黄草乌化学成分与环境相关性研究课件

黄草乌化学成分与环境相关性研究答辩人：汪丽娅导师：王永炎教授二零零五年五月硕士论文答辩CORRELATIONANALYSISFORCHEMICALCOMPONENTSOFACONITUMVILMORINIANUMKOM.WITHENVIRONMENTALFACTORS报告提纲一、选题背景与研究目标二、黄草乌原药材与土壤无机元素相关性分析三、黄草乌生物碱指纹图谱研究四、黄草乌化学成分与气候、土壤生态因子的关系研究五、讨论硕士论文答辩选题背景与研究目标生态环境日益恶化和药用资源的过度开发，许多野生中药材资源已经不能满足需求。人工种植中药材由于来源复杂、生长环境差异大，采收加工不规范等原因导致药材质量极不稳定。为此，国家从2002年开始进行中药材生产的规范化管理（简称GAP）。选题背景硕士论文答辩黄草乌是云南民间常用药材，同时也是一些中成药的主要原料。对黄草乌野外生态资源与生态环境方面的调查发现：目前黄草乌野生资源退化严重，品种混乱，黄草乌GAP种植缺乏基础背景资料和理论指导，人工种植的黄草乌质量不稳定。选题背景选题背景与研究目标研究目标分析黄草乌化学成分累积的特点研究黄草乌化学成分累积与环境因子间的相关关系探讨影响黄草乌化学成分累积的主导环境因子硕士论文答辩为黄草乌人工标准化种植提供理论依据研究技术路线黄草乌野外取样指纹图谱分析无机元素分析土壤样品黄草乌资源、生态环境调查与样品采集采样点气候数据ICPHPLCRA黄草乌无机元素的富集特征不同产地与季节黄草乌指纹图谱特征GRA影响黄草乌生物碱累积的主导环境因子排序评价与矫正硕士论文答辩结果2黄草乌原药材与土壤的无机元素相关性分析

黄草乌药材原药材与土壤间无机元素相关性分析的结果显示，二者并无明显相关性。说明黄草乌主要通过选择性吸收调控药材中无机元素的含量，这与黄草乌遗传特性有关.黄草乌原药材及其土壤无机元素相关性研究

硕士论文答辩结果3黄草乌原药材无机元素富集系数

黄草乌原药材无机元素富集系数的分析结果显示：黄草乌对钙、铅、磷和砷的吸收富集作用明显。黄草乌原药材及其土壤无机元素相关性研究硕士论文答辩滇乌碱（Ⅰ）（yunaconitine）

黄草乌碱甲（Ⅱ）（vilmorrianineA）

黄草乌碱丙(Ⅲ)（vilmorrianineC）

黄草乌对砷的富集作用也比较明显,而砷是形成黄草乌中的化学成分滇乌碱（Ⅰ）（yunaconitine）、黄草乌碱甲（Ⅱ）（vilmorrianineA）、黄草乌碱丙(Ⅲ)（vilmorrianineC）结构中的必要元素。砷直接参与了上述生物碱的形成。不能孤立的依据某种无机元素的含量高低评价药材中该元素的含量，而应分析元素间的相互作用，更多的考察无机元素的存在形态及其作用而不仅仅局限于其含量的多少，单纯以现行的环境标准作为药材质量评价指标具有一定的局限性。黄草乌原药材及其土壤无机元素相关性研究硕士论文答辩黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立药材提取方法:方法一：碱性乙醚（pH10-11）超声30min过滤，旋干甲醇溶解定容至10ml方法二：碱性甲醇（pH10-11）超声30min过滤，旋干甲醇溶解定容至10ml方法三：甲醇超声30min过滤，旋干甲醇溶解定容至10ml方法四：乙醚超声30min过滤，旋干，水溶解过分离小柱，去除水溶性部分，再用甲醇冲洗分离小柱，溶出脂溶性部分，回收，用甲醇定容至10ml。方法五：甲醇超声30min过滤，旋干，水溶解过分离小柱，去除水溶性部分，再用甲醇冲洗分离小柱，溶出脂溶性部分，回收，用甲醇定容至10ml。色谱条件一：色谱柱一：χTerraRP18柱(3.9ⅹ150mm,5μ)流动相：甲醇：0.1%三乙胺流速：1.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：267nm色谱条件二：色谱柱二：μBondapakNH2125Å(3.9ⅹ300mm,10μ)流动相：乙腈：磷酸三乙胺溶液(0.025mol/L磷酸：0.1%三乙胺(3:1))流速：1.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：267nm色谱条件三：色谱柱三：ZORBAXSB-C18柱(4.6ⅹ250mm,5μ)流动相：乙腈：磷酸三乙胺溶液(0.025mol/L磷酸：0.1%三乙胺(3:1))流速：1.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：267nm硕士论文答辩方法一方法二方法三方法四方法五方法六方法七方法八黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立方法九方法十黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立同一地区不同季节黄草乌生物碱指纹图谱的比较XP2-WD(7HJ)XXP2-WD(8HJ)2-WD(8HJ)XP2-WD(9HJ)XP2-WD(10HJ)XP2-WD(11HJ)附图1.17-11月武定地区黄草乌生物碱指纹图谱

不同产地、不同季节黄草乌生物碱指纹图谱特征研究硕士论文答辩XP2-FZS(7HJ)XP2-FZS(8HJ)XP2-FZS(9HJ)XP2-FZS(10HJ)XP2-FZS(11HJ)附图1.27-11月个旧风筝山地区黄草乌生物碱指纹图谱

硕士论文答辩同一地区不同季节黄草乌生物碱指纹图谱的比较XP2-DMS(7HJ)XP2-DMS(8HJ)XP2-DMS(9HJ)XP2-DMS(10HJ)XP2-DMS(11HJ)附图1.37-11月个旧对门山地区黄草乌生物碱指纹图谱

硕士论文答辩同一地区不同季节黄草乌生物碱指纹图谱的比较附图1.57-11月华宁岔纳地区黄草乌生物碱指纹图谱

XP2-CN(7HJ)XP2-CN(8HJ)XP2-CN(9HJ)XP2-CN(10HJ)XP2-CN(11HJ)硕士论文答辩同一地区不同季节黄草乌生物碱指纹图谱的比较

11月成熟期，黄草乌生物碱指纹图谱出峰最多，生物碱各组分的相对峰面积最大。9～11月是黄草乌生物碱的迅速累积期。11月成熟期，黄草乌生物碱总量最高，是采收的最佳季节。同一地区不同季节黄草乌生物碱指纹图谱的比较结论硕士论文答辩不同产地相同季节黄草乌生物碱指纹图谱比较附图2.17月武定、华宁岔纳、个旧石门坎、个旧对门山、个旧风筝山五产地黄草乌生物碱指纹图谱

XP2-WD(7HJ)XP2-CN(7HJ)XP2-SMK(7HJ)XP2-DMS(7HJ)XP2-FZS(7HJ)硕士论文答辩附图2.39月武定、华宁岔纳、个旧石门坎、个旧对门山、个旧风筝山五产地黄草乌生物碱指纹图谱

XP2-WD(9HJ)XP2-CN(9HJ)XP2-SMK(9HJ)XP2-DMS(9HJ)XP2-FZS(9HJ)不同产地相同季节黄草乌生物碱指纹图谱比较硕士论文答辩附图2.410月武定、华宁岔纳、个旧石门坎、个旧对门山、个旧风筝山五产地黄草乌生物碱指纹图谱

XP2-WD(10HJ)XP2-CN(10HJ)XP2-SMK(10HJ)XP2-DMS(10HJ)XP2-FZS(10HJ)不同产地相同季节黄草乌生物碱指纹图谱比较硕士论文答辩不同产地黄草乌生物碱各组分相关性分析结果硕士论文答辩不同产地黄草乌生物碱各组分相关性分析结果硕士论文答辩不同产地黄草乌生物碱各组分相关性分析结果各个采样点的指纹图谱共有峰相关性分析结果显示：各地区峰1（保留时间16.387-16.813min）和峰2（保留时间22.268-22.441min）显著正相关。硕士论文答辩黄草乌化学成分与气候、土壤生态因子的关系研究灰色关联分析方法

系统关联分析中，以往常用的定量方法是数理统计法，如回归分析、方差分析、主成分分析、主定量分析等，尽管这些方法解决了许多实际问题，但他们往往要求大样本，且要求只有典型的概率分布，而这在实际中却很难实现。灰色系统理论提出的灰色关联分析方法则可不受这些局限，这种分析方法可在不完全的信息中，对所要分析研究的各因素，通过一定的数据处理，在随机的因素序列间，找出它们的关联性，发现主要矛盾，找到主要特性和主要影响因素。

所谓灰色关联分析(GRA,GrayRelationshipanalysis)是基于行为因子序列的微观或宏观几何接近，以分析和确定因子间的影响程度或因子对主行为的贡献测度而进行的一种分析方法。

硕士论文答辩第三部分灰色关联分析的基本思想：一种相对性的排序分析目的：寻找一种能够衡量各因子间的关联度大小的量化方法，以便找出影响系统发展态势的重要因素步骤：确定原始数据矩阵原始数据无量纲化处理带入DPS软件进行相关分析灰色关联分析方法硕士论文答辩黄草乌各生物碱相对峰面积与气候土壤因子（原始数据）

灰色关联分析硕士论文答辩原始数据无量纲化处理结果（初值化处理结果）

灰色关联分析硕士论文答辩气候、土壤因子对黄草乌生物碱累积影响的灰色关联分析结果

灰色关联分析硕士论文答辩结论气候、土壤各因子对黄草乌总生物碱影响的关联序列为降水>相对湿度>年均温>日照>钾>风速>磷>钙>砷>铅。降水量低、年均温高、相对湿度低的地区，黄草乌总生物碱含量较高。

在各产地黄草乌生物碱指纹图谱共有峰中，不同的生物碱，对其影响的主导环境因子是不相同的。在各产地黄草乌指纹图谱共有峰中，并不是所有的化学成分均与环境因子有很强的相关性。峰5（保留时间30.793-31.090min）、峰6（保留时间31.786-32.258min）与气候、土壤各因子的相关性相对较小。硕士论文答辩黄草乌化学成分与气候、土壤生态因子的关系研究讨论土壤因素对植物次生代谢的影响

土壤是植物生长的基础,由于土壤类型、质地、含水量、pH值、肥力状况以及所含微量元素的不同，造成了植物次生代谢物含量的差异。药用植物微量元素含量与其生长的土壤中该元素水平密切相关但不完全成正相关的关系。因为植物吸收土壤中微量元素存在着主动吸收和被动吸收的问题。黄草乌微量元素与土壤无量元素无明显的正相关性，以主动吸收为主，对无机元素的富集受植物本身的遗传因素的影响，同时又与外界的生长条件有关，二者比例各是多少，通常很难确定。研究发现磷、钾是土壤元素中影响黄草乌生物碱积累的主要元素。这些元素可能主要是通过促进初生代谢来影响次生代谢物生物碱的合成。硕士论文答辩植物次生代谢物合成累积动态

讨论不同种类植物中的化学成分的积累动态不同，大量次生代谢产物的发生，常出现在植物生长发育的一定阶段。黄草乌生物碱累积高峰期与其生长高峰期不一致，恰好相互错位，滞后于生长高峰期。出现这一现象的主要原因可能为：次生代谢与蛋白质、脂肪及核酸等初生代谢存在着原料的竞争关系，次生代谢只在初生代谢中间产物累积到一定程度并在调节次生代谢酶的催化作用下才出现高峰。因此，次生代谢的高峰期往往滞后于初生代谢的高峰期。硕士论文答辩讨论环境因子对植物次生代谢产物生物碱合成的影响

植物体生物碱的代谢与环境的相关性很大，环境因子中光照、温度、降水极大影响了生物碱的代谢过程.研究表明高温高湿的环境有利于植物体内高氮化合物的代谢，不利于生物碱的合成；高温低湿的环境有利于生物碱的合成。黄草乌生物碱与环境关系的研究结果与上述结论相符，进一步证实了高温低湿的环境有利于生物碱的合成。有些研究发现，光照充足的条件利于生物碱的合成，紫外线可诱导生物碱的合成。本研究发现高强度短日照促进黄草乌生物碱的累积，这可能