药物对离体平滑肌影响上课用

【实验目的】掌握药物和化学物质对离体肠肌收缩活动的影响及机制。熟悉家兔离体平滑肌的制备方法了解哺乳动物胃肠平滑肌的一般特性第1页/共21页第一页，共22页。

哺乳动物小肠平滑肌离体后，置于适宜的环境内，仍能进行节律性活动，并随环境的变化表现出不同的反应。通过实验加深对平滑肌某些基本特性了解和药物对小肠平滑肌的影响。实验原理第2页/共21页第二页，共22页。消化道平滑肌的特性一般特性电生理特性

第3页/共21页第三页，共22页。1．自动节律性2．伸展性大3．兴奋性较低4．具紧张性收缩5．对电刺激不敏感，对温度等刺激敏感一般特性第4页/共21页第四页，共22页。

特点

不稳定，-40～-80mV

形成机制

K+外流、钠钾泵的作用

电生理特性

静息电位（Rp）第5页/共21页第五页，共22页。

慢波电位（BER）肌源性活动，钠钾泵活动周期纵行肌与环行肌之间的间质细胞机制起源作用在此基础上激发动作电位,并决定收缩的频率第6页/共21页第六页，共22页。动作电位Rp—BER—

阈电位—Ap---肌肉收缩特点缓慢，持续时间长10~20ms形成去极相:Ca2+内流（少Na+）复极相:K+外流

第7页/共21页第七页，共22页。

消化道平滑肌上分布有有M、、β受体等。因此，在离体培养液中加入受体激动剂（毛果芸香碱—M受体激动药；乙酰胆碱—N,M受体激动药;肾上腺素—α,β受体激动药）或阻断剂（阿托品—M受体阻断药)时，可引起肠肌收缩或松弛。第8页/共21页第八页，共22页。[实验动物]

兔

[实验器材]

BL—410生物机能实验系统；恒温平滑肌槽；张力换能器、万能支架、温度计、烧杯、滴管、培养皿、注射器、手术剪、眼科镊实验材料第9页/共21页第九页，共22页。

[药品与试剂]

台氏液、0.001％乙酰胆碱溶液、毛果芸香碱、0.1%硫酸阿托品溶液、1M氢氧化钠溶液溶液、1M盐酸溶液溶液。第10页/共21页第十页，共22页。

空气注射法处死家兔，之后立即剖开腹部，在十二指肠起始端游离一段小肠，依次用细线扎成2-3cm长的小肠段，保存于37℃台氏液中。1、制备离体小肠平滑肌标本（离体肠肌结扎方法示意图）第11页/共21页第十一页，共22页。实验仪器预热药筒实验药筒支架杆HW-400TH恒温平滑肌槽第12页/共21页第十二页，共22页。

小肠平滑肌标本一端用短线固定在实验药筒的钩上，使小肠平滑肌被浸没在台氏液中，另一端扎线与张力传感器的应变梁相连，并将张力换能器固定在支架杆上。调节气量调节旋钮，使气泡逐个地溢出实验药筒，以供给标本足够的氧气。2、连接实验装置第13页/共21页第十三页，共22页。（离体小肠平滑肌的实验装置示意图）第14页/共21页第十四页，共22页。3、软件操作打开BL-410/420系统→选择“实验项目”→“输入信号”→“1通道”或其他通道→“张力”。单击工具条上的“开始”命令按扭，进行记录。第15页/共21页第十五页，共22页。1、肠段正常活动曲线。2、加入1:10000(g/ml)乙酰胆碱溶液2～3滴。3、加入1%硫酸阿托品溶液2～3滴。4、加入1:10000(g/ml)肾上腺素2～3滴。5、加入1mol/L盐酸溶液2～3滴。

6、加入1mol/L氢氧化钠溶液2～3滴。4、观察项目（6项）观察到明显效果后，立即更换实验药筒内液体，肠肌活动恢复稳定后再行下一项，！！！第16页/共21页第十六页，共22页。5、结果记录

正常曲线乙酰胆碱阿托品记录并标记各药物作用前后离体肠肌活动曲线（结果可打印或手画）。肾上腺素盐酸氢氧化钠实验项目：在实验报告中标明第17页/共21页第十七页，共22页。注意事项1、在加药之前应先准备好37℃台氏液，以备实验中更换用液。2、操作过程中不要牵拉肠肌；与张力换能器相连的线必须垂直，不要与管壁接触。3、如果加入上述各药液后效果不明显，可以补加少许药液，但不可一次加药过多。4、观察到明显效果后，立即更换实验药筒内台氏液，使肠肌活动恢复稳定后再进行下一项。5、浴槽内温度应保持在37℃，不能过高或过低。第18页/共21页第十八页，共22页。1.实验观察项目中各药液对胃肠平滑肌活动有何影响？试从受体角度分析各药对小肠平滑肌的作用2.通过该实验,小结保持哺乳动物离体平滑肌正常收缩活动所具备的条件实验讨论第19页/共21页第十九页，共22页。在进行离体组织或器官实验时，为了维持标本的“正常”功能活动，必须尽可能地使标本所处的环境因素与体内相近似。这些因素包括电解质成分、渗透压、酸碱度、温度，葡萄糖和O2含量等。第20页/共21页第二十页，共22页。感谢您的观看！第21页/共21页第二十一页，共22页。内容总结【实验目的】。第2页/共21页。第3页/共21页。肌源性活动，钠钾泵活动周期。纵行肌与环行肌之间的间质细胞。因此，在离体培养液中加入受体激动剂（毛果芸香碱—M受体激动药。肾上腺素—α,