艾滋病实验室检查讲解学习

艾滋病实验室检查2免疫学检测AIDS患者正常(×109/L)CD4<0.21(0.8～1.2)CD4/CD8<11.2～2.1淋巴细胞总数<12～3流式细胞仪测定3血清学检测（１）HIV抗体的初筛试验——ELISA（酶联免疫试验）4血清学检测（２）HIV抗体的确证试验——Westernblot（免疫印迹试验）5血清学检测（３）HIV抗原检测——ELISA夹心法测定p24抗原敏感性很高（7～10pg/ml）特异性稍差（可有假阳性）6分子生物学检测（1）HIVRNA检测—RT-PCR（逆转录-聚合酶链反应）PCR：高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃)；经25~30个循环，成倍数扩增荧光定量PCR：比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）应用：PCR查PBMCs前病毒DNA；RT-PCR查血浆中的病毒RNA7分子生物学检测（2）淋巴细胞HIVRNA检测——Northern印迹杂交(Northernblot)

原理：RNA片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂交8分子生物学检测（3）HIV变异株检测——Sanger测序法

原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的PAGE胶上电泳，获得DNA序列9病毒检测血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIV操作复杂，主要用于科研10诊断11诊断原则流行病学史：有静脉注射毒品史；多个性伴和不洁性生活史；输入未经HIV抗体检测的血液和血制品史；HIV抗体阳性所生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。临床表现：

高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现，颈、腋及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。无症状期、艾滋病期临床表现。

实验室检查：①HIV抗体阳性，并经确证试验确认。②CD4+T淋巴细胞数明显减少。③HIVRNA和P24抗原的检测有助于早期诊断新生儿的HIV感染。12诊断标准急性期

★流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性

★仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性无症状期

★流行病学史、HIV抗体阳性

★仅实验室检查HIV抗体阳性

13诊断标准艾滋病期

★

流行病学史，HIV抗体阳性，临床表现有下列一项或以上：

1.短期（6个月内）体重下降10％以上；2.咳嗽或腹泻超过4周；3.持续或间歇发热超过4周；4.全身淋巴结肿大；5.反复带状疱疹或慢性播散性HSV感染；6.口咽念珠菌病；7.全身搔痒性皮炎；8.反复发生的败血症；9.深部真菌感染，马尔尼非青霉菌；10.肺孢子虫肺炎；11.活动性巨细胞病毒感染；12.弓形虫脑病。13.反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病；14.中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症；15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。ⅠⅠ14诊断标准

★HIV抗体阳性

CD4+T淋巴细胞数<200/mm3无上述表现或症状15鉴别诊断原发性CD4+淋巴细胞减少症

无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。继发性CD4+淋巴细胞减少

肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmunedisease）化疗或免疫抑制治疗后。16预后17影响预后的因素感染的HIV型别及亚型：

HIV-1较HIV-2临床进展快并发的机会性感染：

同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高；合并丙型肝炎者预后差抗逆转录病毒治疗：

治疗改变了艾滋病进程

18HIV感染未治疗者的结局典型

(70%～80%)：5～10年进展为艾滋病快速进展型(10%～15%)：2～3年长期无进展型

(<5%)：HIV感染超过10年CD4+细胞