GMP质量体系土霉素片中间产品检验操作规程

目的：为检验土霉素片中间产品规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。范围：适用于土霉素片中间产品的检验。职责：检验员、检验室主任对本规程实施负责。规程：1性状：本品为淡黄色片。2鉴别2.1试剂与仪器2.1.1乙醇2.1.2烧杯2.1.3水浴锅2.1.4量杯2.1.5电子天平(万分之一克)2.1.6电炉2.1.7漏斗2.2项目与步骤2.2.1取本品细粉适量(约相当于土霉素25mg)，加乙醇25ml，浸渍20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣照土霉素的鉴别法(1)项试验，显相同的反应为符合规定。3检查3.1试剂与仪器3.1.1电子天平(万分之一克)3.1.2AB-2片剂脆碎度仪3.1.3BJ2A片剂崩解仪3.2项目与步骤3.2.1重量差异：照片剂重量差异检查法(SOP-QC-334-00)检查，±7.5%重量差异限度为符合规定。3.2.2崩解时限：取本品6片,按崩解时限检查法(SOP-QC-330-00)检查，各片应在15分钟内全部崩解，如有1片崩解不完全，应另取6片按同样方法复试，全部崩解完全均为符合规定。3.2.3脆碎度：取本品约25片，用吹风机吹去脱落的粉末，精密称重，按脆碎度检查法(SOP-QC-333-00)检查，减失重量不得过1%，且不得检出断裂、龟裂及粉碎的片。如减失重量超过1%时，可复检2次，3次的平均减失重量不得过1%，并不得检出断裂、龟裂及粉碎的片，为符合规定。4含量测定：取本品10片，精密称定，研细，精密称出适量（约相当于土霉素0.25g），置250ml量瓶中，加盐酸(0.1mol/L)50ml，振摇,使土霉素溶解后,再加灭菌水稀释至每1ml中约含1,000单位的悬浮液；摇匀，静置，精密量取悬浮液适量，照抗生素微生物检定法(SOP-QC-339-00)操作。4.1试剂与仪器4.1.1抗生素检定培养基Ⅱ(6.5～6.6)4.1.2磷酸盐缓冲液(PH6.0)4.1.3藤黄微球菌悬液4.1.4土霉素标准品4.1.5容量瓶(50ml,100ml)4.1.6灭菌刻度吸管,滴管4.1.7双碟4.1.8陶瓦盖4.1.9钢管放置器4.1.10电热隔水培养箱4.1.11称量瓶4.1.12CHB-1抗生素效价测量仪4.1.13电子天平(万分这一克)4.1.14超净工作台4.1.15酒精灯4.1.16三角烧瓶(50ml,150ml)4.1.17量筒(100ml)4.1.18镊子,接种棒4.2检验步骤4.2.1培养基的制备：称取抗生素检定培养基Ⅱ(PH6.5～6.6)28.5g，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃高压灭菌30分钟，备用。4.2.2磷酸盐缓冲液(PH6.0)制备：称取磷酸氢二钾2g与磷酸二氢钾8g，加水使成1000ml，滤过，经121℃蒸气灭菌30分钟，备用。4.2.3藤黄微球菌悬液的制备：取藤黄微球菌(28001)的营养琼脂斜面培养物，接种于盛有营养琼脂培养基的培养瓶中，在26～27℃培养24小时，临用时用培养基Ⅲ将菌苔洗下，合并菌液至灭菌大试管中，备用。4.2.4标准品溶液的制备：4.2.4.1将标准品从冰箱取出，使与室温平衡，准确称取土霉素对照品58mg置50ml容量瓶中,加(0.1mol/L)盐酸溶液5ml溶解，加灭菌水至刻度，精密吸取10ml置25ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液(PH7.8)稀释至刻度，备用。4.2.4.2高剂量标准品的制备：精密吸取4.2.4.1制备的标准溶液2ml，置50ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液(PH6.0)稀释至刻度，备用。4.2.4.3低剂量标准品的制备：精密吸取4.2.4.1制备的标准溶液2ml，置100ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液(PH6.0)稀释至刻度，备用。4.2.5样品溶液的制备：4.2.5.1取本品20片，研细，精密称取重约0.66g置250ml容量瓶中，加(0.1mol/L)盐酸液100ml，振摇，使土霉素溶解后，再加灭菌水稀释至刻度，摇匀，静置，精密量取上清液10ml置25ml容瓶中，用磷酸盐缓冲液(PH6.0)稀释至刻度，备用。4.2.5.2高剂量样品溶液的制备：，精密吸取4.2.5.1制备的样品溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液(PH6.0)稀释至刻度，备用。4.2.5.3低剂量样品的溶液的制备：精密吸取4.2.5.1制备的样品溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲液(PH6.0)稀释至刻度，备用。4.2.6双碟的制备：按抗生素微生物检定法(SOP-QC-339-00)操作。4.2.7小钢管的放置：按抗生素微生物检法(SOP-QC-339-00)操作。4.2.8滴管、培养与测量：按抗生素微生物检法(SOP-QC-339-00)操作。5记录与计算：用电脑测试，计算、统计分析的打印纸贴附于记录后。本品含土霉素(C22H24H2O9)为标示量的90.0%～110.0%为符合规定。按下列计算土霉素的最终效价：PT=P×PT：为样品的真实效价P：为样品(相当于标示量或估计效价)的百分数对照品