TJAASS 9-2020 水果、蔬菜中吡虫啉农药残留 免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术

ICS65.020B15团 体 标 准T/JAASS9-2020水果、蔬菜中吡虫啉农药残留免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术DeterminationofImidaclopridbyHighperformanceliquidchromatographywithimmunoaffinitycolumnclean-up2020－10－12发布 2020－10－12实施江苏省农学会 发布T/JAASS9-2020目 次前言 Ⅲ范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1原理 1试剂与材料 1仪器与设备 1试样制备 2测定 2结果判定与表述 3检测限和重复性 3前  言本文件按照GB/T1.1-2020给出的规则起草。本文件由江苏省农业科学院提出。本文件由江苏省农学会归口。本文件主要起草人：刘凤权、王利民、华修德、王鸣华、张存政、郭逸蓉、徐振林、石松、孙远明。IIIT/JAASS9-2020水果、蔬菜中吡虫啉农药残留免疫亲和柱净化—高效液相色谱检测技术范围本文件规定了吡虫啉农药残留的免疫亲和层析净化—高效液相色谱检测技术的原理、试剂与材料、仪器与设备、试样制备、测定、结果计算与表述和重复性。本文件适用于蔬菜、水果中吡虫啉农药残留的测定。规范性引用文件（包括所有的修改单适用于本文件。GB2763 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682 分析实验室用水规格和实验方法术语和定义本文件无术语和定义。原理试样经过甲醇-水提取后，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有吡虫啉特异性抗体的免疫亲和层析柱层析净化，经高效液相色谱仪分离、检测后，测定试样中吡虫啉的含量。试剂与材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯；实验室用水符合GB/T6682中规定的二级水，标准溶液和流动相用水为一级水。甲醇色谱纯苯色谱纯乙腈色谱纯仪器与设备1T/JAASS9-2020吡虫啉免疫亲和柱，柱容量≥300ng。滤纸9cm双圈定性滤纸容量瓶20mL容量瓶高效液相色谱仪试样制备提取20g。10mL乙腈（5.4）-水（70:30）5min30min。随后将样品溶液在滤纸（6.2）上进行固液分离。20mL容量瓶（6.3）20mL（样品处理液冲洗滤纸中的样品）。5倍稀释，待检测用。净化将免疫亲和柱（6.1）10.0mL玻璃定量管下。10.0mL样品提取液注入玻璃定量管中。2mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱。10.0mL2次，弃去全部流出液。1.0mL1mL/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，加纯水定容2.0mL，供色谱检测用。测定色谱条件色谱柱：SB-C18柱、4.6×250mm流动相：甲醇+水（15:85）溶液流速：1.0mL/min检测波长：紫外波长270nm柱温：室温进样量：20色谱测定2T/JAASS9-2020分别取相同体积样液和标准工作溶液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试样的响应值（峰高或峰面积）。经过与吡虫啉标准溶液谱图比较响应值得到试样中吡虫啉的浓度。结果计算与表述试样中吡虫啉含量以质量分数X计，单位为毫克每千克（mg/kg），按式（1）计算：（1）式中：Pi：试样溶液中吡虫啉组分的峰面积值；Cs：吡虫啉标准溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；Vs：标准溶液的检测体积（mL）；Ps：吡虫啉标准溶液面积平均值（系列浓度）；m：试样质量，单位为克（g）。测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果表示到小数点后一位。检测限和重复性0.2mg/kgGB27