高中生物苏教版生物技术实践第一章无菌操作技术实践 第1章第1节

第一章第一节一、选择题1．对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是()①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤解析：培养基用高压蒸气灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。答案：A2．有关平板划线操作的叙述不正确的是()A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上的菌种C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者解析：在第二区域内划线时，接种环上的菌种来源于第一次划线的末端。答案：C3．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是()A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．待培养基冷却至50D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50答案：A4．为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D．对于需要长期保存的菌种，可以采用－4解析：对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20答案：D5．发酵工程的第一个重要工作是从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种，获得纯种的方法不包括()A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基B．根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子C．利用高温高压消灭不需要的杂菌D．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素解析：高温高压能杀灭一切微生物，故不能用于从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种。答案：C6．获得纯净培养物的关键是()A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养D．防止外来杂菌的入侵解析：防止杂菌入侵，是获得纯净培养物的关键。在实验室培养微生物，一方面要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方面要保证其他微生物无法混入。答案：D7．下列有关平板划线接种法的操作错误的是()A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连答案：D8．牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法不正确的是()A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用B．在微生物生长温度范围内保持固体状态C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长D．琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强解析：琼脂作为一种理想的凝固剂，是由其本身的性质决定的，琼脂不会被微生物利用且对其无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透明度好。答案：C9．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃A．对比观察培养基有没有被微生物利用B．对比分析培养基上是否生有杂菌C．没必要放入未接种的培养基D．为了下次接种时再使用解析：对照说明培养基是否被杂菌所污染。答案：B10．采用干热灭菌、灼热灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌()A．接种环、吸管、培养基、接种室B．吸管、接种环、培养基、接种箱C．培养基、接种环、吸管、接种箱D．培养皿、吸管、培养基、双手答案：B11．若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起采用下列哪组培养基可将它们分离()A．加食盐的培养基和蛋白胨培养基B．伊红——美蓝培养基和无氮培养基C．斜面培养基和液体培养基D．加青毒素的培养基和液体培养基解析：大肠杆菌的代谢产物可与伊红和美蓝结合，使菌落呈绿色，并带金属光泽，圆褐固氮菌能自行固氮，可用无氮培养基选择。答案：B12．下列与微生物相关的各项叙述中，正确的是()A．无机氮源可以为某些微生物提供能量B．欲获得大肠杆菌原生质体，需用纤维素酶处理细胞壁C．控制大肠杆菌抗药性的基因位于拟核中的DNA上D．流感病毒虽含有简单的细胞器，但必须在宿主细胞内才能合成多种蛋白质解析：无机氮源如NH3，在氧化成HNO3中释放的能量，可以作为硝化细菌的能源。大肠杆菌细胞壁中无纤维素；细菌抗药性基因位于质粒上；病毒无细胞结构。答案：A13．下列关于配制培养基的有关叙述中，正确的是()A．制作固体培养基必须加入琼脂B．发酵工程中一般用液体培养基C．氮源主要是为微生物提供能量D．牛肉膏只为微生物提供氮元素解析：制作固体培养基时必须加入凝固剂。琼脂是常用的凝固剂，但不是唯一的凝固剂，例如明胶也可作为凝固剂；发酵工程一般都是用液体培养基，原因是液体培养基便于调节pH、温度、溶氧等，而且液体培养基还能有利于微生物充分利用营养物质；氮源主要是作为微生物合成蛋白质和核酸的原料；牛肉膏主要为微生物提供糖类、有机氮化合物、磷酸盐和维生素等。答案：B14．关于灭菌和消毒的不正确理解是()A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌的实质是相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用的消毒方法有煮沸消毒法、紫外线法、化学药剂法解析：灭菌与消毒是两个概念。灭菌是指杀灭一定环境中的所有微生物的细胞、芽孢和孢子。根据不同的材料选用不同的灭菌方法，如接种环用火焰烧灼法，培养基用高压蒸汽灭菌法等。消毒是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案：B15．实验室用于分离出与大肠杆菌混杂的酵母菌，培养基的要求是(多选)()A．添加琼脂 B．不加氮源C．添加青霉素 D．pH调节到7．0～8．0答案：AC二、非选择题16．某自来水可能受到生活污水的污染(国家饮用水标准规定每升饮用水中大肠杆菌不超过3个)，可用伊红美蓝培养基检测自来水中大肠杆菌的数量。在此培养基上，大肠杆菌菌落呈深紫色。(1)配制伊红美蓝培养基时，除蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等原料外，还需要____________________。在这些成分中，能为大肠杆菌提供氮源的是________。(2)培养基最常用的灭菌方法是________________。灭菌和消毒的区别在于灭菌杀死了全部的____________________。(3)在上图的系列稀释操作中，依次将1mL液体移入下一个盛有________mL蒸馏水的试管中。稀释的目的是________________________________________________________________。(4)过程a所用的接种方法为____________。通过培养，各培养皿中的紫色菌落如上图所示，则自来水样本中大肠杆菌超标____________万倍。答案：(1)水、无机盐和琼脂(不答琼脂不给分)蛋白胨(2)高压蒸汽灭菌法微生物及其芽孢、孢子(3)9将微生物(大肠杆菌)稀释成单个细胞，从而能在培养基上形成单个菌落(4)(稀释)涂布平板法100017．为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏—蛋白胨—琼脂培养基。(1)培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤是：计算→称量→________→________→倒平板。(2)称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用________挑取，放在________上称量。由于牛肉膏和蛋白胨________，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。(3)在牛肉膏—蛋白胨—琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有________________等大肠杆菌生长所需的营养要素。(4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法如______________和________________等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个________，从而获得纯菌株。解析：考查微生物纯化培养的基础知识。配制牛肉膏蛋白胨培养基的基本步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。称量时，可用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量，称量时动作要迅速。牛肉膏蛋白胨培养基中含有大肠杆菌所需要的碳源、氮源、无机盐、水等营养要素，所以常用来培养大肠杆菌。微生物纯化培养的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，可使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株。答案：(1)溶化灭菌(2)玻璃棒称量纸容易吸潮(3)碳源、氮源、无机盐、水(4)平板划线法稀释涂布平板法菌落18．为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验(实验过程符合无菌操作要求)：①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。请分析上述实验过程并回答下列问题：(1)培养基中牛肉膏的作用主要是为微生物生长提供____________________等营养物质；培养基灭菌常用的方法是______________________________________。(2)如何证明所用培养基已经彻底灭菌？________________________________。(3)本实验样品接种时最好采用______________________法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的________。(4)请指出本实验设计中的一个明显的错误，并加以改正。________________________________。解析：该实验的目的是检验某种中药牙膏是否有抑菌功效。从实验的操作中可以看出，该实验缺乏对照，应该将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏作为对照，其他操作相同。(1)、(2)牛肉膏既是碳源也是氮源，还能为细菌生长提供维生素。