临床微生物标本采集课件

临床微生物标本采集、

转运与处理

——微生物标本规范化采集的重要性

正确采集、处理与运送细菌培养的标本直接关系到致病菌培养的正确性与阳性率的高低，是临床细菌检验成功的关键。标本质量的好坏直接影响诊断结果的正误，不当的标本可导致假阴性、假阳性结果的出现，因此标本采集与处理的规范化是准确、及时地向临床提供重要的临床感染信息的基础。好的微生物检验标本可提升实验室工作效率及病患照顾质量，降低医疗成本。

临床标本的分类

带菌体液无菌体液痰液血液咽拭子脑脊液尿液关节腔积液粪便胸腹水、胆汁其他类别其他类别发热（≥38℃）或（低温≤36℃）寒战白细胞增多（特别有“核左移”未成熟的或杆状核白细胞）皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低、CRP升高及呼吸快特殊患者（如血液病）出现粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1000×109/L）、血小板减少等，或同时具备上述几种体征的临床可疑菌血症应采集血培养新生儿菌血症，进行血培养同时应增加尿液和脑脊液培养对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养

采血量：血液中细菌和真菌的检出率依赖于足够的血量，但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养基内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。血量与培养液的比例以

1：10为宜，但对已接受抗菌药物长达10天以上的患者，采血量与培养基的比例应为1：20或大于1：20为宜。成人10~15ml儿童3~5ml婴幼儿1~2ml骨髓1~2ml采集要点：

1.每一对血培养应当从身体的不同部位采集2.用来培养的血应当是静脉血而不是动脉血3.尽量避免从静脉导管中抽血4.皮肤和瓶子的消毒非常关键采集时机：

应在病人发病初期或发热高峰到来之前采集。一般情况下应尽量选择在使用抗菌药之前进行，在24h内采集2-3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养）。如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养。采血套数

检测灵敏度上呼吸道标本采集的临床指征

上呼吸道标本怀疑上呼吸道感染时如发热、咽部疼痛等，尤其是怀疑化脓性链球菌感染或念珠菌感染时进行咽拭子培养。标本采集

口腔标本鼻标本咽喉标本鼻咽标本采集指南1.用棉签清除口腔病灶表面的分泌物、碎屑，扔掉2.用第二根拭子采取病灶的标本，避免碰到其它组织1.用经盐水湿润的拭子插入鼻孔约2cm2.将拭子贴着鼻黏膜转动1.用一压舌板压住舌2.用无菌拭子在后咽部、扁桃体及发炎部位采集标本1.将一藻酸钙拭子经鼻腔轻轻插入鼻咽喉部2.缓慢转动拭子5秒钟吸收分泌物3.取出拭子并床边接种或将拭子放入运送培养基下呼吸道（痰培养）标本

采集的临床指征

咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常见的症状。咯血包括泡沫血痰、鲜血和痰中带血等呼吸困难，呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛发热伴WBC增高尤其是中性粒细胞或CRP明显增高胸部影像学检查提示感染可能标本采集

痰（咳出的）痰（诱导的）支气管标本采集指南1.在护士指导下取标本2.先用清水清洗或漱口3.深咳痰以获得深部痰，放入无菌痰杯中4.不能取鼻后液1.先刷洗牙龈和舌2.再用清水漱口3.用雾化器使患者吸入约25ml3-10％的无菌盐水4.采集诱导的痰液放入无菌痰杯1.由临床医生操作采集2.抽吸物或洗出物放入痰采集容器中3.将刷取物放入装有盐水的无菌容器中标本质量

合格标本的判断标准外观：观察颜色、粘度、有无血丝或脓。若标本为水状且很明显是唾液，则应拒收。为了判定是否来自下呼吸道的痰，需检查是否为合格的痰标本：WBC>25个/低倍视野，鳞状上皮细胞<10个/低倍视野为合格标本。采集合格标本对细菌的诊断极为重要。痰培养标本的运送标本采集后正确盖好，防止泄露或容器外部留有残留物采集后的标本应立即送往实验室（室温≤2ｈ）申请抗酸杆菌检查或真菌培养的痰液如不能及时送检，应放入4℃冰箱，以免杂菌生长，但存放时间应不超过24ｈ怀疑嗜血杆菌或肺炎链球菌感染时，标本应立即送检，切忌冷藏中段尿培养

留取中段尿

简单易行，又无感染的危险。通常取晨起第一次尿送检。尿液在膀胱内停留6-8h以上（给细菌足够的繁殖时间）尿标本必须用无菌带螺帽的容器采集，否则为拒收标本。

脑脊液培养

采集的临床指征

在生理情况下，血液和脑脊液之间有血脑屏障，阻碍各种微生物通过血液进入中枢神经系统。因此正常人的脑脊液是绝对无菌的。当怀疑结核性、化脓性、流行性、霉菌性脑膜炎时进行脑脊液培养。严格无菌操作

标本采集

以70%酒精或2%碘酊消毒背部下方，并麻醉之，然后以一特制通管针，轻轻的由第三与第四腰椎间的中线部位穿刺入脊髓蛛网膜，采集约3-5ml脑脊液于3支无菌试管中，每支试管至少1-2ml，然后马上将第2根（或第1根）送至实验室。做脑脊液培养时，建议同时做血培养。腰穿时必须作彻底消毒和无菌操作。脑脊液标本的运送

采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内，半小时送检是可接受的，如果送检时间超过1小时，则会影响结果。注：某些细菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡，因此，标本应立即送检，并且保温（禁止放冰箱，因脑膜炎双球菌遇冷死亡）穿刺液培养穿刺液主要包括：胆汁胸水腹水心包液关节液脑脊液在正常人体中，上述体液均是无菌的。有感染的情况下检出的细菌，在排除污染后应视为病原菌，及时给予正确的治疗。

采集的临床指征

临床上出现胸腔积液（胸水）、腹腔积液（腹水）、关节液、心包腔积液、鞘膜腔积液等情况时，多因浆膜腔发生循环障碍、炎症、癌浸润等病变，腔内液体渗漏增加所致。标本采集

一般由临床医师在无菌操作下穿刺抽取或外科手术采集标本。取５～１０ｍｌ于无菌肝素抗凝管中（０.５ｍｇ肝素可抗凝５ｍｌ标本），充分混匀后立即送检，不能有凝块。大便培养采集指征腹泻病人应尽量在急性期（３天内）、在用抗生素前留取标本以提高病原菌的检出率，陈旧标本影响检出阳性率。连续出现脓血、黏液、糊状、米泔样等形状异常的粪便。疑似细菌性食物中毒患者，大便培养可作为一个辅助检查手段。怀疑感染伤寒沙门菌、细菌性痢疾的患者。胃肠道感染怀疑霍乱等弧菌感染者。标本采集

无需特别准备，但最好不要住院超过３ｄ，在使用抗生素前采集最佳。自然排便后，可挑取新鲜粪便中有脓血、黏液部分的粪便约２～３ｇ，液体粪便取絮状物２～３ｍｌ，糊状、米泔样等性状异常的粪便盛于无菌的容器中或置于保存液中送检。大便标本的运送

标本采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。粪便标本：室温1小时内送至。直肠拭子（proctoswab）：室温1小时内送至。高度怀疑霍乱弧菌感染的标本室温1小时内送至，运送必须符合特殊标本的安全要求。碱性蛋白胨水：霍乱