第九节其他病原性细菌

第九节其他病原性细菌一、炭疽芽胞杆菌

（Bacillusanthracis，B.anthraci)炭疽芽胞杆菌俗称炭疽杆菌，是引起人类、各种家畜和野生动物炭疽（Anthrax）的病原。

炭疽是人畜共患的急性传染病，主要是牛、羊等食草类动物的传染病，人可通过接触或摄食病畜及畜产品而感染。皮肤炭疽、肠炭疽、肺炭疽等，并发败血症，甚至炭疽性脑膜炎2形态及染色革兰氏阳性大杆菌，菌体平直，两端平截，无鞭毛，不运动。形成芽孢、荚膜。动物组织和血液:单在或短链，经培养后形成长链，呈竹节状。在组织中或含血液的培养基中可形成荚膜。人工培养物:形成长链，形成芽胞，一般不形成荚膜芽孢在有氧条件下形成，25～30℃，椭圆形，位于菌体中央，小于菌体，不膨出菌体。在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中，都易形成芽胞。在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸体严禁解剖培养特性需氧菌或兼性厌氧，最适生长温度30℃-37℃，营养要求不高，普通培养基中即能生长良好。干燥、边缘不整的粗糙型菌落，低倍镜下边缘呈“卷发状”普通肉汤：37℃，24h培养，上层液透明，形成白色絮状沉淀普通琼脂：大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、边缘不整齐 ，火焰状菌落。低倍镜观察菌落边缘呈卷发状，不溶血。

强毒菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥；无毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面较为光滑湿润、边缘比较整齐的光滑型菌落。

强毒株菌落2.在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。3.液体培养基中呈絮状沉淀生长4.明胶穿刺培养，37℃18～24h表面液化成漏斗状，由于细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。5.在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应，与其它需氧芽孢杆菌区别。

串珠反应：在含青霉素0.5U/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串。生化特性分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖，有些菌能迟缓发酵甘油和水杨素产酸不产气水解淀粉、还原硝酸盐不产生吲哚和硫化氢、不利用柠檬酸盐、不分解尿素在牛乳中生长2～4天牛乳凝固→缓慢胨化触酶（+）、卵磷脂酶弱（+）抗原结构

（一）结构抗原

1.荚膜抗原：多肽，仅见于有毒菌株，与毒力和抗吞噬有关，无保护作用不稳定，反应性特异—可用于血清学鉴定

2.菌体抗原：细胞壁及菌体内的半抗原（多糖），与细菌毒力无关。性质稳定，经加热煮沸甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏。

在病畜皮毛或腐败脏器中经长时间煮沸仍能与特异性抗体发生反应形成环状沉淀，称为Ascoli反应。

3.芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮质组成，具有免疫原性。具有免疫原性和血清学诊断价值。（二）保护性抗原（PA）

炭疽毒素保护性抗原（PA)、致死因子（LF）、水肿因子（EF）三个组分，单独皆无致病性，与PA结合才显示出致病性保护性抗原（PA）是炭疽毒素的组成成分之一，具有免疫原性。免疫保护抵抗力繁殖体的抵抗力不强60℃30-60min即可杀死常用消毒剂均能将其杀死青霉素等多种抗生素高度敏感芽胞的抵抗力特别强干燥背光处可存活40年以上煮沸1h或干热140℃3h可杀灭芽胞对碘特别敏感0.04％-10min耐药性本菌对青霉素、氨基糖甙类、四环素类、环丙沙星敏感致病性本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽易感性最强—牛、绵羊、鹿等其次—马、驼、猪、山羊等次之犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力禽类一般不感染感染途径：消化道、呼吸道、皮肤创伤或通过吸血昆虫传播食草动物炭疽常表现为急性败血症猪炭疽多表现为慢性的咽部局限感染犬、猫和食肉兽则多表现为肠炭疽感染表现

人类肠炭疽、肺炭疽或皮肤炭疽实验动物：小鼠、豚鼠、家兔易感荚膜多肽：荚膜抗吞噬，抑制抗体的作用，使易于扩散，引起

感染乃至败血症。动物无保护作用，可用于细菌鉴定致病物质：炭疽毒素：水肿毒素(edemafactor,EF)致死毒素(lethalfactor,LF)保护性抗原（PA）三种成分单独无生物学活性（毒性），三种相结合时，表现毒性作用增强微血管的通透性，改变血液循环，损害肾功能，干扰糖代谢导致动物死亡具有免疫原性，有保护作用16免疫性患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。菌苗有第二号炭疽芽胞苗无毒炭疽芽胞苗抗炭疽血清保护性抗原炭疽毒素刺激机体产生的抗体抗感染作用标本采集病人血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等死亡病畜标本：死亡牲畜严禁宰杀污染物品：皮革、兽毛、土壤等标本处理：无杂菌污染标本直接接种，有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种微生物学诊断

1.细菌学检查（1）涂片镜检：碱性美蓝瑞氏染色姬姆萨染色有荚膜竹节状大杆菌组织病料碱性美蓝革兰氏染色

具有芽胞的链杆菌培养物（2）分离培养：普通琼脂血液琼脂碳酸氢钠琼脂观察生长特性生物学特性检测被检材料强度株形成荚膜动物机体内含碳酸氢钠或血清培养基（在CO2条件下培养）炭疽杆菌与γ噬菌体具有高度的特异性裂解炭疽杆菌形成噬菌斑被检菌含青霉素培养基形成串珠生长抑制穿刺接种于明胶培养基18-20℃培养4-7d呈倒置松树状*荚膜检查：*噬菌体裂解试验：*串珠试验：*明胶穿刺试验：细菌噬菌斑细菌噬菌体裂解试验串珠试验串珠细菌2.动物实验：在内脏、血液中有大量带荚膜的竹节状菌体剖检变化：注射部位呈胶样水肿脾脏肿大3.血清学检查：热沉淀反应（Ascoli氏沉淀反应）间接血凝试验串珠荧光抗体检查被检抗原炭疽芽孢串珠试验与荧光抗体法结合病料(1:5乳悬液)或培养物皮下接种：小鼠0.1ml兔0.2-0.3ml败血症而死亡炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少

预防重点应放在控制家畜的感染和牧场的污染上。病畜必须严格隔离或处死深埋，死畜严禁剥皮或煮食，必须焚毁或深埋2m以下。对疫区家畜应进行预防接种。特异性预防用炭疽减毒活疫苗进行皮上划痕接种，免疫力可维持1年。治疗以青霉素为首选，也可选用其他广谱抗生素。免疫防治二、布鲁菌属（Brucella）布鲁菌属是一类革兰染色阴性短小杆菌。有6个生物种(牛布鲁菌，羊布鲁菌，猪布鲁菌，犬布鲁菌，绵羊附睾布鲁菌，沙林鼠布鲁菌)、19个生物型，使人致病的是前四个生物种，因最早由美国医师DavidBruce首先分离出，故得名。哺乳动物中牛、羊、猪等家畜最易感染，常引起母畜流产。人类与病畜接触或食用其染菌肉类、乳制品等可引起感染，称为布鲁菌病。我国流行的主要是羊布鲁菌(B.melitensis)、牛布鲁菌(B.abortus)和猪布鲁菌(B.suis)，尤以羊布鲁菌最常见。马尔他布氏杆菌(羊型）：生物型1-3流产布氏杆菌（牛型）：生物型1-9猪布氏杆菌：生物型1-5绵羊布氏杆菌：沙林鼠布氏杆菌：犬布氏杆菌：三、种和生物型该属包括6个种20个生物型生物特性革兰阴性短小球杆菌，两端钝园，偶见两极浓染无鞭毛，无芽胞，光滑型菌株有荚膜。革兰染色经常着色不佳，吉姆染色呈紫色。马尔他布鲁菌革兰染色细菌专性需氧初次分离培养时需5%~10%CO2。营养要求较高生长缓慢（5~7天）最适生长温度为35℃~37℃最适pH为6.6~6.8。培养特性:马尔他布鲁菌血平板菌落在血琼脂平板或肝浸液琼脂平板上，37℃培养48h长出透明、无色、光滑型(S型)小菌落。血琼脂平板上无溶血现象。能分解尿素和产生H2S。根据产生H2S的多少和在含碱性染料培养基中的生长情况，可鉴别三种布鲁菌

布鲁氏菌的生化特性菌种触酶氧化酶

糖分解精氨酸脱羧硝酸盐还原尿素酶H2S产生染料的耐受葡萄糖半乳糖阿拉伯糖硫廑

(40μg)复红

(20μg)羊布鲁菌+++---+V-++牛布鲁菌+++++-+++-+猪布鲁菌++++++++(-)+-森林鼠布鲁菌+-+++-+++--绵羊布鲁菌+--------+(-)犬布鲁菌+++--+++-+-注：V不定;(-)大部分菌株阴性抗原性A抗原与M抗原：*抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上*光滑型布氏杆菌具有A和M两种表面抗原*三种布鲁菌所含的A抗原与M抗原量在比例上不同。用A血清与M血清进行凝集试验对三种布鲁菌有鉴别作用。—包括A、M及R抗原（表面抗原）属外抗原属内抗原羊—1:20牛—20:1猪—2:1A:M*细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物R抗原：*非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。抵抗力本菌对外界环境的抵抗力较强在污染的土壤和水中可存活1-4个月皮毛2-4个月，乳、肉食品中约2个月，粪便中120d咸肉中40日，羊毛中1.5-4月对日光、湿热、常用消毒剂的抵抗力不强，对常用的广谱抗生素较敏感。日光照射10~20min即死亡。湿热60℃-30min或70℃-5min即杀死、煮沸立即死亡在普通浓度的来苏溶液中数分钟即被杀死。致病性致病因素：内毒素是主要的致病物质荚膜侵袭酶（透明质酸酶和过氧化氢酶等）布鲁菌引起的Ⅳ型超敏反应也能参与致病（感染布鲁菌后，患者布鲁菌素皮肤试验常呈阳性。因此认为布鲁菌的致病与迟发型超敏反应有关）所致疾病动物感染*一般无明显临床症状，多属隐性传染*病变多局限于生殖器官流产、睾丸炎、乳腺炎、子宫炎、关节炎等人类感染主要通过接触病畜及其分泌物或被污染的畜产品，经皮肤粘膜和消化道、呼吸道等多种途径受染，引起布鲁菌病。易感人群：发病以青壮年为主，从事兽医、皮毛加工、屠宰的工人发病率较高潜伏期：5~21日，亦可高达数月症状：长期发热，多汗，关节疼痛及全身乏力，疼痛人感染病理：布鲁菌侵入机体后，即被吞噬细胞吞噬，因其荚膜能抵抗吞噬细胞的裂解而成为胞内寄生菌，并经淋巴管到达局部淋巴结，生长繁殖形成感染灶。当布鲁菌在淋巴结中繁殖到一定数量后，突破淋巴结屏障侵入血流，出现发热等菌血症症状。此后，布鲁菌随血流侵入肝、脾、淋巴结及骨髓等处，形成新的感染灶。血液中的布鲁菌逐渐消失，体温也逐渐正常。细菌在新感染灶内繁殖到一定数量时，再度入血，又出现菌血症而致体温升高。如此反复使患者呈现不规则的波浪状热型，临床上称为波浪热。因布鲁菌为胞内寄生菌，抗菌药物及抗体等均不易进入细胞内，因此，本病较难根治，易转为慢性，反复发作。布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄）布氏杆菌病流产胎儿（7月龄），皮下水肿母猪子宫内死胎布氏杆菌病流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死免疫性机体对布鲁菌的免疫，主要是巨噬细胞的杀菌作用。机体感染布鲁菌后可产生一定免疫力，且各菌种有交叉感染。一般认为此免疫力为无菌免疫，随着病程的延续和机体免疫力的增强，体内的布鲁菌不断被杀灭，体内变成无菌免疫。即当体内有布鲁菌存在时，对再次感染有较强免疫力。同时血液中也有抗体产生，发挥调理作用。此外感染布鲁菌也可引起Ⅳ型超敏反应，故病程中免疫保护和病理损伤往往交织存在。布鲁菌以细胞免疫为主，病后产生IgM、IgG类抗体。急性期取血，慢性期取骨髓。将材料接种双相肝浸液培养基(一半为斜面，一半为液体)置37℃、5%~10%C02环境中培养。大多在4~7d形成菌落，若30d时仍无菌生长可报告为阴性。可通过菌落特点、涂片染色镜检、CO2的要求、H2S产生、染料抑菌试验及玻片凝集等确定型别。微生物学诊断病后1周后，可用试管凝集试验测定血清IgM抗体。抗体效价≧1:160~1:320为阳性，1:200有诊断意义，但当大于或等于1:100时应重复进行试管凝集试验，需要在37℃水浴16~20小时后观察结果。用乳胶凝集试验可在6分钟内判定结果。抗球蛋白试验(Coombs试验)针对布鲁菌感染者出现不完全抗体者，在病程中凝集效价出现增长者有诊断意义。对慢性患者可进行补体结合试验测IgG，一般以1:10为阳性诊断标准，一般发病三周后出现IgG抗体。将布鲁菌素0.1ml注入受试者前臂掌侧皮内24~48h观察结果。局部出现红肿，直径1~2cm为弱阳性，大于2cm~3cm者为阳性，大于3~6cm为强阳性。若红肿在4~6h内消退者为假阳性。皮试阳性可诊断慢性或曾患过布鲁菌病。防治原则控制和消灭家畜布鲁菌病，切断传播途径和免疫接种是三项主要的预防措施。免疫接种以畜群为主。人群接种对象是牧场，屠宰场工作人员及有关职业的人群，如兽医等。用冻干减毒104M株活疫苗作皮上划痕法接种，有效期约1年。急性期患者以抗生素治疗为主，慢性期患者除继续用抗生素治疗外，可用特异性菌苗进行脱敏治疗。三、鼠疫耶尔森菌​耶尔森菌属(Yersinia)现归入肠杆菌科，原系动物感染性疾病的病原菌，人通过接触感染动物或污染食物而患病。目前耶尔森菌属大致分11种，为鼠疫耶尔森菌(Yersiniapestis)、假结核耶尔森菌(Y.pseudotuberculosis)，小肠结肠炎耶尔森菌(Y.enterocolitica)及中间耶尔森菌(Y.intermedia)等，前3种对人类有较强致病性。鼠疫耶尔森菌（Y.pestis），俗称鼠疫杆菌，是鼠疫的病原菌。鼠疫是一种人兽共患的自然疫源性烈性传染病，人类鼠疫多为疫鼠的跳蚤叮咬而感染，是我国法定的甲类传染病。直至十九世纪末，鼠疫耶尔森菌才被分离和命名。此菌引起的是啮齿动物中的自然疫源性疾病，传染性强，病死率高，易酿成大流行，从公元6～19世纪发生过3次大流行。此菌主要累及皮肤和淋巴结，其次为败血症、肺炎、脑膜炎。目前我国仅在青海等个别地区有少数散在病例。第二次世界大战期间，日本侵略军曾利用鼠疫耶尔森菌制造细菌武器，我国东北地区发生过流行。目前世界各地仍有散发病例。印度、越南、缅甸等少数国家每年有数百散发病例发生。1994年印度发生了鼠疫的爆发流行，死亡率高达10%～30%。在美国，统计数据表明，每年约有20例耶尔森菌感染，其中20%累及肺部。未治疗病人病情凶险，病程早期进行治疗可大大降低病死率。生物学特性形态与染色革兰氏染色阴性，球状、卵圆或杆状，菌体两端钝圆且浓染，亦易被苯胺染料着色。大小为0.5～1.0μm×1.0～2.0μm。一般分散存在，偶尔成双或呈短链排列。无鞭毛，不能活动，可与本属其它细菌相区别。不形成芽胞。在死于鼠疫的新鲜动物内脏制备的涂片或印片中，可见吞噬细胞内、外形态典型的菌体，且有荚膜。在腐败材料或化脓性、溃疡性材料中，菌体常膨大呈球形，并且着色不良。如在陈旧培养物或在含3%氯化钠的高盐培养基中，菌体呈明显多形性，有球形、杆形、哑铃形等，并可见着色极浅的菌影（ghost）。培养特性兼性厌氧。最适生长温度27℃～30℃，最适pH为6.9～7.1。在普通培养基中能够生长，但生长较缓慢，在含血液或组织液的营养培养基中，经24小时～48小时形成可见菌落。菌落细小，圆形，无色半透明，中央厚而致密，边缘薄而不规则。有毒菌株形成灰白色，粘液性菌落。在肉汤培养基中沉淀生长和形成菌膜，液体一般不混浊，稍加摇动，菌膜下沉呈钟乳石状，此特征有一定鉴别意义。生化反应不同菌株有一定差异。该菌所有菌株均发酵葡萄糖，多数菌株能发酵阿拉伯糖、木糖和甘露糖，只有个别菌株能发酵乳糖和蔗糖。多数菌株还原硝酸盐。触酶阳性。一般不分解尿素，不产生硫化氢。抗原鼠疫耶尔森菌抗原构造复杂，至少有18种。除染色体基因可编码部分抗原以外，有些与毒力有关的重要抗原则由鼠疫耶尔森菌携带的几种质粒所编码。1．F1抗原（fraction1Antigen）：是一种糖蛋白，不耐热，100℃15分钟失去活性。F1抗原具有抗吞噬作用，是该菌重要的毒力成分。F1抗原特异性高，免疫原性强，其相应抗体具有免疫保护作用，故F1抗原也是鼠疫耶尔森菌的保护性抗原。2．V/W抗原：V抗原为可溶性蛋白，存在于菌细胞质中，W抗原为脂蛋白，位于菌体表面，二者总是同时出现。V/W抗原具有抗吞噬、形成局部肉芽肿以及促细菌在细胞内存活等作用，与细菌侵袭力有关，也是重要的毒力成分。3．pH6抗原：是在哺乳动物体内（35℃～37℃），局部酸化的微环境中（pH6.0），如巨噬细胞溶酶体或脓肿中，由细菌染色体DNA编码的一种表面蛋白（菌毛结构），对热不稳定，56℃30分钟丧失活性。具有介导粘附和抑制吞噬等作用。4．外膜抗原：鼠疫耶尔森菌具有多种外膜蛋白（yersiniaoutermembraneprotein，Yop），共同构成外膜抗原，能够促进细菌在宿主体内扩散，抵抗吞噬作用，并且具有细胞毒性等作用。5．T抗原：即毒素抗原。为可溶性蛋白，具有外毒素性质，对鼠类具有强烈的毒性作用，又称为鼠毒素（murinetoxin，MT），免疫原性强，可用0.4%甲醛脱毒制成类毒素，用于免疫动物制备抗毒素。T抗原只有在细菌自溶或用胆盐溶解、超声波破碎菌体后，才能释放出来。抵抗力鼠疫耶尔森菌对理化因素抵抗力较弱，湿热70℃～80℃10分钟或100℃1分钟死亡，干热160℃1分钟死亡，5%来苏或石炭酸、0.2%的升汞可在20分钟内杀死痰液中的病菌。在自然环境的痰液中能存活36天，在蚤粪、土壤中能存活一年左右。变异性鼠疫耶尔森菌除形态易发生变异外，其生化反应特性、毒力、抗原结构和耐药性等均可出现变异。与其它肠道杆菌不同，其野生株菌落呈R型，毒力强，经人工传代培养后，转变为S型菌落，毒力也随之减弱。致病性致病物质鼠疫耶尔森菌毒力很强，少数几个细菌即可使人致病。动物试验结果表明，鼠毒素可阻断动物肾上腺能神经，引起全身外周血管及淋巴管内皮细胞损伤，出现炎症、坏死、出血，导致血液浓缩和致死性休克，以及肝、肾、心肌纤维损害等。1微克鼠毒素即可致鼠死亡。对人的损伤机制尚不清楚。F1抗原、V/W抗原，外膜蛋白以及内毒素、扩散因子、RNA酶等与致病性有密切关系，表现为在37℃宿主体内的抵抗吞噬细胞吞噬和细胞杀菌作用，引起细胞变性、坏死等细胞毒性等。所致疾病鼠疫是自然疫源性传染病，鼠疫耶尔森菌主要寄生于啮齿类动物，传播媒介以鼠蚤为主。蚤因吸吮了受染动物的血液而变为有传染性。病菌在蚤肠内大量繁殖，直至蚤前胃腔全被菌堵塞，而使食物无法通过，饿蚤极力吸血时，先将前胃内容物从吻注入宿主伤口，然后吸血，由此造成传播。在人类鼠疫流行之前，往往先有鼠类鼠疫流行，当大批病鼠死亡，鼠蚤失去原宿主而转向人类，引起人类鼠疫。人患鼠疫后，尚可通过人蚤或呼吸道途径在人群间流行。临床上常见的有腺型、败血症型和肺型三种类型。①腺型鼠疫：最常见，多发生于流行初期。病菌通过疫蚤叮咬的伤口进入人体后，被吞噬细胞吞噬，在细胞内繁殖，并沿淋巴管到达局部淋巴结，引起出血坏死性淋巴结炎。多见于腹股沟淋巴结。②败血症型鼠疫：可原发或继发。前者常因机体抵抗力弱，病原菌毒力强，侵入体内菌量多所致；后者多继发于腺型鼠疫，病菌侵入血流所致。此型病情凶险，发病初期体温高达39℃～40℃，皮肤粘膜出现出血点，若抢救不及时，可在数小时至2～3天发生休克而死亡。③肺鼠疫：由于吸入带菌尘埃飞沫可直接造成肺部感染（原发型），或由腺鼠疫、败血症型鼠疫继发而致。患者高热，咳嗽，痰中带血及大量病菌，可在2～3天内死于休克、心力衰竭等。死者皮肤常呈黑紫色，故有“黑死病”之称。免疫性被鼠疫耶尔森菌感染后，能够获得牢固持久免疫力，再次感染者罕见。病菌的消灭主要依靠吞噬细胞的吞噬作用、相应抗体的调理吞噬和中和毒素等作用。持久的免疫则主要依靠细胞免疫作用。微生物学检验标本因鼠疫传染性极强，采集标本时必须严格无菌操作。根据病型采取淋巴结穿刺液、肿胀部位组织液、脓汁，血液和痰等。人和动物尸体可取肝、脾、肺、病变淋巴结以及心血等。陈旧尸体取骨髓。将采集标本送至有严密防护措施的专门实验室进行检查，禁止在一般实验室进行操作。直接涂片镜检除血液标本外，一般均需涂片或印片，干燥后用甲醇固定，革兰染色或吕氏美兰染色，镜检。在不同材料中，菌体大小、形态有很大差异，除典型形态外,往往可见菌体呈多形态性，需加以注意。分离培养与鉴定血液标本需先置肉汤中进行增菌培养。分离培养一般选用血琼脂平板，28℃24小时后,可见较小的露滴状菌落，继续培养则菌落增大至1mm～2mm，中央厚而致密，周边逐渐变薄。取可疑菌落进行涂片染色镜检，噬菌体裂解试验，血清凝集试验，特异荧光抗体染色等作出鉴定。防治原则预防：预防措施包括土埋病死动物，喷杀疫区跳蚤，提醒人们不要进入疫区。确诊患者应立即以“紧急疫情”向卫生防疫机构报告。对可疑病人应立即隔离，对接触了病人的任何人员，尤其是面对面接触过患此病伴咳嗽患者的人员，应给予预防性治疗，即用四环素口服，每天2g，用药5～10天。病人隔离应直至痰细菌培养阴性为止。对于常和此菌接触的工作人员，预防接种是有效的，并且必须。严格隔离病室灭鼠、灭蚤。病人排泄物彻底消毒，医务人员应有严密的防护措施。抗生素治疗鼠疫耶尔森菌感染应早期足量使用抗菌药物治疗。氨基糖甙类抗生素及磺胺类药物均有效。腺鼠疫可选用链霉素，每天2g，肌内注射。加用四环素，口服，每天2g。肺鼠疫，败血型鼠疫宜联合用药。庆大霉素可替代链霉素作为静脉注射。对于肾功能损害或其他原因不能使用链霉素、庆大霉素的病人，可用氯霉素静脉注射，每天3g。用药3天内迅速热退，但淋巴结内细菌仍有存活，热退后药物可适当减量，持续用药10天。单一药物有效，无需联合用药。

四、小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性形态与染色本菌为革兰氏阴性杆菌或球杆菌，，有毒菌株多呈球杆状，无毒株以杆状多见。大小为1-3.5×0.5-1.3μm，多单个散在，有时排列成短链或成堆。本菌不形成芽胞，无荚膜，有周鞭毛;但其鞭毛在30℃以下培养条件形成，温度较高时即丧失，因此表现为30℃以下有动力，而35℃以上则无动力。培养特性对营养要求不高，能在麦康凯琼脂上生长，菌落淡黄色，如若微带红色，则菌落中心的红色常稍深。但较其他肠道杆菌生长缓慢培养的最适宜温度为28℃最适pH值为7~8。本菌世代时间长，最短亦需40分钟左右。在SS或麦康凯琼脂上于25℃经24小时培养，菌落细小，至48小时直径才增大成0.5-3.0mm。菌落圆整、光滑、湿润、扁平或稍隆起，透明或半透明在麦康凯琼脂上。本菌在肉汤中生长呈均匀混浊，一般不形成菌膜。本菌具有"嗜冷性"，在水中和低温下(4℃)能生长，为肠道中能在4℃生长繁殖的少数细菌之一。因此，食品冷藏保存时，应防止被该菌污染。生化反应①动力（26℃）阳性；②素酶阳性；③VP试验（26℃）阳性；④鸟氨酸脱羧酶阳性；⑤蔗糖有不同生化型；⑥棉子糖阴性；⑦山梨醇阳性；⑧甘露醇阳性；⑨鼠李糖阴性。致病性致病因素小肠结肠炎耶尔森氏菌分布很广，可存在于生的蔬菜、乳和乳制品、肉类、豆制品、沙拉、牡蛎、蛤和虾。也存在于环境中，如湖泊、河流、土壤和植被。已从家畜、狗、猫、山羊、灰鼠、水貂和灵长类动物的粪便中分离出该菌。在港湾周围，许多鸟类包括水禽和海鸥可能是带菌者。本菌可产生耐热肠毒素，121℃30分钟不被破坏，对酸碱稳定，pH1~11不失活。肠毒素产生迅速，在25℃下培养12小时，培养基上清液中即有肠毒素产生，24~48小时达高峰。肠毒素是引起腹泻的主要因素。毒力型菌株均有VW抗原(蛋白脂蛋白复合物)，为毒力的重要因子，与侵袭力有关，侵袭力可能是耶尔森菌感染肠道表现的病理基础。所致疾病小肠结肠炎耶尔森氏菌是30年代引起注意的急性胃肠炎型食物中毒的病原菌，为人畜共患病。潜伏期约摄食后3-7天，也有报导11天才发病。病程一般为1-3天，但有些病例持续5-14天或更长。主要症状表现为发热、腹痛、腹泻、呕吐、关节炎、败血症等。耶尔森氏菌病典型症状常为胃肠炎症状、发热、亦可引起阑尾炎。有的引起反应性关节炎，另一个并发症是败血症，即血液系统感染，尽管较少见，但死亡率较高。本菌对易染人群为婴幼儿，常引起发热、腹痛和带血的腹泻。微生物学诊断标本：取粪便，剩余食物进行培养分离培养生化鉴定法：从营养琼脂平板上挑取单个菌落做生化实验，所有的反应皆在26℃±1℃培养。血清凝集法：小肠结肠炎耶尔森氏菌的抗原结构较为复杂，现已知有84个O抗原因子和19个Ｈ抗原因子，在同一血清型的菌株中，可含两种或更多的O抗原。小肠耶尔森氏菌在我国分布很广，菌群复杂，目前主要占优势的血清型为O：3，O：5，O：8和O：9型。某些O抗原同其他细菌有共同性，如O：9与布氏菌有交叉反应，O：12血清与沙门氏菌有交叉反应等，在流行病学调查中，血清学诊断起着较为重要的作用.防治原则症状较轻时，本病多为自限性，无需抗菌治疗。宜进行适当隔离，粪便及排泄物要消毒，以免疾病传播。有失水者及时补液，以纠正水、电解质、酸碱紊乱。对病程较长，有并发症或呈暴发型者，应给予抗菌治疗。本菌对所有氨基糖甙抗生素、多粘菌素、复方新诺明、四环素、呋喃唑酮和喹诺酮类等均敏感。

五、弯曲菌属

弯曲菌属细菌是一类微需氧菌，不分解糖类、氧化酶阳性，菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状，有动力的革兰氏阴性菌。包括5个种和5个亚种。对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。前者是人类腹泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。生物学特性：形态与染色为革兰氏阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。陈旧培养物可呈球形或长丝状。大小为(0.5~8)μm×(0.2~0.5)μm。一端或两端具有单鞭毛，运动活泼，有时呈螺旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种，两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌，无芽孢、无荚膜，一端或两端着生单根无鞘鞭毛，长度为菌体的2~3倍。培养特性1.微需氧菌，初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长，传代培养时能在10%CO2环境中生长。2.该菌属最适生长温度随菌种而异。空肠弯曲菌、大肠弯曲菌在43℃生长，25℃不生长;胎儿弯曲菌在25℃生长，而43℃不生长;简明弯曲菌在25℃和43℃均不生长。但各种菌在37℃皆可生长。生长温度的差异可用于菌种的鉴别。3.营养要求高，在普通培养基上不能生长，需加血液、血清。常用的选择培养基有Skirrow琼脂、Butzler培养基和Campy-BAP培养基。这些培养基以血琼脂为基础，加入多种抗生素，能抑制肠道正常菌群，而有利于本菌分离。空肠弯曲菌属初次分离时，经48小时培养可形成两种菌落:一种为扁平湿润、灰白色半透明、边缘不整齐、常延接种线扩散生长的菌落;另一种为圆形凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。两种菌落均不溶血。在布氏肉汤内呈均匀浑浊生长。生化反应该菌属生化反应不活泼。不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试验均阴性。氧化酶均为阳性，大多数弯曲菌还能还原硝酸盐，触酶试验为阳性，空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。抗原结构有菌体(O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。抵抗力较弱，56℃5分钟即被杀死。干燥环境中仅能存活3小时。对一般消毒剂敏感。致病性致病因素主要与肠毒素、细胞毒素、内毒素和黏附、定植能力有关。主要引起人类肠道感染和各种肠道外感染。其中空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。胎儿弯曲菌主要引起肠道外感染，其中胎儿亚种为主要的人类致病菌，致菌血症、胆囊炎、腹膜炎、肺部感染等空肠/大肠弯曲菌是禽类肠道的正常菌群，人接触或通过食物、水而传染，可引起急性肠类、亦可引起腹泻的暴发流行和食物中毒，是人类腹泻的重要病原菌。该菌亦可导致败血症、其他感染及胎儿感染。

致病因素：1.肠毒素： 霍乱样肠毒素。

致死性肿胀毒素

2．细胞毒素

志贺样毒素

溶血毒素

3．内毒素

胎儿弯曲菌主要引起肠外感染，其中胎儿亚种为主要的人类致病菌，可致人类菌血症、心内膜炎、血栓性静脉炎、活动性关节炎、脑膜炎、心包炎、肺部感染、胸膜炎、腹膜炎、胆囊炎等。微生物学检验标本的采集1．新鲜粪便、肛拭子及剩余食物。2．血液及脑脊液直接涂片(1)悬滴标本检查:取新鲜粪便于载玻片上，加生理盐水混合后，上覆盖玻片置显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。脑脊液经3000r/min离心沉淀15min后，制成涂片做悬滴检查。(2)革兰染色检查:为革兰氏阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。分离培养粪便和肛拭子标本直接接种于改良弯曲菌琼脂平板，如改良的Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板;血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后，转种弯曲菌分离培养基，置43℃、37℃，在微需氧环境下培养24~72小时，观察菌落特征。鉴定革兰氏阴性细小弯曲杆菌，单鞭毛具有投镖样或螺旋样动力，需氧环境不生长，微需氧条件下，在弯曲菌选择培养基上形成两种类型菌落。不分解葡萄糖。弯曲菌属的鉴定要点为氧化酶阳性、革兰氏阴性、菌体弯曲或呈S形。最常用的鉴定试验有生长温度(25℃、37℃、42℃)试验、过氧化氢试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验、硫化氢试验等等。诊断与防治

目前,尚无有效的预防措施,疫苗正在研制中。预防:1.注意饮水和食品卫生2.加强粪便管理治疗:红霉素、氨基糖苷类抗生素、氯霉素等六、幽门螺杆菌

（H.pylori）

生物学特性：螺旋形、S型一端或两端有2～6根鞭毛运动活泼，呈鱼群样排列微需氧菌对营养要求高，生长缓慢在含血液、血清或心脑浸液琼脂培养基，需要3～5天或更长时间培养，形成细小、无色透明菌落最适温度：37℃致病性与免疫性：慢性胃炎、消化性溃疡及十二指肠炎关系密切与胃腺癌、粘膜相关淋巴组织淋巴瘤发生有关七、铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）铜绿假单胞菌(P.Aeruginosa)原称绿脓杆菌。在自然界分布广泛，为土壤中存在的最常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌存在。是一种常见的条件致病菌，本菌存在的重要条件是潮湿的环境。生物学特性：革兰阴性细菌，菌体细长且长短不一，直或微弯杆菌，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列，似白喉棒状杆菌，应注区别（∵白喉为G+菌）。不形成芽胞及荚膜，单端有1～3根鞭毛，运动活泼培养特性本菌为专性需氧菌生长温度范围25~42℃，最适生长温度为25~30℃，特别是该菌在4℃不生长而在42℃可以生长的特点可用以鉴别。营养要求不高，在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素，如绿脓素（pyocynin）与带荧光的水溶性荧光素（pyoverdin）等。在血平板上会有透明溶血环。

普通肉汤：生长迅速，混浊菌膜，黄绿色色素。普通平板：35℃,24h形成光滑，湿泣柔软，大而扁平，边缘不整的菌落，常常菌落间相互融合呈弥漫性生长。

血平板—有溶血环扁平，湿润会更光泽气味灰绿或蓝绿色菌落。SSA平板—易于沙门菌或志贺菌相混。铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)血平板上毛玻璃样，金属光泽，生姜味可产生多种色素：荧光素与绿脓素铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)绿脓素生化反应分解Pr能力很强，发酵糖的能力很差，在O-F培养基上，可分解等以扩，乳、麦、甘露糖、蔗(—)氧化酶+、明胶+、尿素+、C+、I-、精氨酸双水解酶+。抗原该菌含有O抗原（菌体抗原）以及H抗原（鞭毛抗原）。O抗原包含两种成分：一种是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂多糖，有特异性。O抗原可用以分型。抵抗力铜绿假单胞菌对外界环境抵抗力较强，在潮湿处能长期生存，对紫外线不敏感，湿热55℃1h才被杀灭。本菌对化学药物的抵抗力比一般革兰氏阴性菌强大。有些菌株对磺胺,链霉素,氯霉素敏感，但极易产生耐药性。青霉素对此菌无效，但庆大霉素和多粘菌素B、E，氨基甙类、第三和第四代头孢菌素等抗生素作用较明显，一些半合成的青霉素类抗生素，比如阿洛西林和哌拉西林对绿脓杆菌也有很强的抗菌作用，其有效率约为80%。磷霉素对其也有效，但效果不如以上的抗生素。联合用药可减少耐药菌株的产生。致病性铜绿假单胞菌有多种产物有致病性，其内毒素是引起脓毒综合征或系统炎症反应综合征(SIRS)的关键因子，不过由于铜绿假单胞菌内毒素的含量较低，故在发病上的作用要小于肠杆菌科细菌。其分泌的外毒素A(ExoA)是最重要的致病、致死性物质，进入敏感细胞后被活化而发挥毒性作用，使哺乳动物的蛋白合成受阻并引起组织坏死，造成局部或全身疾病过程。铜绿假单胞菌尚能产生蛋白酶，有外毒素A及弹性蛋白酶同时存在时则毒力最大;胞外酶S是铜绿假单胞菌所产生的一种不同于外毒素A的ADP核糖转移酶，它可以破坏细胞骨架，从而促进铜绿假单胞菌的侵袭扩散，感染产此酶的铜绿假单胞菌患者，可有肝功能损伤而出现黄疸。此外，如碱性蛋白酶、磷酸酶、细胞毒素等铜绿假单胞菌外毒素亦常是造成组织破坏、细菌散布的重要原因。铜绿假单胞菌为条件致病菌，完整皮肤是天然屏障，活力较高的毒素亦不能引起病变，正常健康人血清中含有调理素及补体，可协助中性粒细胞和单核细胞巨噬细胞吞噬及杀灭铜绿假单胞菌，故亦不易致病;但如改变或损伤宿主正常防御机制，如皮肤黏膜破损、留置导尿管、气管切开插管，或免疫机制缺损如粒细胞缺乏、低蛋白血症、各种肿瘤患者、应用激素或抗生素的患者，在医院环境中常可从带菌发展为感染。烧伤焦痂下，婴儿和儿童的皮肤、脐带和肠道，老年人的泌尿道，常常是铜绿假单胞菌败血症的原发灶或入侵门户。微生物学检查标本采集根据疾病的种类不同而异。患者的血液、脑脊液、胸腹水、脓汁、分泌液、痰液、尿、粪便等，医院疗区或手术室的空气、水、地面、门把手、医疗器械及生活用品等。染色镜检：初步判断为革兰阴性菌，菌体大小（1.5～5.0)um×宽(0.5～1)um，细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，无芽胞。①普通琼脂平板圆形、大小不一，边缘不整、扁平、光滑、湿润常呈融合状之菌落。绿、黄绿水溶性色素。②血平板扁平、湿润、金属光泽生姜味，灰绿/蓝绿色菌落。β溶血。③选择性培养基（如麦康凯）微小，半透明、无光泽菌落48h后菌落中心常呈棕绿色。37℃18～24h37℃18～24h37℃18～24h分离培养生化鉴定该菌氧化酶阳性，能氧化分解葡萄糖和木糖，产酸不产气，但不分解乳糖和蔗糖。液化明胶、可分解尿素，还原硝酸盐为亚硝酸盐并产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。血清学试验防治原则铜绿假单胞菌广泛存在于自然界，通过多种途径在医院内传播;因此，必须严格消毒器械、敷料，医务人员及护理员勤洗手，认真执行无菌操作，患者应予隔离，其敷料应予焚毁。同时积极治疗原发疾患，去除诱发因素等。治疗可选庆大霉素，多粘菌素B等八、流感嗜血杆菌（H.influenzae）名称由来→于1892年由费佛博士在流行性感冒的瘟疫中发现。→曾误认为它是1889年流感大流行的原因。→直至1933年，发现流行性感冒的病毒性病原后，才消除了这种误解。但流感嗜血杆菌这一错名却仍沿用至今生物学特性：

革兰阴性小杆菌，常呈多形态性（球杆、长杆或丝状）多有菌毛，无芽胞，无鞭毛，不能运动;正常菌群无荚膜，毒株培养后有荚膜。生长需要X和V因子（新鲜血液）抵抗力：弱

培养特性需氧或兼性厌氧人工培养必须有新鲜血液成分（主要是X因子和V因子）才能生长，故名嗜血杆菌X因子是细菌合成过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶等呼吸酶的辅基V因子在血液中，是辅酶1和2，递氢体卫星现象金黄色葡萄球菌提供V因子巧克力色平板上培养：经35℃，18～24h培养形成微小（0.5～0.8mm）无色透明，不溶血，呈露滴样小菌落。48h后形成灰白色较大的菌落。

当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培养时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子，并弥散到培养基里，可促进流感嗜血杆菌生长，故在金黄色葡萄球菌菌落周围菌落较大，而离金黄葡萄球菌越远者则流感嗜血杆菌的菌落越小。卫星现象（satellitephenomenon）：生化反应：流感嗜血杆菌能分解葡萄糖，不发酵乳糖﹑甘露醇,对半乳糖﹑果糖﹑麦芽糖的发酵不稳定。抗原构造与分型：主要抗原为荚膜多糖抗原（b型最强）和菌体抗原。流感嗜血杆菌的抗原物造与肺炎链球菌相似。对热敏感：５６℃３０ｍｉｎ可杀死抵抗力—弱对干燥敏感对常用消毒剂敏感致病性呼吸道常见菌对人有致病作用的代表菌种是流感嗜血杆菌杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌也是致病其余菌种多为条件致病菌致病物质荚膜：抗吞噬菌毛：粘附、定植内毒素：致病作用尚不清IgA蛋白酶：水解sIgA

*原发感染：引起急性化脓性感染

化脓性脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、心包炎

化脓性关节炎等，严重的引起菌血症，以小儿

多见。

*

继发感染：多是内源性感染，以成人多见。流行性感冒麻疹百日咳结核病继发于临床表现慢性支气管炎中耳炎鼻窦炎所致疾病

：免疫性体液免疫为主3个月内的婴儿由母体获得血清抗体成人后主要作用抗体：

1.荚膜多糖特异性抗体

2.菌体外膜蛋白抗体微生物学检查方法直接检测：根据临床症状采集标本——脑脊液、痰、脓汁等直接涂片染色镜检——诊断脑膜炎、下呼吸道感染、关节炎等分离培养：接种于巧克力色琼脂平板、含脑心浸液的血琼脂乳胶凝集试验、免疫荧光、荚膜肿胀试验检测荚膜抗原以诊断脑膜炎选用广谱抗生素治疗预防荚膜多糖菌苗防治原则九、百日咳鲍特菌(B.

pertussis)百日咳杆菌(Bordetellapertussis)是人类百日咳的病原菌。生物学性状

形态与染色（1）G-，卵圆形短小杆菌（2）无芽胞,无鞭毛（支气管鲍特菌和鸟鲍特菌有）有荚膜（新分离菌株）（3）衰老者常出现多形性。百日咳鲍特菌镜下形态（革兰染色）培养特点（1）专性需氧菌，最适温度35℃～37℃最适pH6.8～7.0。（2）初次分离营养要求较高，常用含有血液、甘油、马铃薯的鲍-金（Bordet-Gengou）培养基。（3）鲍-金

（Bordet-Gengou）培养基

细小、光滑、凸起、银灰色水银滴状菌落，菌落周围有狭窄的溶血环。（4）液体培养基：均匀混浊生长，管低有少量沉淀。35℃～37℃2～3d百日咳鲍特菌菌落特征（CCBA琼脂）生化反应弱，一般不发酵糖类，但分解蔗糖和乳糖，产酸不产气，不产生H2S和吲哚，过氧化氢酶试验阳性。生化反应抗原结构O抗原菌体抗原K抗原表面抗原，又称为凝集原包括凝集因子1~6

凝集因子1为Ⅰ相菌的共同抗原，是种的特异性抗原。

WHO推荐在菌苗中应含有1、2、3因子血清型的菌株。变异性：光滑型Ｓ粗糙型ＲⅠ相为光滑型，菌落光滑，有荚膜，毒力强Ⅱ、Ⅲ相为过渡相Ⅳ相为粗糙型，菌落粗糙，无荚膜，无毒力一般在疾病急性期分离的细菌为Ⅰ相，疾病晚期和多次传代培养可出现Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ相的变异。发生这种变异时，细菌形态、菌落、溶血性、抗原结构和致病力等均出现变异。抵抗力——弱

对热、日光照射、一般消毒剂敏感。56℃30分钟、日光照射1小时可致死亡。干燥尘埃中能存活３ｄ。对多粘菌素、氯霉素、红霉素、氨苄青霉素等敏感，对青霉素不敏感。致病物质：与致病性有关的物质除荚膜、菌毛、内外毒素外，尚有多种生物学活性因子（百日咳毒素、皮肤坏死毒素等）。百日咳外毒素是主要的致病因子，能诱发机体的持久免疫力，并有多种生物活性，如提高小鼠对组织胺、5~羟色胺和敏感性，促进白细胞增多，抑制巨噬细胞功能，损伤呼吸道纤毛上皮细胞导致阵发性痉挛咳嗽等。细菌破裂后还能在宿主细胞浆中查到一种热不稳定性毒素和其他几种抗原成份，可引起纤毛上皮细胞炎症和坏死。所致疾病百日咳杆菌引起人类百日咳。病人，尤其是症状轻微的非典型病人是重要的传染源。主要经飞沫传播。易感儿童接触病人后发病率接近90%，一岁以下患儿病死率高。百日咳潜伏期1~2周。发病早期(卡他期)仅有轻度咳嗽。细菌此时在气管和支气管粘膜上大量繁殖并随飞沫排出，传染性最大。1~2周后出现阵发性痉挛性咳嗽(痉挛期)，这时细菌释放毒素，导致粘膜上皮细胞纤毛运动失调，大量粘稠分泌物不能排出，刺激粘膜中的感受器产生强烈痉咳，呈现出特殊的高音调鸡鸣样吼声。形成的粘液栓子还能堵塞小支气管导致肺不张和呼吸困难、紫绀。此外可伴有呕吐、惊厥。4~6周后逐渐转入恢复期，阵咳减轻，趋向痊愈，但有1~10%病人易继发溶血性链球菌、流感杆菌等的感染。本病病程较长，故名百日咳。在致病过程中，百日咳杆菌始终在纤毛上皮细胞表面，并不入血。免疫力：感染百日咳后可出现多种特异性抗体，免疫力较为持久。仅少数病人可再次感染，再发的病情亦较轻。粘膜局部的分泌型lgA具有阻止细菌粘附气管粘膜细胞纤毛的作用，其抗感染作用比血清中的抗体更重要。细胞免疫在百日咳杆菌感染中的作用还不甚明了。微生物学检查法1.分离鉴定取鼻咽拭子接种于鲍-金培养基可疑菌落涂片镜检2.生化反应鉴定3.血清型鉴定用Ⅰ相免疫血清作凝集试验。4.快速鉴定（1）荧光抗体查抗原（2）ELISA法检测患者血清中的抗PT、抗