MDQ型毛细管电泳在相关领域的应用课件

P/ACEMDQ型毛细管电泳

在相关领域的应用

一、简介毛细管电泳(capillaryelectrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳(HPCE)。是以毛细管为分离通道，以高压电场为驱动力的新型液相分离分析技术，在八十年代得以迅速发展。目前，在生命科学、药物分析、以及从小分子、离子到单细胞分析的一系列领域得到了广泛的应用。毛细管电泳的发展过程六十年代中期：瑞典科学家Hjerten首先提出了毛细管区带电泳（CZE）的方法，被看作毛细管电泳的起点。1979年：Mikkers等用200μmID的聚四氟乙烯管为分离通道，获得了很高的分离效率。1981年：Jorgenson和Lukacs用75μmID的熔融毛细管做CZE，在30KV电压下产生了4×105片/m的效率，成为毛细管电泳发展史上的里程碑。1984年：Terabe运用含SDS胶束的缓冲液分离了中性分子，从而建立了胶束电动毛细管电泳。1987年，Hjerten建立了毛细管等电聚焦；Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳。1988~89年：商品化的毛细管电泳仪推出，毛细管电泳法迅速发展起来。

CE分离原理示意图

在电解质溶液中，带电粒子在电场作用下以不同的速度定向迁移的现象叫电泳。单位电场下的电泳速度称为淌度。CE所用的石英毛细管柱，在pH>3的情况下，其内表面带负电，和溶液接触时形成双电层。在高电压的作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体向负极方向迁移的现象叫电渗。电渗是毛细管中的溶剂因轴向直流电场的作用而发生的定向流动。各种粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流（EOF）两种速度的矢量和。正离子的运动方向和电渗流一致，故最先流出；中性粒子的电泳的电泳流速为零，故其迁移速度等于电渗流速度；负离子的运动方向和电渗流方向相反，但因电渗流速度一般都大于电泳速度，故它将在中性粒子之后流出。各种粒子因迁移速度不同而实现分离。三、毛细管电泳仪的构造

四：毛细管电泳的分离模式：

毛细管区带电泳(CZE);毛细管胶束电动色谱(MEKC);毛细管凝胶电泳(CGE);毛细管等电聚焦(CIEF);毛细管等速电泳(CITP)；

亲和毛细管电泳(ACE)；

毛细管电色谱(CEC)；非水相毛细管电泳（NACE）。五：分离模式的选择

CE可以分离离子到中性分子、从小分子到生物大分子的一系列物质。之所以能分离如此广泛的物质，在于其灵活多样的分离体系。对不同性质的物质，应选择相应的分离体系：分离对象与模式的选择MEKCCECCIEFMEKCCITPCGECGECGECGEMEKCCITPCZECZECZECZECZECZE病毒/细菌多肽/蛋白核酸糖类小分子离子毛细管电泳的高分离效率七、毛细管电泳的应用

蛋白质/多肽/氨基酸糖类/糖蛋白核酸/核苷酸天然产物合成药物手性物质无机/有机离子病毒/细菌水溶液中的分子间相互作用不同分子量蛋白的分离4种碱性蛋白的分离4种碱性蛋白的电泳分离图。A：涂层管；B：未涂层管。1：细胞色素，2：溶菌酶，3：胰蛋白酶原，4：α-胰凝乳蛋白酶原DNA、核酸的分离DNA片段电泳迁移时间图单糖的分离药材中的生物碱成分分析1苦参碱2槐定碱3槐果碱4lehmannine5sophoramine6氧化苦参碱7氧化槐果碱8金雀花碱9苦豆碱10蝙蝠葛碱11东莨菪碱药材中黄酮化合物的分析对照品样品OG：木蝴蝶素A－7－O-葡萄苷酸B：黄芩素WG：汉黄芩素－7－O-葡萄苷酸BG：黄芩苷W：汉黄