克氏原螯虾白斑综合征诊断和防控技术规程

11ICS5.150B52四川DB51省地方标准DB/TXXXX-2022克氏原螯虾白斑综合征诊断和防控技术规程(终审稿)2022-XX-XX发布2022-XX-XX实施四川省市场监督管理局发布DB1/TXXXX-2022I前言 I 2规范性引用文件 13术语与定义 14试剂和材料 15设备和器械 26流行情况及临床检查 27实验室样品采集 38DNA提取 39DNA提取质量及体系监控 4 前言出。丽、耿毅、陈德芳、欧阳萍1克氏原螯虾白斑综合征诊断和防控技术规程本文件规定了由白斑综合征病毒(Whitespotsyndromevirus，WSSV)引起的克氏原螯虾(Procambarusclarkii)白斑综合征的临床症状、病原鉴定方法与结斑综合征的流行特征，同时给出了防控方法。本标准适用于克氏原螯虾白斑综合征的诊断以及四川稻田和池塘养殖克氏2规范性引用文件修改单)适用于本文件。GBT分析实验室用水规格和试验方法SCT物检疫实验技术规范NY-2002无公害食品水产品中渔药残留限量NY-2002无公害食品渔用药物使用准则3术语与定义综合征4试剂和材料.1试剂检验中所需试剂的配制按照GB/T28630和SC/T7014的规定执行，TaqDB1/TXXXX-202224.2水PCA4.3引物bpp设备和器械R流行情况及临床检查流行情况殖中主要病害之一。临床症状剖检量白色斑点。其余器官如肝胰腺、鳃等无明显变化。DB1/TXXXX-20223实验室样品采集DNA提取样品准备8.1.1活体或冰冻的仔虾及幼虾个体样品(去虾眼)约0.1g；活体或冰冻的于新配制的75%酒精中5min，无菌水8.2.1加入500µL抽提缓冲液(A.2)，震荡混匀，37℃温育1h；L心管，加入等体积酚-三氯甲烷-异戊醇(A.4)，颠8.3微量分光光度计测定核酸浓度和纯度4L品，酸浓度和纯度的测定；DNAAA80应在1.7~1.9之间，若比值较高说明9DNA提取质量及体系监控CRL积的双蒸水代替DNA模板。DB1/TXXXX-20225TAE琼脂糖颗粒进入溶液。，以减少水份蒸发;lDNA含量偏低，则可依上述比例增加上样量，但总体积不可超过样品槽容量。nPCR序列比对DB1/TXXXX-2022611.3.337℃水浴将冻结的凝胶融化后，在漩涡震荡仪上震荡1min~2min；LA置-20℃保存，待测；12.3被检测样品：第一步PCR后在1447bp处有条带或第二步PCR后在为克氏原螯虾白斑综合征：7B苗种规格宜为150尾/kg~200尾/kg。苗种放养前，应用1%~3%氯化钠对苗种进行浸泡，浸泡时间为7min~10min。剂防控续投喂5天~7天，剂量参照商品药物的说明书执行。每年4~7月期间，每隔10天~15天应使用1次微生物制剂(如:光合菌、药制剂8DB1/TXXXX-20229性附录)试剂配方A.1焦炭酸二乙酯(DEPC)处理水A.2抽提缓冲液A.3蛋白酶K(20mg/mL)将蛋白酶K溶解于双蒸水中，至终浓度20mg/mL，分装入小管，置-20℃A.4酚-三氯甲烷异戊醇(25:24:1)A.510mol/L乙酸铵mA.670%乙醇TAE在400mL双蒸水中溶解121gTris碱，加入28.55mL冰乙酸和50mlEA.8TE缓冲液(pH8.0)将0.121gT