食品工程与科学论文-保健品中β-胡萝卜素的含量分析

PAGEPAGE7目录摘要……………1关键词…………………………1Abstract………………………1Keywords………………………1引言………………2一、实验部分……………2（一）仪器与试剂……………21．仪器………………22．检验试剂…………2（二）测定方法……………31．色谱条件…………………32.标准品储备液的配制……………………33.样品溶液的制备…………34.标准曲线…………………35.样品测定…………………3（三）讨论…………………31.样品的取样量………………32.提取溶剂的选择…………33.流动相的选择……………3二、结果与分析………………41.标准曲线…………………42.精密度试验………………53.回收率试验………………64.对不同品牌的β-胡萝卜素胶囊测定……………………6三、结论………………………6致谢……………7参考文献………………………8保健品中β-胡萝卜素的含量分析摘要：对不同品牌保健品中β－胡萝卜素的含量进行分析，拟建立HPLC快速测定保健品中β-胡萝卜素含量方法。方法：甲醇：氯仿=85：15(v/v)；Agilent—Cl8柱(4.6mm×300mm，5um)；流速1.0mL／min，柱温30℃，检测波长448nm，进样量10uL。结果β-胡萝卜素在10ug／mL～50ug／mL时，浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9994)，加标回收率为98.2％～101.2％，最低检出限为1ug／mL，相对标准偏差RSD为0.23％～2.6％。结论：用该方法测定了多种保健品中的β-胡萝卜素，操作简单、快速、准确，关键词：β-胡萝卜素；RP—HPLC；保健品；含量分析Healthcareproductsofβ-carotenecontentanalysisStudentmajoringinFoodscienceandEngineeringQingGaoTutorYanxiaLiAbstract：Todifferentbrandsofhealthproductsofβ-carotenecontentcarriesontheanalysis,proposedtheestablishmentofhealthcareproductsHPLCrapiddeterminationofβ-carotenecontentinmethod.Methods:methanol:chloroform=85:15(v/v);AgilentCl8column(4.6mm×300mm,5um);theflowratewas1mL/min,columntemperaturewas30℃,thedetectionwavelengthwas448nm,samplingquantity10uL.Resultsβ-carotenein10ug/mL～50ug/mL,concentrationandpeakareashowedagoodlinearrelationship(R2=0.9994),therecoveryis98.2%～101.2%,theminimumdetectablelimitof1ug/mL,therelativestandarddeviationis0.23%～2.6%RSD.Conclusion:thismethodwasusedtodeterminationofavarietyofhealthproductsofβ-carotene,operationissimple,rapid,accurate,withsatisfactoryresults.Keywords:Betacarotene；RP—HPLC；Healthcareproducts；Contentanalysis引言β-胡萝卜素，名字得自拉丁文的胡萝卜，属于天然化学物家庭的一员。β—胡萝卜素是缓解眼睛疲劳、保持正常视觉、保持上皮细胞健全和提高人体免疫力的主要营养素，会被人体转换成维生素A，被人们称为”维生素A原”，β-胡萝卜素具有维生素A所没有的较好的抗氧化作用和预防癌变的作用。和其他的类胡萝卜素一样，β-胡萝卜素是一种抗氧化物。食用富含β-胡萝卜素中的食物可以防止身体接触一种称为自由基的破坏分子。通过一个氧化的过程，自由基会对细胞造成伤害。长此以往，将有可能导致人体患上各种各样的慢性疾病。一些研究表明从日常饮食中摄入足量的β-胡萝卜素可能减少患上两种慢性疾病的危险——心脏病和癌症。有研究表明高剂量的β-胡萝卜素会减少人们对太阳的敏感度，尤其对那些由于被太阳暴晒而引起皮肤病的人特别有帮助。他们可以在保健专业人士适当的指导下，有针对性地补充β-胡萝卜素。缺乏β-胡萝卜素眼睛易疲倦，疼痛，视力下降，影响男性精子的生成，并使女性雌激素分泌的周期性变化消失，导致不能受孕,上皮细胞的正常分化受阻，这是引起癌变的基本原因、导致人体对某些化学性致癌物质的敏感性增加。因此，适时、适当补充β—胡萝卜素是增强免疫力的有效途径，现在市场上含β-胡萝卜素保健品特别多，至2003年12月底，我国批准的以“β-胡萝卜素”化合物为功效成分的保健食品有63种，占保健食品总数的1.33%，这类保健产品具有以下特点：主要以免疫调节、血脂调节和抗疲劳等功效为主；产品形态以胶囊和片剂为最多，也包括口服液和营养液。以“β-胡萝卜素”化合物为功效成分开发保健品具有潜在的优势，β-胡萝卜素被许多保健品作为营养强化剂。目前分析保健品中β-胡萝卜素的方法有柱色谱法、纸色谱法、分光光度法、高效液相色谱法，前3种方法过程复杂，精密度差。高效液相色谱法简便、快速、准确、成本低，是目前检测β-胡萝卜素最理想的方法。一实验部分（一）仪器与试剂1.仪器Agilent1200高效液相色谱仪Agilent1200紫外检测器Agilent液相化学工作站BS224S精密电子天平2．检验试剂β-胡萝卜素标准品(中检所)含β-胡萝卜素保健品(市面出售)甲醇(色谱纯)石油醚(分析纯)丙酮(分析纯)（二）测定方法1.色谱条件色谱柱：Agilent-Cl8(4.6mm×300mm，5流动相：甲醇：氯仿=85：15(v/v)，流速：1.0mL／min，柱温：30℃，检测波长：448nm，进样量：10uL2．标准品储备液的配制精密称取标准品20.0mg于烧杯中，加三氯甲烷溶解，再转移至100mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至刻线，摇匀，即成标准储备液(200.0ug／mL)。3.样品溶液的制备称取适量试样于100mL分液漏斗中(如果试样中β-胡萝卜素量较少，取样量可以多些)，加入石油醚5mL,丙酮20mL混合液振摇提取，振摇10min，静置5min，将提取液转入盛有100mL5％硫酸钠液的250mL分液漏斗中，多次反复提取，将提取液并入250mL分液漏斗中,直至提取液无色为止。将上述提取液经5％硫酸钠溶液洗涤后，进行浓缩，并用氮气吹干，加入10mL甲醇溶解转移至100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻线。用0.45um微孔滤膜过滤，滤液作HPLC分析用。4．标准曲线精密吸取标准品储备液(0.50、1.00、1.50、2.00、2.50)mL，分别加于10mL容量瓶中，加三氯甲烷释稀至刻线，即成浓度为(10、20、30、40、50)ug／mL标准品溶液。按上述色谱条件进样1OuL，以峰面积Y为纵坐标，标准品β-胡萝卜素的浓度x为横坐标绘制标准曲线。5.样品测定按上述色谱条件，注入样品溶液1OuL，测得峰面积，按标准曲线计算即得。（三）讨论1.样品的取样量由于市场上保健品中β-胡萝卜素含量相差较大，统一取样量在实际操作中并不理想，本实验根据样品中β-胡萝卜素含量多少，β-胡萝卜素的线性范围决定取样量，测定得的结果很满意。2．提取溶剂的选择在样品提取过程中，用石油醚+丙酮、石油醚、丙酮、三氯甲烷分别进行振摇提取，再用不同配比石油醚+丙酮进行提取，经过比较以石油醚+丙酮(20+80)为溶剂进行提取，提取较为完全，且样品中有机杂质相对较少。3．流动相的选择本试验用甲醇和乙腈、丙酮和水、甲醇：氯仿、乙腈：甲醇：二氯甲烷四种流动相反复进行试验，同时改变流动相的配比和流速，从分离效果进行比较，最终选定甲醇：氯仿=85：15(v/v)；流速1.0mL／min，为本次试验的条件。二结果与分析1.标准曲线以标准品β-胡萝卜素的浓度x为横坐标，以峰面积Y为纵坐标绘制标准曲线，结果表明β-胡萝卜素在10～50ug／mL时，其峰面积与浓度有良好的线性关系(R2=0.9994)，回归方程为Y=5.O059X+0.0038。见图12.精密度试验精密吸取低、中、高三种浓度的标准品溶液1OuL，重复进样6次，本法的精密度符合分析要求。结果见表3-1。表3-1精密度试验结果(ug／mL)标准液测定值XSRSD(%)1010.029.999.9810.019.9810.0510.010.030.273030.0630.0329.9630.0729.9230.0230.010.060.205050.0249.9850.0350.0149.8849.9949.990.050.113.回收率试验本文对测定值为4.26mg的样品分别加入低、中、高含量的标准进行加标回收实验，回收率见表3-2。表3-2回收率试验结果本底值(mg)加标量(mg)测定值(mg)回收率(%)4.263.007.187.237.207.217.247.2199.314.264.008.128.138.118.138.108.0998.224.265.009.399.369.359.389.409.37101.244.对不同品牌的β-胡萝卜素胶囊测定测定结果见表3-3。表3-3β-胡萝卜素胶囊中β-胡萝卜素的含量样品名称取样量(g)测定值(mg)平均值RSD(%)含量(%)海王β-胡萝卜素软胶囊梅蒂亚β-胡萝卜素软胶囊0.25730.12062.524.262.494.292.534.232.514.260.830.700.983.53纽斯葆β-胡萝卜素软胶囊0.52951.242.600.23灵汇健β-胡萝卜素软胶囊0.26392.352.372.302.341.540.89倍健-β胡萝卜素胶囊0.49864.