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文档简介
果蝇综合大实验--性状观察及杂交实验设计综合实验内容:实验一、果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法实验二、果蝇分离定律的实验分析实验三、果蝇自由组合的实验分析实验四、果蝇的伴性遗传实验分析实验五、果蝇的三点测验实验分析实验六、果蝇的连锁与交换实验分析实验一果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法实验目的1、了解果蝇的生活史;3、通过实验学习掌握果蝇性别的鉴定方法;4、了解果蝇的饲养方法;5、仔细观察并记录实验室各品系果蝇的性状。2、掌握果蝇的麻醉及观察方法;(一)果蝇的生活史果蝇属于昆虫纲,双翅目,与家蝇是不同的种。它的生活史包括:卵→幼虫→蛹→成虫。受精卵一龄幼虫二龄幼虫三龄幼虫蛹成虫图一、果蝇生活史图解果蝇的生活周期长短与温度关系很密切,30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡,低温则使它生活周期延长,同时生活力也减低,果蝇培养的最适温度20—25℃。10℃15℃20℃25℃卵幼虫8天5天幼虫成虫57天18天6.3天4.2天从表中可以看出25℃时,从卵到成虫约10天;在25℃时成虫约活15天。果蝇一般是培养在恒温箱内,盛夏时,要注意降温。生长迅速,生活史较短,短时间内可获得大量子代;容易饲养,在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖;染色体数目少,加之唾腺染色体巨大,是细胞学观察的好材料;突变性状多,且多数是形态突变,便于观察。(二)果蝇是遗传学分析的好材料对果蝇进行检查时,可用乙醚麻醉,使它保持静止状态。因果蝇对乙醚很敏感,易麻醉,麻醉的深度看实验要求而定(作种蝇以轻度麻醉为宜,做观察可深度麻醉,致死也无妨。果蝇翅膀外展45℃角表示已死)。麻醉时将乙醚(2-3滴)滴到麻醉瓶塞的绵球上(注意不要让乙醚流到瓶内),同时麻醉瓶要保持干燥,否则会粘住果蝇翅膀。将培养瓶倒置,让果蝇向瓶底部运动,然后打开麻醉瓶和培养瓶塞,迅速将两者瓶口相接(麻醉瓶在上,培养瓶在下),轻拍培养瓶壁使果蝇落入麻醉瓶中,迅速盖好两个瓶塞,并倒置麻醉瓶,一分钟后果蝇即处于昏迷状态。麻醉后的果蝇放在白瓷板上,用毛笔轻轻拨动进行观察。必要时可进行第二次麻醉。观察完毕后倒入煤油或酒精瓶中(死蝇盛留器)。(三)果蝇的麻醉及观察方法(四)果蝇的雌雄鉴别果蝇有雌雄之分,幼虫期区别较难,成虫区别容易。
雄性体型较小,腹部环纹5节,末端钝而圆,颜色深。第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏,称性梳(sexcombs)。
雌性体型较大,腹部环纹7节,末端尖,颜色浅,跗节前端无黑色鬃毛流苏。图2、一对雌雄果蝇(左雄,右雌)下一张另一对雌雄果蝇(左雌,右雄)1下一张另一对雌雄果蝇(左雌,右雄)2返回图3、性梳性梳下一张下一张性梳(五)果蝇的培养果蝇在水果摊或果园里常可见到,但它并不是以水果为生,而是食生长在水果上的酵母菌,因此实验室内凡能发酵的基质,均可作为果蝇饲料。
目前本实验室所用的果蝇培养基配方如下:A:蔗糖13克,琼脂1.3克,加水100毫升,煮沸溶解。B:玉米粉17克,加水80毫升,混合均匀。将B慢慢倒入A中,并不停搅动混合,加热成糊状后,再加1.4克酵母粉,混合均匀,稍冷却后加入1毫升丙酸,调匀后即可分装到培养瓶中。A、培养基的制备返回除了以上的饲料外,常用的还有米粉饲料和香蕉饲料:1.米粉饲料的配制:琼脂0.9—2.5克加入100毫升水中,加热煮沸溶解;再加10克红糖,待溶解后将8克米粉(或麸皮)倒入正在煮沸的琼脂—红糖溶液中去,不断搅拌煮沸数分钟,待成稀粥状后即可分装使用。2.香蕉饲料配制:将熟透的香蕉捣碎,制成香蕉浆(约50克)。将1.5克琼脂加到48毫升的水中煮沸,溶解后拌入香蕉浆,再煮沸后即可分装。
以上两种饲料容易生霉菌,必要时需加少量防霉剂。返回培养果蝇的饲养瓶,常用的有牛奶瓶,大中型指管,用纱布包裹的棉花球作瓶塞(有条件的地方可改用泡沫塑料作瓶塞)。饲养瓶先消毒,然后倒入饲料(2厘米厚),待冷却后,用酒精棉擦瓶壁,然后滴入酵母菌液数滴,再插入消毒过的吸水纸,作为幼虫化蛹时的干燥场所。B、培养容器返回C、原种培养在作为新的留种培养时,事先检查一下果蝇有没有混杂,以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶5—10对,移入新培养瓶时,须将瓶横卧,然后将果蝇挑入,待果蝇清醒过来后,再把培养瓶竖起,以防果蝇粘在培养基上。原种每2-4周换一次培养基(按温度而定),每一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称,培养日期等,作为原种培养,可控制到10—15℃,培养时避免日光直射。返回(六)果蝇的性状果蝇的性状主要从以下四个方面进行观察:体色翅型眼刚毛每个方面都有不同的性状:灰体黑体b(2)黑檀体e(3)黄体y(1)红眼白眼w(1)棒眼B(1)长翅短翅m(1)卷翅Cy(2)残翅vg(2)直刚毛卷刚毛sn(1)返回1、体色灰体果蝇下一张黑檀体果蝇下一张黄体果蝇返回2、眼色红眼下一张白眼下一张棒眼返回3、翅型长翅下一张下一张短翅卷翅下一张下一张卷翅残翅返回4、刚毛直刚毛(七)实验室果蝇品系性状观察品系体色眼色翅型刚毛346182226认真观察实验室果蝇品系的性状,完成下表显示答案返回(七)实验室果蝇品系性状观察品系体色眼色翅型刚毛3黄红长直4灰红残直6灰白短卷18灰红长直22灰白长直26黑檀红长直认真观察实验室果蝇品系的性状,完成下表(八)思考题1、如何准确鉴定果蝇的雌雄个体?最主要特征是什么?2、果蝇的生活史分几个阶段?3、果蝇作为遗传学模式材料的优点有哪些?附:果蝇综合大实验杂交设计1、果蝇分离定律的实验分析2、果蝇自由组合的实验分析3、果蝇的伴性遗传实验分析4、果蝇的三点测验实验分析5、果蝇的连锁与交换实验分析利用实验室保存的哪两个果蝇品系进行杂交,一次实验即可验证前述四个遗传基本定律??思考体色翅型眼刚毛灰体黑体b(2)黑檀体e(3)黄体y(1)红眼白眼w(1)棒眼B(1)长翅短翅m(1)卷翅Cy(2)残翅vg(2)
直刚毛卷刚毛sn(1)品系体色眼色翅型刚毛3黄红长直4灰红残直6灰白短卷18灰红长直22灰白长直26黑檀红长直品系体色眼色翅型刚毛3黄红长直4灰红残直6灰白w(1)短m(1)卷sn(1)18灰红长直22灰白长直26黑檀e(3)红长直正交:6(♀)×26(♂)反交:26(♀)×6(♂)
设计果蝇杂交实验(PPT及纸质)一、实验目的二、实验原理三、实验材料
1、果蝇材料;
2、实验器具与药品四、实验步骤(技术路线)正交:6(♀)×26(♂)
反交:26(♀)×6(♂)
用箭头短线逐步示出实验流程,并注明每步骤所需的时间及注意事项。自行设计果蝇培养瓶标签。以8人为小组,提交PPT;纸质设计报告每人一份。正交组讲台反交组正交组反交组五、实验结果记录表格参考实验指导书,自行设计实验记录表格。六、预期的实验结果及统计学分析方法
正交组:1、分离定律;2、自由组合定律;
3、伴性遗传;4、三点测验
反交组:1、分离定律;2、自由组合定律;
3、伴性遗传;
自行设计卡方检测表。七、实验中可能存在的困难、问题及解决方法亲本雌蝇为何一定要选用处女蝇?怎样才能保证所选雌蝇为处女蝇?在进行亲本杂交或F1自交一定时间后为什么要释放杂交亲本或F1?反交组为何不能直接进行三点测验?如果
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