动物生理实验-白细胞计数

动物生理学实验2023/2/42实验一

白细胞的计数思考题注意事项方法步骤材料设备基本原理实验目的【实验目的】了解白细胞计数原理，学习其测定方法。2023/2/43【基本原理】白细胞简介白细胞是血液中非常重要的一类细胞，通常被称为免疫细胞，存在于血液、淋巴及血管、淋巴管以外的组织中。白细胞在人体中担负许多重任，它具有吞噬异物并产生抗体的作用，机体伤病的损伤治愈能力，抗御病原体入侵的能力，对疾病的免疫抵抗力等。人身体有不适时，经常会通过白细胞数量的显著变化而表现出来。因此到医院看病很多情况下需要化验血常规，血常规检查中最多用途的就是白细胞计数和分类。正常值范围：（单位为10个/L）新生儿为（15-20）×109个/L6个月到2岁为（11-12）×109个/L4到14岁为8×109个/L成人为（4.0-10.0）×109个/L临床意义：增多：常见于急性细菌性感染、严重组织损伤、大出血、中毒和白血病等。减少：镇痛药、磺胺类药的服用；病毒感染；免疫系统衰弱；放化疗的影响。2023/2/44实验原理用特制的微量吸管吸取一定量的血液，经稀释后置于血细胞计数板的计数室内，在显微镜下计数一定体积的血细胞数，再将所得的结果换算成每mm2或1L血液内的血细胞数。在医学临床上已使用血细胞分析仪使血细胞计数工作自动化。血细胞计数板血细胞分析仪【方法步骤】2023/2/451、采血和稀释用移液管吸取3.98mL的白细胞稀释液至试管中备用；用酒精棉球消毒采血部位，干燥后，用消毒过的采血针刺破皮肤，使血液流出；第一滴血用干棉球拭去不要，当第二滴血积聚较多时，用微量毛细吸血管准确吸取血液20μL，擦净管外粘附的血液，然后将血液轻轻吹入盛有稀释液的试管底部，并用上清液清洗吸血管2~3次，轻轻摇动试管使血液与稀释液充分混匀。2023/2/462、血细胞计数板的构造计数板为一长方形厚玻璃板，中间有四条平行槽沟，在中间的两条槽沟之间，有一条横槽沟，使其构成两个长方形的平台；平台币整个玻璃板的平面低0.1mm，当放上一块盖玻片后，平台与盖玻片之间的距离为0.1mm；两平台中心部分各有一个计数室，划分为9个大方格，每个大方格面积为1mm2，体积为0.1mm3，四角的大方格又分为16个中方格，用于白细胞计数。计数室只能用自来水和蒸馏水相继冲洗，然后用丝绢轻轻拭净，不能用酒精和乙醚洗涤。洗净后在低倍镜下熟悉计数室的构造。2023/2/47血细胞计数板的计数室放大图【方法步骤】2023/2/483、计数方法将计数室上的盖玻片放妥并置于显微镜上，用洁净的玻璃棒蘸取少量已稀释并混匀的血细胞悬液，在计数室和盖玻片交界处一次性滴入计数室，使之灌满，滴入计数室的血细胞悬液不得过多或过少；静置2~3min待血细胞下沉；在低倍镜下检查白细胞分布是否均匀，之后计数计数室四角的4个大方格中所有的白细胞总数。注意：显微镜的载物台应绝对平置，不能倾斜，以免血细胞一边集中。光线不必过强。【方法步骤】2023/2/494、计算加20μL血液于0.38mL白细胞稀释液中，血液被稀释20倍。共计数4个大方格的白细胞总数，一个大方格的容积,0.1mm3，4个方格的总容积为0.4mm3；白细胞数/mm3=4个大方格的细胞总数÷0.4×20。1L=1×106mm3正常值范围：

成人为（4.0~10.0）×109个/L【注意事项】2023/2/410采血部位消毒后，涂一层凡士林可以使血液成滴便于吸收。吸血时将吸管下端开口放入血液中部，尽量利用毛细管现象使血液自动进入吸管内。血液加入试管后，须充分摇匀，动作要轻，避免出现气泡和破坏血细胞。细胞悬液滴入计数室的液量要适当。过多则混悬液溢出并流入两侧深槽内，使盖玻片浮起，导致计数不准。滴入量过少则不能充满计数室，反复充液可能造成计数室内有气泡，影响计数室体积，此时应洗净计数板，干燥后重做。计数室内细胞分布要均匀。如果发现各大格的白细胞数目相差8个以上，表示血细胞分布不均匀，应重做。所用吸管、试管、计数板等必须十分干净，各种稀释液严防混入杂质或有细菌生长。计数板等用过之后，必须立即洗涤干净。【实验报告书写要求】2023/2/411题目实验目的实验原理材料设备方法步骤实