cn.6a利用酒糟发酵生产乙偶姻和转化四甲基吡嗪的方法

(19)中民国家知识(21)(22)(71)214122(72)发明人(74)专利机构无锡市大为专利商人时C12P7/26(2006.01)C12P17/12C12R1/125

(10)申请公布号 (43)C12RC12R1/1015附图2(57)酒糟中补充适量葡萄糖0～100g/kg，加入枯草芽孢杆菌（OM208157）或地衣芽孢杆菌A（CGMCC396139623963养物37℃发1～3天，能够大量产生生物香AA权利要求1/10.1-1mol/LNaOH溶液调节酸度0～50～100g/kg酒糟，加入菌株培养物发酵生产乙偶姻；在发酵产物中另外补充铵盐10～30g/kg酒糟，所述的菌株培养物为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）CCTCCNOM208157Bx利用酒糟发酵生产乙偶姻和转化生产四甲基吡嗪的方 其重要的作用。目前全球各类食品添加剂的总消费量已接近1000万吨品种有25000多种而香精和香料则是其中用量最大种类最多的一类食品添加剂。目前在人们对食品添加剂营养健康安全性的强烈要求下采用工业生物技术开发绿色安全的香精香料等食品和饲料添加剂已成为该行业实现可持续发展的重要途径对于催生我国高安全健康天然的香精香料产业带动我国食品行业整体水平的发展具有极其重要的意义。[0003] 乙偶姻即3-羟基-2-丁酮天然存在于乳品黄油干酪酒类玉米葡萄苹果草莓可可等各类食品中是一种应用广泛的食用香料其具有明显的奶酪香脂香特征主要用于奶油乳品酸奶等香料的生产。GB2760-86规定其为容许食用的香料美国食品和萃取FEMA安全号为2008。此外乙偶姻作为一种平台化合物广泛应用于食品制药化工IT等行业乙偶姻的生产法主要分为两类化学合成法与生物合成法。化学法生产乙偶姻存在着产品收率低高能耗高污染且产品质量难以达到食用香料的要求生物合成法生产的乙偶姻有效地避免了上述问题产品绿色天然反应条件温和污染少能耗低是一种十分具有发展前景的合成方法目前有应用微生物采用合成培养基液态发酵生产乙偶姻的方法但是存在原料成本高发酵废液处理等问题至今还没有采用酒糟等作为原料培养基进行固态发酵生产乙偶姻的。 [0007]（1）本发明要解决的一个技术问题是提供了一种以酒糟为原料生产生物香料乙偶姻和四[0008]（2）本发明的技术方案乙偶姻的发酵生产：培养基的新鲜酒0.1-1mol/LNaOH溶液调节酸度为0～5充葡萄糖0～100g/kg酒糟。M01芽孢（Bacilluslicheniformis）CGMCC3961，CGMCC3962，CGMCC3963中任一株[0010]所述枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）CCTCCNOM208157已在申请号200810235366.1申请日2008年12月8日，发明名称“一株高产四甲基吡嗪的枯草芽孢杆[0011]所述地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）CGMCC3961，CGMCC3963已在申请号201010238685.5申请日2010年7月28发明名称“一种生产四甲基吡11～4（w/v）的比例混合后，蒸1-5h冷却后加10～50gBx后，80～100℃蒸煮30min。 四甲基吡嗪的发酵生产：培养基的新鲜酒0.1-1mol/LNaOH溶液调节酸度为0～5充葡萄糖0～100g/kg酒糟。[0016]菌株培养物：枯草芽孢杆菌（CCTCCNOM208157）和地衣芽孢杆菌（91929316～48h11～4（w/v）的比例混合后，蒸1-5h冷却后加10～50gBx固体培养基制作方式为原料样品经后与水按1︰0.5～2（w/v）的比例混合后，80～100℃蒸煮30min。培养基2～10（w/w接种接种后37培养1～3d后；补加铵盐10～30g/kg酒化生产条件为30～90℃1～3d。[0020][0021]固态发酵培养11～2（w/v）加入水或乙醇，再60℃水浴中超声保1h，50～80℃二次减压蒸馏除去水分，得到液态乙偶姻产物。[0022]2（w/v[0023]（3）本发明的有益效果（1可通过是否添加铵盐来有选择的控制生产乙偶姻或四甲基吡嗪，在生物香料的生（2（3（4）3.02g/kgM20815 2.CGMCC3961 3. 4. M239613962396348h Bx 式为：原料样品经后，与水按1︰0.5～2（w/v）的比例混合后，80～100℃蒸煮 10%(v/w) 实施例2白酒糟发酵转化生产四甲基吡嗪 菌株培养物：枯草芽孢杆菌（CCTCCNOM208157）和地衣芽孢杆菌116～48h Bx 式为：原料样品经后，与水按1︰0.5～2（w/v）的比例混合后，80～100℃蒸煮551～3d3.02g/kg[0038]31kg固态发酵1:1～2（w/v）加入蒸馏60℃水浴中超声1h浸出8000rpm10min所得上清液经70℃减压蒸馏除去不挥发收集馏分经80℃[00