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文档简介
尿液葡萄糖酮体及其他化学检查第一页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
生理情况下,原尿中的葡萄糖可被肾小管和集合管全部被重吸收进入血液。所以正常人尿液中几乎不含或仅含微量葡萄糖,一般尿糖定性试验为阴性。当机体发生病变,尿液中出现葡萄糖,葡萄糖定性试验为阳性的尿液称为糖尿(glucosuria)。糖尿定义第二页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
糖尿形成的原因血糖浓度肾血流量肾糖阈第三页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
尿液葡萄糖检查方法葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法班氏还原法薄层层析法邻甲苯胺法第四页,共四十页,2022年,8月28日
葡萄糖+H2O+O2
葡萄糖氧化酶葡萄糖酸内酯+H2O2H2O2+色原剂
过氧化物酶有色物质葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法一、尿液葡萄糖检查
第五页,共四十页,2022年,8月28日葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法一、尿液葡萄糖检查
检测特异性强、灵敏度高、简便快速氧化还原反应,易受尿液中的氧化剂还原剂的影响第六页,共四十页,2022年,8月28日班氏还原法一、尿液葡萄糖检查
在高热和强碱溶液中,葡萄糖或者其他还原性糖,能将溶液中蓝色的硫酸铜还原为氢氧化亚铜沉淀,进而形成红色的氧化亚铜沉淀。第七页,共四十页,2022年,8月28日班氏还原法一、尿液葡萄糖检查
许多单糖和非糖还原物质都能反应,测定的是尿中总还原物。氧化还原反应,易受尿液中的氧化剂还原剂的影响。第八页,共四十页,2022年,8月28日化学物质对尿糖测定的影响成分葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法班氏还原法葡萄糖果糖尿黑酸VitC对苯甲酸过氧化氢第九页,共四十页,2022年,8月28日化学物质对尿糖测定的影响成分葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法班氏还原法葡萄糖阳性阳性果糖无反应阳性尿黑酸无反应阳性VitC可能延迟颜色反应弱阳性对苯甲酸无反应阳性过氧化氢假阳性可掩蔽阳性结果第十页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
检测结果分析葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法阴性,班氏还原法阳性。试纸质量问题;尿液中含有较高浓度的还原性物质;存在少量葡萄糖伴有高浓度的还原物质。第十一页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
检测结果分析葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法阳性,班氏还原法阴性。尿液标本被过氧化物或者次氯酸盐污染。第十二页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
邻甲苯胺法葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热,葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺,后者脱水生成席夫碱,再经结构重排,生成有色化合物,在630nm有吸收峰。与尿液中的所有糖类发生反应。第十三页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
薄层层析法在层析法中有固定相和流动相,两相间可做相对流动。当样品中各种糖随流动相通过固定相时,即反复发生吸附、脱附、解析或其他亲和作用,由于各种糖在上述性能上的差异而产生移动速度的差异,而相互分离。第十四页,共四十页,2022年,8月28日第十五页,共四十页,2022年,8月28日六种糖的Rf近似平均值糖Rf近似平均值糖Rf近似平均值乳糖0.22葡萄糖0.41麦芽糖0.28果糖0.46半乳糖0.36木糖0.52第十六页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
其他糖检验方法果糖与溶于强酸的间苯二酚加热后显红色反应。半乳糖与硝酸共热,可被氧化为白色的粘酸结晶。戊糖与盐酸共沸后生成糠醛,再与二羟基甲苯作用形成绿色化合物。第十七页,共四十页,2022年,8月28日一、尿液葡萄糖检查
临床意义血糖增高性糖尿血糖正常性糖尿暂时性糖尿其他糖尿第十八页,共四十页,2022年,8月28日
二、尿液酮体检查酮体是脂肪酸在肝内氧化不完全而形成的一类中间产物的统称,包含乙酰乙酸、-羟丁酸、丙酮三种成分。生理意义:肝脏向肝外(肌肉/大脑)组织输出脂肪酸能源的有效形式。病理意义:在糖尿病或者严重饥饿时,肝生酮大于肝外利用,发生酮症酸中毒。第十九页,共四十页,2022年,8月28日
二、尿液酮体检查检测方法亚硝基铁氰化钠法:乙酰乙酸和丙酮与亚硝基铁氰化钠反应生成紫色化合物。Gerhardt法:高铁离子与乙酰乙酸的烯醇式基团发生螯合,形成酒红色的乙酰乙酸铁复合物。第二十页,共四十页,2022年,8月28日第二十一页,共四十页,2022年,8月28日检测方法
二、尿液酮体检查第二十二页,共四十页,2022年,8月28日
二、尿液酮体检查临床意义不能有效利用碳水化合物碳水化合物摄入不足碳水化合物丢失其他第二十三页,共四十页,2022年,8月28日三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查人绒毛膜促性腺激素(Humanchorionicgonadotrophin,hCG)是胎盘合体滋养层细胞产生的一种具有促进性腺发育的糖蛋白类激素。hCG分子量约为4.7万,由α、β两个肽链组成。单个亚基(肽链)不具有生物学活性,当其连接成完整的化合物时才具有活性。第二十四页,共四十页,2022年,8月28日三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查hCGα亚基的氨基酸数量及其排列顺序与卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的亚基几乎相同。临床上均采用高效的抗hCGβ亚基单克隆抗体进行特异性hCG检查。第二十五页,共四十页,2022年,8月28日受孕后血清HCG变化曲线第二十六页,共四十页,2022年,8月28日生理作用三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查有利于受精卵的生长;促进卵泡成熟、促甲状腺及睾丸间质细胞的活性;与黄体生成激素相似的生物活性;抑制淋巴细胞免疫性,保护滋养层不受母体的免疫攻击。第二十七页,共四十页,2022年,8月28日检测方法三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查ELISA胶体金实验电化学发光实验放射免疫分析胶乳凝集抑制实验血凝抑制实验检孕卡实验……第二十八页,共四十页,2022年,8月28日第二十九页,共四十页,2022年,8月28日检测方法灵敏度(ng/L)实验条件应用价值ELISA4操作简便定量,灵敏度高,筛选实验胶体金0.8~2.0操作简便、快速半定量,灵敏度高,广泛使用检孕卡200操作简便、快速一般早孕诊断,灵敏度低胶乳凝集抑制200操作简便半定量,灵敏度低,已少用血凝抑制200操作简便半定量,灵敏度低,已少用放射免疫分析0.4条件要求高,操作复杂定量,灵敏度高,有污染尿液hCG各种检测方法比较第三十页,共四十页,2022年,8月28日临床意义三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查早期妊娠诊断异位妊娠诊断流产诊断和监测妊娠滋养细胞疾病诊断肿瘤标记物第三十一页,共四十页,2022年,8月28日四、尿液胆色素检查尿中胆色素包括胆红素(bilirubin)、尿胆原(urobilinogen)及尿胆素(urobilin),俗称尿三胆。由于送检的多为新鲜尿,尿胆原尚未氧化成尿胆素,故多查前两者,俗称尿二胆。第三十二页,共四十页,2022年,8月28日第三十三页,共四十页,2022年,8月28日四、尿液胆色素检查胆红素是红细胞破坏后的代谢产生。可分为未经肝处理的未结合的胆红素和经肝与葡萄糖醛酸结合形成的结合胆红素。未结合胆红素不溶于水,在血中与蛋白质结合不能通过肾小球滤膜。结合胆红素分子量小,溶解度高,可通过肾小球滤膜,由尿中排出。第三十四页,共四十页,2022年,8月28日胆红素检验方法重氮法:在强酸介质中,结合胆红素与重氮盐发生偶联反应呈红色。Harrison法:胆红素被硫酸钡吸附而浓缩,与氯化铁反应,被氧化为胆青素、胆绿素和胆黄素复合物。Smith碘环法:胆红素被碘氧化成胆绿素,在尿液与试剂接触界面呈绿色环。四、尿液胆色素检查第三十五页,共四十页,2022年,8月28日尿胆原检验方法四、尿液胆色素检查Ehrlich法:尿胆原与ρ-甲氨基苯重氮化硼酸盐发生偶联反应。改良Ehrlich法:在酸性溶液中,尿胆原与对二甲氨基苯甲醛反应成樱红色。Schleisinger法:在无胆红素尿液中,加入碘液,氧化尿胆原成尿胆素,与锌离子作用,形成带绿色荧光复合物。第三十六页,共四十页,2022年,8月28日第三十七页,共四十页,2022年,8月28日五、尿液亚硝酸盐的检测尿路感染时,一些感染病原菌可将尿液中的硝酸盐还原为亚硝酸盐。体液中有许多细胞能利用精氨酸在NO合成酶的作用下生成NO,在体内有氧的条件下,极易被氧化成为硝酸盐和亚硝酸盐,经过血液从尿中排出。第三十八页,共四十页,2022年,8月28日五、尿液亚硝酸盐的检测检测原理:亚硝酸盐还原法;临床意义:作为尿路感染的快速筛检;尿液NIT阳性的三个
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