GB/T 26436-2010禽白血病诊断技术

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T26436—2010

禽白血病诊断技术

Diagnostictechniquesforavianleukosis

2011-01-14发布2011-07-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T26436—2010

前言

本标准的附录附录附录附录附录附录为规范性附录附录附录为资料性

A、B、C、D、E、F,G、H

附录

。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口

(SC/TC181)。

本标准起草单位山东农业大学中华人民共和国珠海出入境检验检疫局华南农业大学

:、、。

本标准主要起草人崔治中孙淑红赵鹏杨素沙才华廖明曹伟胜

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T26436—2010

引言

禽白血病病毒为反转录病毒科的α反转录病毒属可诱发鸡不同组

(avianleukosisviruses;ALV),

织的良性和恶性肿瘤是鸡群中除马立克氏病病毒和禽网状内皮增生症病毒外的又一

,(MDV)(REV)

类重要的致肿瘤病毒

。

禽白血病是一类由相关的反转录病毒引起鸡的不同组织良性和恶性肿瘤病的总称随发生

ALV。

肿瘤的主要细胞成分不同分别称之为不同名称的肿瘤可分为个亚群其中仅亚

,。ALVA~J10,A

群亚群亚群亚群亚群亚群病毒与鸡相关亚群亚群亚群亚群亚群属外

、B、C、D、E、J。A、B、C、D、J

源性与禽白血病的不同类型肿瘤发病相关亚群病毒基因组可完整地整合进感染鸡的染色体

ALV,。E

基因组并稳定地遗传下去也可从中再复制出传染性病毒颗粒因而称之为内源性病毒此外在一些

,,。,

鸡的染色体的不同部位还可能带有一些的基因组片段亚群的致病性很低或没有致病

,ALV。EALV

性不属于净化对象但很多鸡群中包括一些无特定病原鸡群都可能带有亚群内源性它

,,(SPF)EALV,

的感染不会给鸡群带来不良影响但会干扰检测

,。

目前该病对我国养鸡业的危害很大在国际种禽贸易中外源性白血病病毒感染是最主要的检测

,。,

对象之一

。

Ⅱ

GB/T26436—2010

禽白血病诊断技术

1范围

本标准规定了病料中特异血清抗体和外源性的检测方法

ALVALV。

本标准适用于判断鸡群或病料中是否有外源性感染

ALV。

2临床症状和病理变化

主要引起感染鸡在性成熟前后发生肿瘤死亡感染率和发病死亡率高低不等死亡率最高可

ALV,,

达一些鸡感染后虽不发生肿瘤但可造成产蛋性能下降甚至免疫抑制

20%。,。

淋巴样白血病是最为常见的经典型白血病肿瘤肿瘤可见于肝脾法氏囊肾肺性腺心骨髓等

,、、、、、、、

器官组织肿瘤可表现为较大的结节状块状或米粒状或弥漫性分布细小结节肿瘤结节的大小和数

,(),。

量差异很大表面平滑切开后呈灰白色至奶酪色但很少有坏死区在成红细胞性白血病成髓性细胞

,,,。、

白血病髓细胞白血病中多使肝脾肾呈弥漫性增大亚群感染主要诱发髓细胞样肿瘤它最

、,、、。JALV,

常见的特征性变化主要为肝脾肿大或布满无数的针尖针头大小的白色增生性肿瘤结节在一些病例

、。

中还可能在胸骨和肋骨表面出现肿瘤结节

,。

单纯苏木精伊红染色染色的病理组织切片观察在诊断上有一定参考意义在表现为淋巴

(H.E)。

样细胞肿瘤结节时要注意与马立克氏病病毒和禽网状内皮增生症病毒诱发的肿瘤相

,(MDV)(REV)

区别在表现为髓样细胞瘤时既要与诱发的类似肿瘤细胞相区别也要与嗜中性白细胞浸润性

;,REV,

炎症相区别如鸡戊型肝炎病毒感染引起的肝局部炎症最终的鉴别诊断以肿瘤组织中的病毒抗原检

,。

测或病毒分离鉴定为最可靠依据

。

3病毒的分离培养检测和鉴定

、

31试剂和仪器

.

311试剂

..

液体培养基胰酶磷酸盐缓冲液抽提缓冲液

DMEM(pH7.2)、0.25%、(0.01mol/LPBS,pH7.2)、、

青霉素万链霉素万抗单抗抗单因子鸡血清异硫氰酸荧光素

(10U/mL)、(10U/mL)、ALV、ALV、

标记的山羊抗小鼠抗体抗原酶联免疫吸附试验检测试剂盒聚合酶链

(FITC)IgG、ALV-p27(ELISA)、

反应试剂试剂生理盐水氯化钠无水乙醇分析纯丙酮分析纯甘油分

(PCR)、RT-PCR、(0.9%)、()、()、(

析纯酒精碘酒细胞生长液含有胎牛血清或小牛血清的液体培养基细胞维持液

)、75%、、(5%DMEM)、

含有胎牛血清或小牛血清的液体培养基大肠杆菌蛋白酶冷乙醇乙酸

(1%DMEM)、(TG1)、K、70%、

钠分析纯三氯甲烷分析纯异戊醇分析纯异丙醇分析纯加样缓冲液琼