标准解读
《GB/T 35906-2018 猪瘟抗体间接ELISA检测方法》是一项国家标准,旨在提供一种科学、准确的方法来检测猪体内是否存在针对猪瘟病毒的特异性抗体。该标准适用于对疑似感染或已接种疫苗猪只进行血清学监测,以评估其免疫状态。以下为该标准主要内容概述:
首先,在准备阶段,明确了所需试剂和材料的具体要求,包括抗原包被液、封闭液、稀释液以及酶标记二抗等,并且对于每种成分的质量控制标准都有详细说明。此外,还规定了样品采集与处理的方法,强调应从待测动物中正确抽取血液样本并分离出血清用于后续实验。
接下来是具体操作步骤,分为以下几个关键环节:
- 包被:使用猪瘟病毒抗原溶液在微孔板上进行包被。
- 封闭:加入封闭液以减少非特异性结合。
- 加样:将待测血清样本按照一定比例稀释后加入到相应的孔中。
- 孵育:在特定温度下让样本中的抗体与固定于板上的抗原充分反应。
- 洗涤:去除未结合的物质。
- 加酶标二抗:添加能够识别并与目标抗体结合的酶标记二抗。
- 再次孵育与洗涤:确保酶标二抗与样本中的抗体形成复合物。
- 显色:通过加入底物使颜色发生变化。
- 终止反应:使用终止液停止显色过程。
- 读数:利用酶标仪测定各孔吸光度值。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2018-02-06 颁布
- 2018-09-01 实施




文档简介
ICS11220
B41.
中华人民共和国国家标准
GB/T35906—2018
猪瘟抗体间接ELISA检测方法
IndirectELISAtodetectantibodyagainstclassicalswinefevervirus
2018-02-06发布2018-09-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T35906—2018
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由中华人民共和国农业部提出
。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口
(SAC/TC181)。
本标准起草单位中国兽医药品监察所
:。
本标准主要起草人王琴徐璐范学政赵启祖邹兴启朱元源宁宜宝
:、、、、、、。
Ⅰ
GB/T35906—2018
引言
牛病毒性腹泻粘膜病病毒在牛的感染比较严重偶尔也有猪自然感染的报道在田间牛病毒性
/,。,
腹泻粘膜病病毒通常对出生后的猪无致病性仅对胎猪有致病性虽然牛病毒性腹泻粘膜病病毒可
/,。/
在猪群中传播但这种传播是很有限的在没有新的传染源引入的前提下猪群中已经存在的牛病毒性
,。,
腹泻粘膜病病毒会被逐渐清除病毒的传染链会终止牛源牛病毒性腹泻粘膜病病毒是猪感染牛病
/,。/
毒性腹泻粘膜病病毒的主要来源主要与牛猪混养程度或使用了污染牛病毒性腹泻粘膜病病毒的牛
/,/
源材料有关在我国生猪饲养的主力主要为大中型养殖场很少存在猪牛混养情况因此不会导致牛病
。,,
毒性腹泻粘膜病病毒在猪群中的流行传播另外猪用疫苗生产中的所使用的牛源原材料均需进行牛
/。,
病毒性腹泻粘膜病病毒等外源病毒检测因此疫苗生产工艺的提高也彻底切断了牛病毒性腹泻粘膜
/,,/
病病毒在猪群中传播途径最后猪瘟疫苗在我国的免疫率接近而猪瘟病毒与牛病毒性腹泻
。,100%。/
粘膜病病毒为同属病毒免疫上存在一定的交叉保护猪群中存在牛病毒性腹泻粘膜病抗体阳性的可
,。/
能性微乎其微因此本标准主要针对猪群中猪瘟疫苗免疫后的抗体检测不用于对个体进行猪瘟抗体
。,,
和牛病毒性腹泻粘膜病抗体的鉴别检测
/。
Ⅱ
GB/T35906—2018
猪瘟抗体间接ELISA检测方法
1范围
本标准规定了猪瘟抗体的间接检测方法
ELISA。
本标准适用于猪瘟抗体检测
。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡标注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
兽医实验室生物安全技术管理规范中华人民共和国农业部公告第号
(302)
3缩略语
下列缩略语适用于本文件
。
猪瘟病毒
CSFV:(ClassicalSwineFeverVirus)
酶联免疫吸附试验
ELISA:(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay)
辣根过氧化物酶
HRP:(HorseradishPeroxidase)
光密度
OD:(OpticalDensity)
4试剂
41猪瘟病毒蛋白见附录
.E2:A。
42标准阳性血清猪瘟疫苗免疫仔猪制备荧光抗体病毒中和试验检测中和抗体效价
.:,≥1∶20480。
43标准阴性血清无母源抗体未免疫猪瘟疫苗的仔猪血清荧光抗体病毒中和试验病毒抗体检测为
.:、,
阴性
。
44酶结合物商品化的标记的抗猪抗体工作浓度参照产品说明书
.:HRPIgG,。
45包被液见附录中的
.:BB.1。
46磷酸盐缓冲液见
.:B.2。
47封闭液见
.:B.3。
48洗涤液见
.1×:B.4。
49稀释液见
.:B.5。
410底物液见
.A:
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