标准解读
《GB/T 41627-2022 动物源空肠弯曲菌检测方法》是一项国家标准,专门针对动物来源样本中的空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)提供了一套标准化的检测流程。该标准适用于畜禽肉类及其制品、蛋类等食品中空肠弯曲菌的定性检测。
首先,在准备阶段,需要根据实验要求准备好所需的仪器设备和试剂材料,包括但不限于无菌采样袋或容器、培养基(如改良Skirrow血琼脂平板)、选择性增菌液(例如Bolton肉汤),以及用于生化鉴定的试剂盒等。所有工具与介质均需保证无污染状态,并且在使用前应按照规定条件进行灭菌处理。
接下来是样品采集与处理步骤。对于固体样品,一般采取随机抽取的方式获取足够量的代表性样本;液体样品则直接取样即可。将取得的试样置于适宜环境中保存并尽快送检。到达实验室后,依据具体类型对样品实施相应的预处理措施,比如匀浆、稀释或是富集培养等操作。
随后进入关键的分离培养环节。先将经过处理后的样品接种至选择性增菌液内,在特定条件下孵育一段时间以促进目标细菌生长。之后,再将其转接到选择性培养基表面继续培养观察。需要注意的是,整个过程中温度控制尤为重要,因为空肠弯曲菌为微需氧菌,在37℃~42℃范围内生长最佳。
当培养结束后,可通过形态学特征初步判断可疑菌落是否为空肠弯曲菌。进一步确认则依赖于一系列生化反应测试,包括氧化酶试验阳性、马尿酸盐水解试验阴性等特性表现。此外,还可以采用分子生物学手段如PCR技术来提高鉴定准确性。
最后一步是对阳性结果进行报告编写。记录下从样品接收到最终结论得出期间的所有相关信息,确保数据真实可靠,并按照规范格式提交给相关单位或个人。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2022-07-11 颁布
- 2023-02-01 实施
文档简介
ICS11220
CCSB.41
中华人民共和国国家标准
GB/T41627—2022
动物源空肠弯曲菌检测方法
DetectionmethodofCampylobacterjejunifromanimalsamples
2022-07-11发布2023-02-01实施
国家市场监督管理总局发布
国家标准化管理委员会
GB/T41627—2022
前言
本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定
GB/T1.1—2020《1:》
起草
。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任
。。
本文件由中华人民共和国农业农村部提出
。
本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口
(SAC/TC181)。
本文件起草单位扬州大学中国动物卫生与流行病学中心
:、。
本文件主要起草人焦新安黄金林唐苑悦王娟任方哲李凤鸣曲志娜宋召军赵思俊
:、、、、、、、、、
张纯萍
。
Ⅰ
GB/T41627—2022
动物源空肠弯曲菌检测方法
1范围
本文件描述了动物源空肠弯曲菌Campylobacterjejuni多重的检测方法
()PCR。
本文件适用于畜禽养殖和屠宰过程中动物源空肠弯曲菌的检测
。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文
。,
件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于
,;,()
本文件
。
食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验
GB4789.9—2014
兽医实验室生物安全要求通则
NY/T1948
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义
。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件
。
菌落形成单位
CFU:(Colony-formingunit)
二甲基亚砜
DMSO:(Dimethylsulfoxide)
脱氧核糖核酸
DNA:(Deoxyribonucleicacid)
乙二胺四乙酸
EDTA:(Ethylenediaminetetraaceticacid)
弯曲菌选择性琼脂
mCCDA:(Modifiedcharcoalcefoperazonedeoxycholateagar)
琼脂
MHA:MuellerHinton(MuellerHintonagar)
磷酸盐缓冲液
PBS:(Phosphatebufferedsaline)
聚合酶链式反应
PCR:(Polymerasechainreaction)
硼酸盐
TBE:Tris--EDTA(Tris-Borate-EDTA)
5设备和材料
51冰箱冷藏温度为
.:2℃~8℃。
52恒温培养箱
.:37℃±1℃、42℃±1℃。
53高压灭菌锅灭菌温度为工作压力为
.:121℃,0.1MPa。
54恒温振荡培养箱
.:180r/min、42℃±1℃。
55微需氧培养装置氧气二氧化碳和
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