毛细血管电泳法在药物分析中的应用

毛细血管电泳法在药物分析中的应用摘要：高技毛细管电泳是近年来在分析化学和生物医药学中应用广泛的一门分离分析技术。从高效毛细管电泳的类型、特点、原理应临床样品分析等方面•综速了谊项技术的应,glgt/a,介绍了在不同成份分析中的优势度前哥．在临床疾藕诊断治疗方面的价值。关键词：高效毛细血管电泳：药物分析：蛋白质分析JournalofZhejiangUniversitySchoolofBiologicalandChemicalEngineeringHangzhou310023Abstract:Capillaryelectrophoresisisahigh-techinrecentyearsinanalyticalchemistryandbio-medicineiswidelyusedinaseparateanalysis.Fromthehighperformancecapillaryelectrophoresistypes,characteristics,principlesofclinicalsamplesshouldbeso.Fully-speedtechnology,theYitermshouldbe,glgt/a,describesthedifferentcomponentsoftheanalysisofdominanceintheformerColumbia.Lotusintheclinicaldiagnosisandtreatmentofdiseasesofthevalue.Keywords:HighPerformanceCapillaryElectrophoresis:PharmaceuticalAnalysis:Proteinanalysis1引言高效毛细管电泳(HighPerformanceCapillaryElectrophoresis,HPCE)是近年来发展起来的一种分离,分析技术,它是凝胶电涞技术的发展,是高效液相色谱分析的朴竞。谈技术可分析的成份小至有机离子,大至生物大分子如蛋白质,棱硪等。可用于分析多种体渍样本如血清或血浆，屎，脑脊液及唾j葭等，HPCE分析高效、快速.微量。。根据其分离样本的原理设计不同主要分为吼下几种类型：①毛细管区带电濠；毛细管等速电泳；毛妇管胺建电动色谱｛毛细蕾凝胶电泳(Capillarygelelectrophoresis,CGE)；毛细蕾等电聚焦(Capillary；soejectriefocusing,ClEF)目前CZE和MECC用得较多，本文以这两种方法为倒来说明HPCE的厚理。1技术介绍1．1基本原理毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPEC)，指以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之问淌度和分配行为上的差异而实现的一类液相分离技术。在电解质溶液中，带电粒子在电场作用下，以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现象叫电泳。cE所用的石英毛细管柱，在pH〉3情况下，其内表面带负电，和溶液接触时形成了一双电层。在高电压作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体地朝负极方向移动的现象叫电渗。粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和。正离子的运动方向和电渗流一致，故最先流出；中性粒子的电泳流速度为“零”，故其迁移速度相当于电渗流速度；负离子的运动方向和电渗流方向相反，但因电渗流速度一般都太于电泳流速度，故它将在中性粒子之后流出，从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。1．2分离模式CE有8种分离模式，分别为：毛细管区带电泳(CZE)、毛细管凝胶电泳(cGE)、胶束电动毛细管色谱(MECC,MEKC)、毛细管等电聚焦(CIEF),毛细管等速电泳(CITP)、毛细管电渗色谱(CEC)、非水毛细管电泳(NACE)、胶束电动毛细管色谱。2HPCE在药物分析中的应用药物是指能影响机体生理、生化和病理过程，用以预防、诊断、治疗疾病和计划生育的化学物质，在人们的日常生活中是不可或缺的，其质量的高低直接关系到人们的健康和生命安全，所以需要一个全面、合理、科学、安全有效的质量监测方法来给大家提供一个安全的用药环境。近年来国内外大量的科学家投入到这项工作中，药物分析分离的研究工作十分活跃。中药的成分非常复杂，一般含有糖类、油脂、维生素、蛋白质、有机酸、氨基酸、无机盐、鞣质、生物碱、挥发油等等。目前，主要分析生物碱类、苷类、有机酸类、香豆素类、酚酸类成分。2．1生物碱类生物碱为一类含氮的有机化合物，是中草药中一类分布较广的化学成分，存在于自然界(一般指植物，但有的也存在于动物)。已知的生物碱种类已超过3000种，由于其的碱性，即存在一N—基，可调节溶液的pH值，使其带有一定的正电荷，可采用毛细管区带电泳(CZE)模式分析。有时可以使用不同的缓冲溶液及不同的pH值或加入适当的有机改性剂，使结构相近的同类生物碱达到分离的目的。王峻梅等以lmm删｛Ac+2nlmol/LNI"LAc+10inmo1/LB—CD+2lllmol/LSD缓冲液为电泳介质，分离电压14.OKV,用高频电导法实现了对千金藤属植物粉防己中粉防己碱和去甲粉防己碱两种生物碱的测定。陈康等对10个不同产地麻黄样品中麻黄碱和伪麻黄碱进行定量分析，得出结论为不同产地的麻黄生物碱含量各相同，且相互间具有良好的精密度和线性关系。郑一宁等I习摘要采用高技毛细管电泳电导检测法分离麻黄碱和伪麻黄碱。初步探讨了分离机理，建立了检测方法。以柠檬酸一柠檬酸钠为缓冲体系，铜盐为络合剂，在pH值为4.5、电压13.5kV的条件下，盐酸麻黄碱和伪麻黄碱得到了较好的分离，加人适量乙醇可改善峰形和分离效果。用该法以水扬酰胺为内标，对古盐酸麻黄碱和伪麻黄碱的实际样品进行检测，回收率9713%—101.1%。2．2有机酸类有机酸成分解离后带负电荷，可以CZE模式分析，但在中性成分后出峰，分析时间较长。采用高效CZE模式，样品和标准品在20min内得到基线分离。陈帆等对药用海藻羊栖菜中的氨基酸进行分离测定，用高离子强度Tris硼酸缓冲溶液在优化条件下对18种常用的氨基酸进行分离可得到l7个峰（其中亮氨酸和异亮氨酸为1个色谱峰）°Ca。等以CZE—E法分析了满山红中原儿茶酸、丁香酸、香草酸等有机酸的含量。2．3苷类苷类又称配糖体。是糖或糖的衍生物与另一类非糖物质通过糖的端基碳原子连接而成的一类化合物。刘峻等采用胶束电动毛细管电泳法对不同来源得黄花倒水莲提取物中皂昔的含量进行了测定，在内可以完成样品中皂昔的含量测定。陈缵光等采用毛细管电泳安培法测定鸡矢藤中熊果苷的含量。CaoYau将毛细管电泳一电化学法检测器成功成应用于中药大麻的分析中，测定大麻中种活性成分和种碳水化合物。3前景高效毛细管电泳HPCE已应用到分析、分离的各个方面，且具有高灵敏度、高速、样品耗用量少、重现性好、自动化等优点，随着商品化仪器的不断改进，必将在分析领域得到更为广泛的应用。展望：HPCE技术当八十年代以来得到迅速发展，在分析化学和生物医药学中已有广泛应用t应用最多的是药物分析，特剐在混合组份中药分析分离中表现出其独特的优势，使在临床体寝1标本的测定方面一直处在研究和探索阶段，主要表现在测定标丰的范围不断扩大，测定分析条件的不断完善。预计随HPCE自动分析仪的推广和应用，HPCE分析技术畚遵渐为临床实验室的常规测试所接受，以改善现有的测定技术。参考文献罗国安，王义明．毛细管电泳的原理及应用．色谱。1995，13(4)：254．LiuYM，ShenSJ．J．Chromatogr．A，1993，634；329-333王峻梅．毛细管电泳高频电导法测