第十七章合成抗菌药物的分析2

第一节磺胺类药物分析治疗细菌感染性疾病的化学合成药物

磺胺类药物的发现，开创了化学治疗的新纪元–使死亡率很高的细菌性传染疾病得到控制.典型药物第一节磺胺类药物的分析

一、结构与性质（一）基本结构与代表药物芳伯氨基磺酰胺基磺胺异噁唑

（二）性质

1.两性化合物芳伯氨基（弱碱性）和磺酰胺基（酸性）2.芳伯氨基可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量3.与金属离子反应磺酰胺基氮原子上的氢比较活泼，可与某些金属离子（如硫酸铜）反应生成沉淀4.与生物碱沉淀试剂的反应5.紫外与红外吸收光谱特征二、鉴别试验

（一）芳香第一胺反应（二）与金属离子反应——硫酸铜磺胺异恶唑淡棕色→暗绿色↓

（四）IR（五）色谱法（三）UV复方磺胺甲噁唑片的鉴别：

1.取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑0.2g），加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取磺胺甲噁唑对照品0.2g与甲氧苄啶对照品40mg，加甲醇10ml溶解，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取上述两种溶液各5l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-二甲基甲酰胺（20∶2∶1）为展开剂，展开，晾干，置紫外灯（254nm）下检视。供试品溶液所显两种成分的主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

2.在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液两主峰的保留时间应与对照品溶液两主峰的保留时间一致。以上两项可选做一项。三、含量测定

（一）亚硝酸钠滴定法Ch.P.（2010）磺胺嘧啶锌软膏的含量测定：取本品约5g，精密称定，置烧杯中，加三氯甲烷30ml，微温搅拌使基质溶解，放冷，照永停滴定法（附录ⅦA），用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于30.00mg的C20H18N8O4S2Zn·2H2O。（二）非水酸量法磺胺异噁唑Ch.P.（2010）

（三）紫外-可见分光光度法

1．直接紫外分光光度法

Ch.P（2005）复方磺胺嘧啶片中的磺胺嘧啶的含量测定

308nm直接测定，TMP无干扰2.双波长分光光度法复方磺胺甲恶唑片的含量测定

Ch.P（2000）磺胺甲恶唑甲氧苄啶

测定波长257nm239nm

参比波长～304nm～295nmCh.P（2005）HPLCCh.P.（2010）HPLC复方磺胺嘧啶片的含量测定

Ch.P（2005）磺胺嘧啶308nm直接测定甲氧苄啶测定波长～277.4nm

参比波长308nmCh.P.（2010）HPLC（四）高效液相色谱法

Ch.P.（2010）联磺甲氧苄啶片的含量测定：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-三乙胺（200∶799∶1）（用氢氧化钠试液或冰醋酸调节pH值至5.9）为流动相；检测波长为240nm。理论板数按甲氧苄啶峰计算不低于4000，磺胺甲噁唑峰、磺胺嘧啶峰与甲氧苄啶峰的分离度应符合要求。

测定法

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲噁唑22mg），置100ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液适量，超声处理使主成分溶解，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取磺胺甲噁唑对照品、磺胺嘧啶对照品和甲氧苄啶对照品各适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含磺胺甲噁唑0.22mg、磺胺嘧啶0.22mg与甲氧苄啶89μg的溶液，摇匀，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。例1.与硫酸铜生成草绿色沉淀的是A.磺胺甲恶唑B.磺胺嘧啶C.甲氧苄啶D.磺胺异恶唑E.磺胺醋酰钠例2.中国药典收载磺胺甲恶唑的含量测定方法是A.非水溶液滴定法B.紫外分光光度法C.氮测定法D.NaNO2滴定法E.碘量法

例3.双波长分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片时，选择两个测定波长的原则是

A.磺胺甲恶唑在两波长处吸收度相等

B.磺胺增效剂甲氧苄啶（TMP）在两波长处吸收度相等

C.磺胺甲恶唑在两波长处吸收度不等

D.磺胺甲恶唑在两波长处的吸收度的差值应尽量大

E.磺胺增效剂甲氧苄啶在两波长处的吸收度差值应尽量小第二节喹诺酮类药物的分析

一、结构与性质（一）基本结构与代表药物

吡哌酸

诺氟沙星

环丙沙星

氧氟沙星

氟罗沙星

依诺沙星

司帕沙星（二）性质

1.酸碱两性2.

不稳定性

3.有机氟化物的反应

4.紫外与红外吸收光谱特征二、鉴别试验

（一）化学鉴别法1.与丙二酸的呈色反应

盐酸左氧氟沙星片的鉴别：取本品细粉适量（约相当于左氧氟沙星10mg），置干燥具塞试管中，加丙二酸约10mg与醋酐0.5ml，在水浴中加热5~10分钟，溶液显红棕色。2.盐酸盐与甲磺酸盐的鉴别Ch.P.（2010）甲磺酸培氟沙星的鉴别：取本品约30mg，加氢氧化钠0.2g，加水数滴，溶解后置酒精灯上小火蒸干至炭化，加水数滴与2mol/L盐酸溶液3～4ml，缓缓加热，即产生二氧化硫气体，能使湿润的碘酸钾淀粉试纸（取滤纸条浸入含有5%碘酸钾溶液与淀粉指示液的等体积混合液中湿透后，取出干燥，即得）显蓝色。（二）光谱法（三）色谱法三、特殊杂质检查

（一）溶液澄清度的检查（二）吸光度喹诺酮类药物在可见光区无吸收，通过控制在420～450nm波长处的吸光度，以控制有色杂质的限量。

司帕沙星中吸光度的检查：取本品，精密称定，加0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含0.4mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA），在440nm的波长处测定吸光度，不得过0.15。（三）有关物质HPLC（四）光学异构体左氧氟沙星中光学异构体的检查：

取本品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取适量，用流动相定量稀释制成每1ml中约含10g的溶液，作为对照溶液。照高效液相色谱法（附录VD）测定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以硫酸铜D-苯丙氨酸溶液（取D-苯丙氨酸1.32g与硫酸铜1g，加水1000ml溶解后，用氢氧化钠试液调节pH值至3.5）-甲醇（82∶18）为流动相；柱温40℃，检测波长为294nm。取氧氟沙星对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液，取20µl注入液相色谱仪，记录色谱图，右氧氟沙星与左氧氟沙星依次流出，右、左旋异构体峰的分离度应符合要求。取对照溶液20µl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的25%，再精密量取供试品溶液和对照溶液各20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液色谱图中右氧氟沙星峰面积不得大于对照溶液主峰面积（1.0%）。（五）残留溶剂（六）防腐剂

Ch.P.（2010）盐酸环丙沙星滴眼液采用HPLC法检查防腐剂苯扎溴铵或羟苯乙酯，规定供试品中如含苯扎溴铵或羟苯乙酯，应为标示量的80%～120%；氧氟沙星滴眼液亦采用HPLC法检查防腐剂苯扎溴铵，规定供试品中如含苯扎溴铵，应为标示量的80%～120%。诺氟沙星滴眼液除采用HPLC法检查防腐剂羟苯甲酯、羟苯丙酯外，还采用双硫腙滴定法检查硫柳汞。四、含量测定

（一）非水碱量法（二）紫外分光光度法诺氟沙星乳膏的含量测定：

精密称取本品适量（约相当于诺氟沙星5mg），置分液漏斗中，加三氯甲烷15ml，振摇后，用氯化钠饱和的0.1%氢氧化钠溶液25ml、20ml、20ml和10ml分次提取，合并提取液，置100ml量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密