第十五章分支杆菌

第十五章分支杆菌第一页，共三十四页，2022年，8月28日分枝杆菌属—含分支菌酸结核分枝杆菌牛分枝杆菌副结核分枝杆菌棒状杆菌属—含分支菌酸奴卡菌属—含分支菌酸红球菌属—含分支菌酸放线菌属—不含分支菌酸牛放线菌主要包括G+第二页，共三十四页，2022年，8月28日分枝杆菌属(Mycobacterium)分枝杆菌

结核分支杆菌牛分支杆菌禽分支杆菌副结核分枝杆菌第三页，共三十四页，2022年，8月28日

第四页，共三十四页，2022年，8月28日世界上第一次发明了细菌照相法；世界上第一次发现了炭疽热的病原细菌——炭疽杆菌；世界上第一次证明了一种特定的微生物引起一种特定疾病的原因；世界上第一次分离出伤寒杆菌；世界上第一次发明了蒸汽杀菌法；世界上第一次分离出结核病细菌；世界上第一次发明了预防炭疽病的接种方法；世界上第一次发现了霍乱弧菌；世界上第一次提出了霍乱预防法；世界上第一次发现了鼠蚤传播鼠疫的秘密；世界上第一次发现了睡眠症是由采采蝇传播的；制定科赫法则；创立了固体培养基划线分离纯种法。

诺贝尔生理学及医学奖第五页，共三十四页，2022年，8月28日一类细长弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而命名主要特点细长弯曲，分枝状生长细胞壁含有大量脂质（分枝菌酸）常用抗酸染色鉴定，呈抗酸染色阳性引起疾病都呈慢性，并伴肉芽肿第六页，共三十四页，2022年，8月28日抗酸染色－齐尼二氏（Ziehl-Neelson)由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fastbacilli)5%石炭酸复红初染加热3%盐酸酒精脱色1min镜检碱性美兰复染5min1min第七页，共三十四页，2022年，8月28日M.tuberculosis第八页，共三十四页，2022年，8月28日M.aviumsubsp.paratuberculosis(Z-N)第九页，共三十四页，2022年，8月28日结核分支杆菌俗称结核杆菌，引起人类结核病致病菌主要为结核分支杆菌（M.tuberculosis)、牛分支杆菌（M.bovis)世界上1/3人感染，70%在亚洲世界防治结核病日：3月24日第十页，共三十四页，2022年，8月28日结核分支杆菌第十一页，共三十四页，2022年，8月28日形态与染色特性细长略带弯曲，分枝状，无荚膜、鞭毛或芽孢，抗酸染色阳性牛分支杆菌菌体较短而粗；禽分支杆菌呈多形性。第十二页，共三十四页，2022年，8月28日培养特性特点专性需氧生长缓慢（10-30d）营养要求高，常用罗杰二氏培养基生长液体：表面生长（菌膜）固体：表面粗糙、隆起、不透明、边缘不整齐、呈颗粒、结节、花菜状菌落，乳白或米黄馋懒癞第十三页，共三十四页，2022年，8月28日生化反应不发酵糖类触酶试验阳性，而热触酶试验阴性（细菌悬液68度加热20min，加入过氧化氢不产生气泡）

四不怕干燥（存活6-8个月）酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力碱性染料（结晶紫或孔雀绿）青霉素等抗生素

四怕乙醇湿热（62-63度，15min）紫外线抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）抵抗力第十四页，共三十四页，2022年，8月28日形态结构变异结核杆菌的L型：异烟肼诱导，胞壁消失，呈多形性，颗粒状、丝状毒力变异卡介苗BCG：Calmette和Guerin将牛分支杆菌经13年230次传代而获得的减毒活疫苗株耐药性变异耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多变异性第十五页，共三十四页，2022年，8月28日致病性致病物质，没有内毒素和外毒素脂质索状因子（破坏细胞呼吸，引起肉芽肿）磷脂（形成结核结节）硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）蜡质D（引起迟发性过敏反应）蛋白质结核分枝杆菌菌体内含有多种蛋白质，其中重要的是结核菌素（tuberculin）。结核菌素与蜡质D结合，能引起较强的迟发型超敏反应。第十六页，共三十四页，2022年，8月28日致病机理以细胞内寄生和形成局部病灶为特点。细菌主要通过呼吸道侵入机体肺泡，被肺泡巨噬细胞吞噬，但不被消化降解，相反在其内繁殖，形成病灶，产生干酪样坏死。坏死灶被吞噬细胞、免疫细胞等包围，形成结核结节，此时细菌停止增殖，病理损伤局限化，病灶钙化而痊愈；但是免疫低下者，细菌继续增殖，病灶可能破溃，菌体随痰咳出体外传染或散布全身。第十七页，共三十四页，2022年，8月28日所致疾病结核杆菌 主要引起人的结核病，灵长类动物、犬及其他与人接触的动物均可感染。牛分支杆菌 主要引起牛结核病，其他家畜、野生反刍动物、人、灵长目动物、犬、猫等肉食动物均可感染。禽分支杆菌 主要引起禽结核，包括家禽与野禽，也可引起猪的局限性病灶。第十八页，共三十四页，2022年，8月28日Acinous,acino-nodosustuberculosis(cattlelung)第十九页，共三十四页，2022年，8月28日Tuberculosis(wildboar)第二十页，共三十四页，2022年，8月28日7.免疫性与变态反应带菌免疫，也叫传染性免疫；细胞免疫与体液免疫存在分离现象，细胞免疫随着病情的加重而减弱，体液免疫随着病情的加重而增强；大量结核杆菌繁殖产生的特异性蛋白和脂质，诱导机体产生迟发性变态反应，加强了对机体的进一步损伤；细胞免疫和迟发性变态反应共存。第二十一页，共三十四页，2022年，8月28日诊断技术试纸条γ-干扰素检测ELISAPPD皮试免疫学诊断分子生物学体液免疫细菌学诊断细胞免疫8.微生物学诊断第二十二页，共三十四页，2022年，8月28日第二十三页，共三十四页，2022年，8月28日细菌学诊断显微镜检查

取结核结节或病变与非病变交界处组织直接涂片，抗酸染色后镜检，如发现红色成丛杆菌时，可做出初步诊断。分离培养

常用罗杰二氏培养基，37℃培养8周，培养阳性时，进行培养特性和生化特性鉴定。动物接种

病料接种动物：禽分支杆菌→鸡；结核杆菌→豚鼠；牛分支杆菌→兔，接种后3周至3个月死亡。第二十四页，共三十四页，2022年，8月28日免疫学检测细胞免疫水平结核菌素皮试：纯蛋白衍生物(PPD)γ干扰素释放试验(IGRA)体液免疫酶联免疫吸附试验(ELISA)：PPD、ESAT-6、CFP-10、Ag85、MPB83、MPB70方便,快速,适合大批量检测（IDEXX公司）试纸条第二十五页，共三十四页，2022年，8月28日变态反应

剃毛测量皮皱厚,记录,标记皮内注射结核菌素测量皮皱厚,记录,标记皮厚差大于或等于4.0mm为阳性第二十六页，共三十四页，2022年，8月28日采用结核菌素（PPD）皮内注射法，牛颈部皮内注射72h后皮肿胀厚度差≥4mm为阳性；皮肿胀厚度差在2-4mm为疑似；30d后需复检一次，如仍为疑似，经30-45d再次复检，如仍为疑似可判为阳性;皮肤肿胀厚度差≤2mm为阴性。第二十七页，共三十四页，2022年，8月28日γ干扰素释放试验流程第二十八页，共三十四页，2022年，8月28日分子生物学聚合酶链反应：普通PCR、巢式PCR、实时荧光定量PCR等能快速扩增结核分枝杆菌DNA检测假阳性和假阴性问题是影响其应用的关键问题环等温PCR扩增(LAMP)操作十分简单，对仪器设备要求低肉眼观察白色浑浊或绿色荧光的生成来判断16s～23srDNA(rRNA)序列法用于分枝杆菌的菌种鉴定基因芯片基因芯片耐多药检测试剂已获得欧盟体外诊断试剂证书（CE-IVD）操作较复杂，不适于基层检测第二十九页，共三十四页，2022年，8月28日9.免疫与治疗结核病：全球三大疫病“艾滋病、肺结核、疟疾”之一人类广泛采用卡介苗免疫接种，免疫期达4-5年。接种卡介苗的牛一年后仍维持变态反应阳性，在用结核菌素检疫时无法与自然感染牛区别。饲养牛群不接种卡介苗，每年春、秋需进行检疫，对检出的患结核病动物要扑杀处理。该病为人畜共患病，凡对人结核病有效的药物，对动物也有效。但除珍稀或观赏动物外，不提倡用药物治疗。第三十页，共三十四页，2022年，8月28日可引发反刍兽慢性消耗性传染病，牛的主要临床症状为持续性腹泻和进行性消瘦。与禽分支杆菌有较多的相似性，变态反应也与禽分支杆菌有明显交叉反应，现归属于禽分枝杆菌副结核亚种。副结核分支杆菌M.paratuberculosis第三十一页，共三十四页，2022年，8月28日第三十二页，共三十四页，2022年，8月28日主要特性短杆菌，无