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文档简介
微生物遗传学第三章节第一页,共二十八页,2022年,8月28日一、λ噬菌体的生活周期λ感染寄主后,其DNA整合进寄主染色体,整合形式的λ称为
原噬菌体。整合原噬菌体的细菌称为溶源细菌,这一过程称为溶源途径。溶源细菌一般不被同种噬菌体感染,这种现象称为免疫性。溶菌途径也称为噬菌体的营养生长。诱导第二页,共二十八页,2022年,8月28日第三页,共二十八页,2022年,8月28日溶源细菌特点能自发释放和诱导释放噬菌体对同一种噬菌体具有免疫性溶源细菌表示:菌株后加括号,括号内
为噬菌体。如:E.coliK12(λ)
E.coliK12(P1)第四页,共二十八页,2022年,8月28日二、λ噬菌体的溶源化及诱导释放机制λ噬菌体的整合及溶源化λ噬菌体的诱导和切离第五页,共二十八页,2022年,8月28日第六页,共二十八页,2022年,8月28日第七页,共二十八页,2022年,8月28日第八页,共二十八页,2022年,8月28日第九页,共二十八页,2022年,8月28日第三节、反转录病毒(Retroviruses)第十页,共二十八页,2022年,8月28日一、结构和生活周期二、反转录病毒基因组三、反转录过程中DNA双链的合成和LTR的产生四、病毒线性DNA整合到寄主细胞基因组五、原病毒的基因表达1病毒基因的转录2转录后加工3病毒mRNA的翻译六、反转录病毒基因组及其复制特点第十一页,共二十八页,2022年,8月28日反转录病毒的重要性是最早被发现与癌症有关的病毒,还引起白血病、淋巴瘤及其肉瘤。致癌机制已被广泛研究。
如:HIV引起人类的获得性免疫缺陷综合症(艾滋病)。RSV引起禽类的肉瘤。MLV引起小鼠白血病。反转录病毒基因组可以通过DNA中间体整合进宿主基因组,可利用这种整合作用进行“基因治疗”。反转录酶已经成为基因工程的重要工具。第十二页,共二十八页,2022年,8月28日重要的反转录病毒有:
HIV:人类艾滋病病毒
RSV:禽类劳斯肉瘤病毒
MLV:小鼠白血病病毒第十三页,共二十八页,2022年,8月28日一、结构和生活周期:结构脂质包膜,外膜蛋白,跨膜蛋白,核衣壳,2条正链RNA,核蛋白,反转录酶,整合酶,蛋白酶等等。第十四页,共二十八页,2022年,8月28日生活周期:病毒感染寄主核衣壳进入细胞质核衣壳裂解释放RNA和反转录酶合成dsNDA
整合成为原病毒转录mRNA和基因组RNA翻译病毒蛋白包装病毒颗粒以出芽方式分泌获得包膜病毒粒子第十五页,共二十八页,2022年,8月28日第十六页,共二十八页,2022年,8月28日二、反转录病毒基因组1基因组为ssRNA,但病毒颗粒中有2条各自独立的ssRNA,5’端有典型的真核生物mRNA的帽子结构,3’端有多聚腺苷(polyA)。2所有的反转录病毒都含有的基因区域是:gag,pol,env,
致癌病毒含有scr,
参与细胞转化和癌变。3重复序列在反转录过程中起重要作用。第十七页,共二十八页,2022年,8月28日4引物为tRNA,各种病毒不同,都是从寄主细胞带入病毒粒子。5长末端重复序列(LTR)在反转录过程中形成,在整合和转录过程中起重要作用。6反转录酶主要是RNA聚合酶,但实际有3种酶活性:反转录,由RNA合成DNADNA聚合酶,由DNA合成DNARNaseH活性,降解RNA第十八页,共二十八页,2022年,8月28日第十九页,共二十八页,2022年,8月28日三、反转录过程中DNA双链的合成和LTR的产生反转录病毒RNA基因组U5的内侧有一个位点称为PBS,是tRNA引物结合位点。RNA基因组就是以与tRNA互补配对的形式包裹在病毒颗粒内的。病毒粒子进入细胞质以后,RNA基因组被释放出来,同时释放的还有反转录酶。第二十页,共二十八页,2022年,8月28日第二十一页,共二十八页,2022年,8月28日四、病毒线性DNA整合到寄主细胞基因组反转录病毒的线形双链DNA分子合成以后,进入细胞核。有的DNA分子呈线型,有的呈环状。近些年研究证明,反转录病毒是以线形DNA分子整合的。体外实验证明,整合过程可以被单一的病毒整合酶所催化,转录病毒DNA的末端序列非常重要,如该序列有突变,则不能整合。第二十二页,共二十八页,2022年,8月28日第二十三页,共二十八页,2022年,8月28日第二十四页,共二十八页,2022年,8月28日五、原病毒的基因表达
1病毒基因的转录只有整合进宿主基因组中的病毒DNA(原病毒)才可以持续的表达。LTR不但提供了整合所需的末端序列,而且也提供了转录及转录后加工的信号。图3-30由原病毒DNA转录的RNA既可以作为mRNA进一步合成病毒的蛋白质,也可以作为子代病毒的RNA基因组。第二十五页,共二十八页,2022年,8月28日第二十六页,共二十八页,2022年,8月28日2转录后加工反转录病毒RNA基因组以及大多数病毒mRNA并非一次合成的,而是经由1个初级转录本加工而成。所有的反转录病毒RNA基因组和mRNA都具有相同的5’端。在5’端形成cap结构:m7GpppGmp。初级转录本在3’端的R序列中含有加尾信号:AAUAAA,在3’端生成poly(A)尾巴。加工后的RNA转移到
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