+-----+-----对照正确

检材1无血部位有血部位+++++-+++++-+++++-+++++-++++--------O型

检材2无血部位有血部位+++++-------+++++-+++++-++++--+-----A型

检材3无血部位有血部位+++++-+++++-+++++-------++++--+-----B型

检材4无血部位有血部位+++++-------+++++-------++++--+-----AB型

第三十二页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的DNA多态性分析DNA提取：Chelex-100法等PCR-STR检测第三十三页，共一百三十页，2022年，8月28日血痕的性别鉴定X、Y染色质鉴别性激素检测H－Y抗原检测DNA性别鉴定—人类牙釉质基因（Amelogenin）： Amel-X（Xp22） Amel-Y（Y11p22.2）

人类Amel-X与Amel-Y的内含子长度不同。针对Amel-X或Amel-Y碱基缺失部位设计引物，可以用PCR扩增X、Y特异性片段。第三十四页，共一百三十页，2022年，8月28日人类牙釉质基因PCR扩增目标PCR引物PCR产物大小（bp）X、Y染色体同源的Amelogenin基因第一内含子,该区X染色体有6bp缺失5'-CCCTGGGCTCTGTAAAGAATAGTG-3'5'-ATCAGAGCTTAAACTGGGAAGCTG-3'X=106Y=112问题：用PCR仅仅分析Y或X一种染色体作血痕性别鉴定是危险的。因为缺乏内对照，扩增失败时可能会误将男性判为女性，或误将女性判为男性。如：男性不育者常见Y-染色体微缺失，导致Amel-Y片段丢失。男性：Amel-X、Amel-Y女性：Amel-XAmel-X/Y引物第三十五页，共一百三十页，2022年，8月28日第三节

精液斑检验第三十六页，共一百三十页，2022年，8月28日要点提示：精液斑检验的意义及程序精液斑预试验确证试验的原理、方法和意义DNA多态性检测的价值、条件与结果评价第三十七页，共一百三十页，2022年，8月28日精液斑检验要解决的问题可疑斑痕是否为精斑： 预实验、确证实验是人精斑还是动物精斑： 种属试验是何人的精斑 个人识别第三十八页，共一百三十页，2022年，8月28日精斑检验的一般过程肉眼检查预实验确证实验种属鉴定个人识别确定精斑部位：紫外灯下呈银白色荧光提示斑痕可能是精斑：酸性磷酸酶---磷酸苯二钠试验确证精斑：精子检出；p30人精斑？p30第三十九页，共一百三十页，2022年，8月28日精斑检验的肉眼检查深色布类上的浓厚精斑，呈灰白色浆糊状斑迹，较稀薄的精斑则不易察见；浅色布类上的精斑多呈黄白色地图状，边缘色深。放大镜检查，可在布纤维表面或中间见黄白色小鳞片。载体上精斑手触有硬感，新鲜精斑有特殊臭味。第四十页，共一百三十页，2022年，8月28日紫外线下发银白色荧光（黄素），边缘呈紫蓝色；紫外线检查为非特异性检查手段！第四十一页，共一百三十页，2022年，8月28日精斑预实验阳性结果提示可能是精斑，不能确证精斑！酸性磷酸酶检出—磷酸苯二钠试验磷酸苯二钠酸性磷酸酶萘酚安替比林铁氰化钾红色醌类化合物第四十二页，共一百三十页，2022年，8月28日精斑确证实验精子检出：复染法—酸性品红亚甲兰染色头部呈红色，尾部呈兰色免疫学试验:p30检出—前列腺特异性抗原具有高度的种属特异性和器官特异性；保存时间长第四十三页，共一百三十页，2022年，8月28日精斑的个人识别—ABO血型检测中和试验：精斑中的水溶性A、B、H物质与相应的抗体结合，使抗体与指示红细胞的凝集反应能力降低或完全消失。反应系统中加指示红细胞后，若红细胞不凝为中和试验阳性反应，证明精斑中含有与抗体相对应的抗原；红细胞凝集为阴性反应，证明精斑中不含与抗体相对应的抗原。第四十四页，共一百三十页，2022年，8月28日精斑指示精斑浸出液稀释倍数编号抗血清红细胞2481632641282565121024判型1>HO----+2+2+2+2+2+A分泌型

>AA--------2+2+

>BB2+2+2+2+2+2+2+2+2+2+

2>HO----+2+2+2+2+2+B分泌型

>AA2+2+2+2+2+2+2+2+2+2+

>BB--------2+2+

3>HO----+2+2+2+2+2+AB分泌型

>AA--------2+2+

>BB--------2+2+

4>HO------+2+2+2+O分泌型

>AA2+2+2+2+2+2+2+2+2+2+

>BB2+2+2+2+2+2+2+2+2+2+

抗血清的效价一定要标化（2或4为好）；精斑检材与无精斑检材的抑制凝集相差3级以上，证明精斑中含有相应的血型抗原第四十五页，共一百三十页，2022年，8月28日精斑的DNA检测精子细胞核是富含二硫基的交联蛋白组成的网状结构，能抵抗各种类型的去污剂作用，对外源性蛋白酶水解也有相当强的抵抗作用，必须在DTT等试剂的作用下，使二硫基断裂，将-S-S-还原成-SH，核蛋白才能被SDS、蛋白酶K分解，释放出DNA。第四十六页，共一百三十页，2022年，8月28日第四节

其他生物性斑迹分析第四十七页，共一百三十页，2022年，8月28日检材文献唾液（含有核细胞）Sweetetal.(1997)尿液Beneckeetal.(1996)排泄物Hopwoodetal.(1996)指甲屑Wiegandetal.(1993)烟蒂Hochmeisteretal.(1991)邮票Hopkinsetal.(1994)信封封口WordandGregory(1997)头皮屑HerberandHerold(1998)指印vanOorschotandJones(1997)细胞成分——DNA分析第四十八页，共一百三十页，2022年，8月28日混合斑分析Y-STR基因座在混合斑中精液成分的个人识别中的应用优势：只有男性成分可以被扩增和检测！第四十九页，共一百三十页，2022年，8月28日第五节

毛发检验第五十页，共一百三十页，2022年，8月28日毛发检验要解决的问题有：毛发还是纤维？人毛？动物毛？来自人体何部位？自然脱落？暴力拔脱？推断致伤物？毛发的个人识别第五十一页，共一百三十页，2022年，8月28日毛发的结构毛发是皮肤的一种特殊的附属器，是皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。毛尖——是毛干的游离末端，毛干向毛尖逐渐变细而尖毛干——是裸露于皮肤外部的部分，由角化上皮细胞（无细胞核）组成，中心向外可以分为：毛小皮：人——毛小皮花纹通常为细小波浪状；毛皮质：人——皮质发达；毛髓质：人——髓质不发达、而且髓质不连续。毛根——是埋在皮肤内的部分（含有核细胞）毛球：毛根起始端膨大和球状的部分；毛囊：包裹毛根的一管状结构，内层为上皮根鞘、外层为纤维组织鞘；毛乳头：毛球和毛囊末端膨大，底面内凹，含毛细血管和神经的结缔组织。第五十二页，共一百三十页，2022年，8月28日毛发与其他纤维的鉴别毛发的主要成分为角蛋白中的硬角蛋白，理化性质稳定。毛发的角蛋白中含有3％-5％的硫，燃烧时发出特殊的臭味。肉眼观察毛发与纤维易于区别。有困难时可用显微镜检查，只有毛发才有毛小皮、皮质、髓质三层特有的结构。第五十三页，共一百三十页，2022年，8月28日毛发与其他纤维的鉴别捻搓试验燃烧试验植物粘胶：连续燃烧，有烧焦气，灰少而飞扬；毛发：难于燃烧，有特殊的焦气，灰球不飞扬；合成纤维：遇火收缩；矿物纤维：不被燃烧。第五十四页，共一百三十页，2022年，8月28日人毛与动物毛的鉴别毛的结构人毛兽毛毛小皮鳞片小，薄纹理呈波浪状，毛小皮游离缘呈细锯齿状鳞片大而厚，纹理粗大，毛小皮游离缘呈粗锯齿状皮质宽，占毛干直径2/3左右，色素颗粒多分布在皮质边缘，较均匀窄，占毛干直径1/2—1/3，色素颗粒多，大小不一，分布不均匀髓质窄，不连续（个别部位的毛发可出现不连续状）占毛干直径1/4—1/5宽，连续，多数兽类有特殊的花纹，占毛干直径1/3以上外表颜色一般为一个颜色常见一根毛发上有几种颜色第五十五页，共一百三十页，2022年，8月28日人毛部位的确定可以根据毛发的长短、粗细、色泽、形状、卷缩方向、末端特征、横断面的形状、髓质的位置以及表面附着物等特点，鉴别不同部位人毛发。第五十六页，共一百三十页，2022年，8月28日毛发的脱落和损伤自然脱落：毛球呈棒状，下方闭锁，无毛囊附着，5～10%的亚硝基铁氰化钠溶液染色无颜色反应暴力拔脱：毛球湿润，毛根常附有毛囊的残片，下端开放或呈沟状弯曲，染色成红色第五十七页，共一百三十页，2022年，8月28日毛发的钝器伤：钝器打击时，毛发的损伤程度与致伤工具的质量作用力的大小和毛发依附物体的性质有关。钝器作用部位变宽扁平，皮质纤维分裂，部分断裂或完全断裂。毛发的锐器伤：锐器所致的毛发损伤，断面的形态特征与锐器刀口的锋利程度有关。锋利锐器所致毛发断面平滑整齐，毛干不碎裂，皮质纤维不分裂。第五十八页，共一百三十页，2022年，8月28日毛发的个人识别形态学观察微量元素含量毛发的ABO血型测定毛发的DNA分析带毛囊的毛发—STR毛干的mtDNA分析第五十九页，共一百三十页，2022年，8月28日mtDNA分析WhatismtDNAtypingmeettheneedsofforensicidentificationwithmtDNAtypingtakecautiontomtDNAtyping第六十页，共一百三十页，2022年，8月28日•每个细胞中线粒体基因组有多个拷贝•母系遗传mtDNA遗传标记第六十一页，共一百三十页，2022年，8月28日线粒体DNA的结构第六十二页，共一百三十页，2022年，8月28日核DNA（nuclearDNA）线粒体DNA(mtDNA)基因组大小3.2×109bp16569bp细胞内拷贝数2（父母各提供一个等位基因）﹥1000细胞内DNA百分比99.75%0.25%结构线性；包裹在染色体内环状遗传来源父亲和母亲母亲染色体配对双倍型单倍型生殖重组是否复制修复是否特异性个体特异性（同卵双胞胎除外）没有个体特异性（同一母系亲属相同）突变率低至少是核DNA的5倍～10倍参考序列2001年人类基因组计划发表1981年Anderson等发表第六十三页，共一百三十页，2022年，8月28日参考序列1981年在英国剑桥FrederickSanger实验室首次对人类mtDNA序列进行了全序列测定。这个最初测定的序列作为比对的参考序列，通常被称为Anderson序列或剑桥参考序列。1999年，Andrewsetal对剑桥参考序列所用的胎盘样本进行了重新测序。更正了最初公布序列中的11个碱基。第六十四页，共一百三十页，2022年，8月28日剑桥参考序列和修正剑桥序列参考序列比较碱基位置线粒体基因组区域原始剑桥参考序列修正剑桥参考序列备注3106～310716SrRNACCC错误3423ND1GT错误4985ND2GA错误9559COⅢGC错误11335ND4TC错误13702ND5GC错误14199ND6GT错误14272ND6GC错误14365ND6GC错误14368ND6GC错误14766CytbTC错误（插入Hela序列）第六十五页，共一百三十页，2022年，8月28日正确的序列在nt3106～nt3107只有一个C，整个线粒体基因组是16568bp而不是最初报道的16569bp。为了保持历史数据，在nt3107由一个缺失来占据一个位置。法医学中最常应用的两个高变区的序列没有差异，它涵盖了nt16024～nt16365和nt73～nt340第六十六页，共一百三十页，2022年，8月28日参考序列Andersonetal,1981.Anderson序列（GenBank：M63933）也称为剑桥参考序列（CRS）。过去依据与剑桥参考序列L链比较的差异报告结果Andrewsetal,1999.修正的剑桥参考序列（rCRS）作为序列比对时的参照标准为16568bp,而不是传统所接受的16569bpIngmanetal,2000.NCBI人类基因组库用线粒体基因组参考序列（RefSeqmtGenome），GenBank中为16571bp第六十七页，共一百三十页，2022年，8月28日•每个细胞中线粒体基因组有多个拷贝•母系遗传•单倍型传递mtDNA遗传标记的特点第六十八页，共一百三十页，2022年，8月28日

mtDNA母系遗传模式第六十九页，共一百三十页，2022年，8月28日mtDNA分型的法医学意义在检测个体间的差异上，线粒体DNA不如其他方法有用。但mtDNA对陈旧骨、牙、严重腐败或焚烧的残骸以及单根毛干的检测成功率比核DNA高。与核DNA相比，每个细胞中含有多个mtDNA拷贝。mtDNA的大拷贝数提高了从微量或严重降解的检材中得到足量DNA的成功率。在仅能得到毛发、骨、牙等组织的案件中，能提取得到的DNA量极少，这种情况下从mtDNA中得到分型结果的可能性远远高于核DNA遗传标记。除非发生突变，同一母系中的个体具有相同的mtDNA序列。通常mtDNA在很多代当中的传递都是稳定的，通过mtDNA检测可以估计几代人间的亲缘关系。第七十页，共一百三十页，2022年，8月28日法医mtDNA分型个体间mtDNA差异最大的区域在D环区，包括高变区I（HVI，342bp）和高变区II（HVII,268bp）。无血缘关系个体中mtDNA的HVI和HVII区域变化率大约在1-3%，即每100个碱基就有1-3个不同，所检测的610个碱基有7-14个碱基不同。第七十一页，共一百三十页，2022年，8月28日mtDNA频率估计

在包含N个mtDNA分型的数据库内，观察到一定次数（X）的某一mtDNA分型，其频率（p）用以下公式计算：

p=X/N如果在数据库内未观察到分型，可信区间的上限为：1-α1/Nα代表可信系数（0.05，95％的可信区间），N代表数据库内的个体数例如,在1148个非裔美洲人分型中，mtDNA型16129A、263G、309d、315.1C观察到两次，调查mtDNA群体数据库时在686个西班牙人分型中未观察到，计算各个样本群体稀有分型如下：非裔美洲人群：p=2/1148+1.96[(2/1148)(1-(2/1148))/1148]1/2

=0.0017+0.002=0.004=0.4%西班牙人群：1-（0.05）1/686=1-0.9956=0.0044=0.44%第七十二页，共一百三十页，2022年，8月28日检材状况不好(数量与质量)与测序技术潜在的误差,使被测样本单个碱基的不同不能作为法医学区分个体的依据。线粒体DNA遗传标记呈单倍型遗传，整个线粒体基因组相当于一个遗传标记。在法医学实践中，其个人识别能力有限。takecautiontomtDNAtyping第七十三页，共一百三十页，2022年，8月28日第六节

骨骼检验第七十四页，共一百三十页，2022年，8月28日骨骼检查要解决以下问题：是否骨骼？人骨还是动物骨？一人骨或是多人骨？人骨的个人识别，包括根据骨骼特征推断死者的性别、年龄、身高，面貌复原与颅像重合及遗传标记分析；死后经过时间的推测及损伤的鉴定。第七十五页，共一百三十页，2022年，8月28日骨的确定肉眼检查：根据骨骼的解剖学与组织学结构特点及骨骼成分的测定进行判断。显微镜检查： 骨片镜检，观察有无骨小管、骨板、哈佛氏管等骨组织学特征。焚烧试验： 表面失去光泽，重量减轻，质地变松脆。第七十六页，共一百三十页，2022年，8月28日骨骼的种属鉴定区别点人骨动物骨哈佛氏管形态规则，横断面呈圆形或椭圆形直径大，平均比动物骨大2-3倍数量少，180倍镜下平均每视野可见7—8个型态不规则，多呈长圆形或条形直径小数量多，180倍镜下平均每视野可见10个以上骨板层排列同心圆骨板排列整齐同心圆骨板排列不整齐，有的缺少环形骨板骨单位界线骨单位之间界线清楚骨单位之间界线不清楚第七十七页，共一百三十页，2022年，8月28日一人骨或多人骨的鉴别主要根据骨骼的解剖学结构、定位、数目、排列及各骨的连接吻合情况和有无重复骨等进行鉴定。DNA分析第七十八页，共一百三十页，2022年，8月28日骨的个人识别形态观察测量方法图像分析方法分子生物学方法第七十九页，共一百三十页，2022年，8月28日人骨的性别鉴定项目男性女性一般性状狭小而高，骨质较重宽大而矮，骨质较轻骨盆壁肥厚粗糙，侧壁内倾而深纤薄光滑，侧壁平直而浅入口纵径大于横径，叶心型或楔型横径大于纵径，呈圆型或椭圆型出口狭小宽大盆腔狭小而深，上口大，下口小，呈漏斗状短而宽，呈圆桶型骶骨狭而长，呈等腰三角形，弯曲度大，岬明显突出短而宽，呈等边三角形，弯曲度小，岬略突出坐骨大切迹窄而深浅而宽坐骨结节不外翻外翻耳状面大而直，涉及3个骶椎小而倾斜，涉及2-2.5个骶椎；分娩后其前下方可见分娩沟髋臼大，朝向外小，朝向前外耻骨联合面高；上下枝结合部呈三角形；耻骨角小，70º-75º低；结合部呈方形；耻骨角大，90º-110º，分娩后联合面背侧可见分娩瘢痕闭孔大，卵圆形，内角约110º小，三角形，内角约70º髂翼位置垂直水平骨盆的性别差异第八十页，共一百三十页，2022年，8月28日项目男性女性一般性状粗糙，肌线明显，大而重较光滑，肌线不明显，小而轻薄颅骨的厚度较厚较薄颅腔较大，容积约1450ml较小，容积约1300ml侧面观前额及顶部呈弧线状前额垂直，顶部平坦额结节不明显明显上眉间窝有无眉间发育明显，突出于鼻根之上不明显，较平直眉弓明显突起，表面多有小孔不明显，表面几无小孔眼眶类方型，眶上缘较钝类圆形，眶上缘较锐鼻根点凹陷较深较浅梨状孔窄高宽低项线粗大不明显枕外隆凸粗大较小乳突大，后缘长，围径大较小，后缘短，围径小枕骨大孔大小枕骨髁大小下颌体较高，平均高度为29．1m较低，平均高为26．3m下颌枝较宽，最大宽度为42．4mm较窄，最大宽度为39．1mm下颌骨角外翻，较小，平均小于120°外翻不明显，较大，平均大于120°下颌骨颊区方圆或钝圆，结节强壮粗糙圆形或锐圆，结节中等，平滑颅骨的性别差异第八十一页，共一百三十页，2022年，8月28日人骨的年龄测定骨骼骨化中心出现（出生后）骨骺愈合时间骨骼骨化中心出现（出生后）骨骺愈合时间腕骨头状骨2-3月

肩胛骨喙突1岁18-24岁钩骨2-4月

肩峰突端11-18岁18-24岁三角骨2-4岁

关节盂、下角、脊柱缘11-18岁

月骨3-5岁

舟骨5-7岁

锁骨胸骨端18-20岁20-25岁大多角骨5-7岁

小多角骨5-7岁

跟骨结节6-12岁16-18岁掌骨1-3岁14-16岁第1、2、3楔骨9-11月

指骨1-3岁14-16岁足舟骨9-11月

尺骨鹰嘴9-11岁15-17岁胫骨上端出生-2月17-20岁小头6-8岁16-18岁下端4-6岁16-18岁桡骨小头5-7岁15-17岁腓骨上端3-5岁17-20岁下端7-9月16-18岁下端10月-2岁16-18岁肱骨头出生-3月15-17岁髌骨3-5岁

大结节7-9月15-17岁

小结节2-4岁15-17岁股骨头3-5月17-19岁小头3-5月16-18岁大转子3-5岁17-19岁内上髁6-8岁16-18岁小转子9-11岁17-19岁外上髁11-13岁16-18岁下端出生-5月17-20岁滑车9-11岁16-18岁髋骨12-19岁20-25岁四肢骨骨化中心出现及骨骺愈合的时间第八十二页，共一百三十页，2022年，8月28日年龄(岁)联合面顶部结节后缘前缘周缘17-19前后凸，嵴沟明显，高3mm40％极明显，高lOmm18岁开始部分出现并外翻

20-22凸渐消，嵴沟明显，高2mm46.5％可见，高7mm继续扩大，仍外翻

23-26嵴沟仍明显，高1.5mm仍可见大部形成开始部分形成逐渐形成

27-30嵴沟仍可见，嵴峰较平50％仍可见，高5mm基本形成，边缘较锐大部形成(60％)尚未形成31-35嵴沟基本消失，成为平面21.8％仅见残痕，高3mm全部形成，大部增宽全部形成已形成36-40中央开始凹陷，表面粗糙结节残痕消失开始向后扩散70.6％隆起开始出现隆起41-49中央明显凹陷,表面粗糙

继续向后扩散46岁起全部隆起增宽，明显隆起50-59表面开始变光滑，出现小孔

明显向后扩散,边缘钝全部出现隆起隆起极显著边缘钝60以上表面光滑，小孔形成小凹

边缘较锐

边缘较锐耻骨联合面的年龄特征第八十三页，共一百三十页，2022年，8月28日从骨骼推算身高将每块骨骼按解剖学位置排列后，测得全身骨骼的高度，再加上5cm软组织厚度，即为死者的身高。骨骼不完整时须通过回归方程推算。第八十四页，共一百三十页，2022年，8月28日以左侧肢体部分长骨推算中国汉族男性(21-30岁)身高的回归方程式如下。身高：2.30X股骨最大长+64.38±3.48(cm)身高：2.22X胫骨最大长+85.34±3.87(cm)身高：2.54X腓骨最大长+76.15±3.81(cm)身高：2.66X肱骨最大长+82.64±4.13(cm)身高：2.86X尺骨最大长+92.82±4.47(cm)身高：3.49X桡骨最大长+82.71±4.14(cm)第八十五页，共一百三十页，2022年，8月28日图像分析方法面貌复原面貌雕塑法颅骨侧面描记法颜面影像复原形态图法颅像重合第八十六页，共一百三十页，2022年，8月28日分子生物学方法X-Y染色体同源特异片段鉴定性别；PCR-STR；mtDNA识别个体。第八十七页，共一百三十页，2022年，8月28日骨骼样本的DNA分析过程埋葬地表面清洁抑制物的移除线粒体DNA分析STR分析挖掘软组织处理人类学分析制样骨骼样本的表面污染的处理骨骼实验室的准备骨骼的研磨、粉末化处理DNA提取提取后的DNA纯化PCR后的纯化PCRDNA定量SNP分析结果的评价新一代测序技术的应用RTG3D第八十八页，共一百三十页，2022年，8月28日死后经过时间的推测及损伤的鉴定完全骨化后，由骨骼推测死后经过时间比较困难。主要依据昆虫的侵袭情况、尸体的崩解情况、骨质无机盐含量来推断。骨骼损伤的形状可长期保存，对于鉴定有重大意义。如颅骨钻孔术后缺损有助于个人识别；根据骨骼损伤确定损伤性质，有助于推断致伤物，判明死因。第八十九页，共一百三十页，2022年，8月28日第七节

牙齿鉴定第九十页，共一百三十页，2022年，8月28日牙齿检查要解决以下问题：是否人牙齿？推断年龄；牙齿的个体生活特征；个人识别。第九十一页，共一百三十页，2022年，8月28日年龄推断根据牙齿的萌出顺序推断年龄乳牙上颌下颌中切牙6-95-8侧切牙6.5-106-9尖牙16-2014-18第一磨牙12-1810-14第二磨牙20-3018-24人类乳牙萌出时间（月）第九十二页，共一百三十页，2022年，8月28日恒牙上颌男女下颌男女中切牙6-86-96-55-8侧切牙7-107-106-85-9尖牙10-139-129-128-11第一双尖牙9-129-129-129-12第二双尖牙10-139-1210-139-13第一磨牙6-75-76-75-7第二磨牙11-1411-1411-1310-13人类恒牙萌出时间（岁）第九十三页，共一百三十页，2022年，8月28日根据牙齿的磨耗程度推断年龄磨耗度东北地区M1M2华南地区M1华北地区M1M2Ⅰº17.39-21.9419.76-26.5816.022-2322-24Ⅱº22.21-25.2328.49-30.2524.526-2929-31Ⅲº30.85-32.6133.78-38.4035.228-3636-40Ⅳº37.32-44.7239.95-53.9544.239-4344-48Ⅴº43.55-59.5959.5958.948-5755-65Ⅵº60.5-70.7--第一、二磨牙(M1、M2)的磨耗度与年龄的关系第九十四页，共一百三十页，2022年，8月28日个体生活特征牙齿可反映的个体生活特征有:叼烟斗、长期嗑瓜子或咬硬物的人，其切牙切端常有相应的磨耗；长期吸咽、饮茶的人，牙齿表面有烟垢或茶垢；吹玻璃的工人及木工的牙齿常有职业的印记；氟牙说明曾在高氟区长期居住过；槟榔齿以亚热带地区的妇女为多见；四环素牙常反映儿童时期曾经长期服用四环素类药物。第九十五页，共一百三十页，2022年，8月28日个人识别牙科学资料分析方法 牙科学的详细病历是十分重要的个人识别资料。分子生物学方法 牙髓细胞第九十六页，共一百三十页，2022年，8月28日第八节

其他组织检验第九十七页，共一百三十页，2022年，8月28日软组织

腐败程度决定了软组织DNA分析的成败石蜡包埋组织

甲醛固定的时间决定了DNA分析的成败第九十八页，共一百三十页，2022年，8月28日第九节

个人识别结果评估第九十九页，共一百三十页，2022年，8月28日攻击DNA证据的几个方面一般问题：实验室无质量控制技术人员的培训不足不能提供充分的材料第一百页，共一百三十页，2022年，8月28日证据链问题记录不全样品保存、转运不当提交伪证更改证据第一百零一页，共一百三十页，2022年，8月28日技术问题实验室未按要求操作处理不当造成证据的污染混合样品的分析抑制检验的因素谱带“漂移”方法未经有效性验证第一百零二页，共一百三十页，2022年，8月28日统计问题群体研究不足数据库使用不当不符合平衡规律位点间连锁第一百零三页，共一百三十页，2022年，8月28日遗传标记

检材处理策略

实验结果解释第一百零四页，共一百三十页，2022年，8月28日基本策略通过遗传标记分析为案件侦查提供线索,为审判提供科学证据。如强奸案，若从被害人阴道拭子中取得的精斑与嫌疑人的不同，这就为排除该嫌疑人提供了证据；如谋杀案，若测出嫌疑凶器上的血痕与被害人血液具有相同的遗传标记，则在某种程度上支持嫌疑凶器是作案工具的论点。第一百零五页，共一百三十页，2022年，8月28日个人识别原理1现场检材

个人识别

不同排除嫌疑人嫌疑人样本遗传标记分型相同不能排除嫌疑人实验技能第一百零六页，共一百三十页，2022年，8月28日个人识别原理2现场检材

个人识别估计嫌疑人

相同

是现场检材嫌疑人样本遗传标记分型供体的可能性

统计理论第一百零七页，共一百三十页，2022年，8月28日法医遗传标记涉及的统计学分析概率基础定义，范围，算法乘法定律：多个事件同时发生P(A)=P(A1)P(A2)加法定律：多个事件发生一个P(A)=P(A1)+P(A2)第一百零八页，共一百三十页，2022年，8月28日遗传标记个人识别系统效能个案能力第一百零九页，共一百三十页，2022年，8月28日遗传标记个人识别的系统效能系统效能用个人识别能力(discriminationpower,DP)定量评价。个人识别能力指从群体中随机抽取两名个体，其遗传标记表型不相同的概率。个人识别能力DP=1-ΣPi2第一百一十页，共一百三十页，2022年，8月28日个人识别的计算个人识别能力DP=1-ΣPi2以ABO型为例，A、B、O、AB表型频率分别为：P1:0.2642,P2:0.3353,P3:0.290，P4:0.110则：DP=1-ΣPi2

=1-[0.26422+0.33532+0.29052+0.11002]=0.713第一百一十一页，共一百三十页，2022年，8月28日STR遗传标记TH01的个人识别能力计算数据表型表型数表型频率(Pi)Pi26-620.0170．0002896-790.0740．0054766-810.0080．0000646-9150.1240．0153766-1030.0250．0006257-770.0580．0033647-820.0170．0002897-9320.2640．0696967-9.330.0250．0006257-1020.0170．0002898-970.0580．0033648-1020.0170．0002899-9260.2150．0462259-9.340.0330．0010899-1050.0410．0016819.3-1010.0080．000064合计1211.000．148805第一百一十二页，共一百三十页，2022年，8月28日TH01的个人识别能力DP=1-Q=1-ΣPi2

=1-0.148805=0.851195≈0.8512意味着在成都汉族群体中随机抽取两个无关个体样本，两者TH01分型结果不相同的概率为0.8512,纯粹由于机会导致两者TH01分型结果一致的概率为0.1488。第一百一十三页，共一百三十页，2022年，8月28日累积个人识别能力TDP=1-Q1xQ2xQ3x…Qk=1-∏Qj第一百一十四页，共一百三十页，2022年，8月28日遗传标记数目越多，鉴别能力愈强。系统效能愈高基因座个人识别能力累积个人识别能力TPOX0.7890.789D3S13580.8560.9696FGA0.9520.99854D5S8180.9120.999872CSF1PO0.8580.9999818D7S8200.9170.99999849D8S11790.9500.999999924TH010.8330.999999987VWA0.9240.999999999D13S3170.931>0.999999999D16S5390.921>0.999999999D18S510.958>0.999999999D21S110.931>0.999999999第一百一十五页，共一百三十页，2022年，8月28日实质是比较现场收集到的法医物证检材与嫌疑人样本，判断是否来自同一个体。若检材与样本DNA图谱相同，称两份检材的DNA图谱匹配。两份检材DNA图谱匹配有两种可能的原因：两份检材来自同一个体；两份检材不是来自同一个体。理论上来自群体中的一名随机个体，仅仅因为DNA图谱碰巧与检材的DNA图谱相同而出现了匹配。遗传标记对个案的鉴定能力第一百一十六页，共一百三十页，2022年，8月28日随机匹配概率在法医物证学范畴内,随机匹配概率方法指的是在假设条件(H0)

下，获得证据DNA图谱的概率。这是一种条件概率。这个假设简单说就是假定DNA图谱来自群体中一名与嫌疑人没有关系的随机个体。用竖线分开条件与事件，竖线右边为条件，左边为事件，随机匹配概率可写成Pr(E|H0)。第一百一十七页，共一百三十页，2022年，8月28日随机匹配概率对于仅由一名个体留下的斑痕，如血痕，随机匹配概率数值上等于人群中这种DNA图谱的频率。Pr(E|H0)=1XP(X)式中P(X)为人群中这种DNA图谱的频率，以频率估计概率，即为发现这种DNA图谱的理论概率。第一百一十八页，共一百三十页，2022年，8月28日正确的理解随机匹配概率非常重要不是指嫌疑犯以外的人有罪的概率不是指其他人在犯罪现场留下相关证据的概率不是指被告无罪的概率不是指现实社会中能找到和已知基因型完全匹配的概率随机匹配概率是对一个特定的DNA图谱可能出现在人群中的估计概率。随机匹配概率也可以理解为从一个人群中随机抽取一个样本,会出现特定DNA图谱的理论概率。

随机匹配概率第一百一十九页，共一百三十页，2022年，8月28日随机匹配概率改变随机匹配概率的叙述方法和意思通常意义下是检举人的谬误或颠倒条件概率的谬误,如把Pr(E|H0)理解为Pr(H0|E)。典型谬误：所指定的DNA图谱只有0.0001的概率来自除嫌疑人外的其他人典型谬误：只有0.0001的概率被告是无罪的。正确的陈述：由无关个体组成的群体中随机抽到所观察DNA图谱的可能性预期为0.0001。第一百二十页，共一百三十页，2022年，8月28日随机匹配概率应用

Pm=1XP(X)遗传标记

ABOMNVWA表型组合AM15-18表型频率0.2640.4760.021Pm=1XP(X