标准解读
《GB/T 4789.39-2008 食品卫生微生物学检验 粪大肠菌群计数》是一项国家标准,规定了食品中粪大肠菌群的检测方法。该标准适用于各类食品中粪大肠菌群数量的测定。
根据此标准,首先需要制备待测样品溶液,通常通过称取一定量的样品并加入无菌生理盐水或其他适宜稀释液来完成。接着对样品进行适当比例的系列稀释,以便后续操作能够在合适的浓度范围内进行。
培养基的选择对于实验的成功至关重要,《GB/T 4789.39-2008》推荐使用EC肉汤作为增菌培养基,并指定了具体的成分与配比。将不同稀释度的样品接种到EC肉汤中后,在特定条件下(如温度、时间)下孵育。
经过初步培养后,需从每个试管中取出部分液体转接到确认试验所用的培养基上,这里使用的是乳糖发酵管。如果观察到产气现象,则表明存在能够发酵乳糖产生气体的大肠杆菌或类似细菌,这一步骤有助于进一步筛选出疑似阳性样本。
最后,通过对阳性结果的数量以及对应的稀释倍数进行统计分析,可以计算出每克或毫升原始样品中的粪大肠菌群最可能数(MPN)。这种方法基于概率论原理,提供了一个估计值而非确切数值,但足以反映样品受污染程度。
整个过程中需要注意实验室安全和个人防护措施,确保所有操作符合生物安全要求。此外,为了保证检测结果准确可靠,还需定期校准仪器设备、严格控制环境条件并对实验人员进行专业培训。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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- 被代替
- 已被新标准代替
- 2008-11-21 颁布
- 2009-03-01 实施
文档简介
犐犆犛07.100.30
犆53
中华人民共和国国家标准
犌犅/犜4789.39—2008
食品卫生微生物学检验
粪大肠菌群计数
犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狅狅犱犺狔犵犻犲狀犲—
犈狀狌犿犲狉犪狋犻狅狀狅犳犳犪犲犮犪犾犮狅犾犻犳狅狉犿狊
20081121发布20090301实施
中华人民共和国卫生部
发布
中国国家标准化管理委员会
书
犌犅/犜4789.39—2008
前言
本标准修改采用了美国食品药品管理局(FDA)《细菌学分析手册》第4章大肠杆菌和大肠菌群计
数(2002年)(BacteriologicalAnalyticalManual,Chapter4:Enumerationof犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻andtheco
liformbacteria,2002)。
本标准与FDA方法的主要差别是:
———将样品制备时取样量50g(或50mL)修改为25g(或25mL);
———将LST培养温度35℃±1℃修改为36℃±1℃;
———将EC培养温度45.5℃±0.2℃(一般食品)和44.5℃±0.2℃(贝类)统一为44.5℃±0.2℃。
本标准的附录A和附录B为规范性附录。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。
本标准负责起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。
本标准参与起草单位:江苏省疾病预防控制中心、中华人民共和国内蒙古出入境检验检疫局、中华
人民共和国辽宁出入境检验检疫局、上海市疾病预防控制中心。
本标准主要起草人:刘秀梅、袁宝君、刘中学、卢行安、刘弘、陈敏、田静。
Ⅰ
书
犌犅/犜4789.39—2008
食品卫生微生物学检验
粪大肠菌群计数
1范围
本标准规定了食品中粪大肠菌群计数的方法。
本标准适用于各类食品中粪大肠菌群的计数。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
2.1
粪大肠菌群犳犪犲犮犪犾犮狅犾犻犳狅狉犿
一群在44.5℃培养24h~48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
该菌群来自人和温血动物粪便,作为粪便污染指标评价食品的卫生状况,推断食品中肠道致病菌污染的
可能性。
3设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
3.1恒温培养箱:36℃±1℃。
3.2冰箱:2℃~5℃。
3.3恒温水浴箱:44.5℃±0.2℃。
3.4天平:感量0.1g。
3.5均质器。
3.6振荡器。
3.7无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
3.8无菌锥形瓶:容量500mL。
3.9无菌培养皿:直径90mm。
3.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。
4培养基及试剂
4.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨(laurylsulfatetryptose,LST)肉汤:见第A.1章。
4.2EC肉汤(犈.犮狅犾犻broth):见第A.2章。
4.3无菌生理盐水:称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15min。
4.41mol/L氢氧化
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