- 现行
- 正在执行有效
- 2009-05-26 颁布
- 2009-10-01 实施
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文档简介
犐犆犛65.120
犅46
中华人民共和国国家标准
犌犅/犜23874—2009
饲料添加剂木聚糖酶活力的测定
分光光度法
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20090526发布20091001实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
发布
中国国家标准化管理委员会
书
犌犅/犜23874—2009
前言
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。
本标准由中国农业大学农业部饲料工业中心、武汉新华扬生物有限公司、广东溢多利生物技术股份
有限公司负责起草。
本标准主要起草人:陆文清、曹云鹤、刘兴海、詹志春、刘亚力、陈清华。
Ⅰ
书
犌犅/犜23874—2009
饲料添加剂木聚糖酶活力的测定
分光光度法
1范围
本标准规定了用分光光度法测定饲料添加剂中木聚糖酶的活力。
本标准适用于饲料添加剂木聚糖酶产品,最低检出量为10.0U/g。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
木聚糖酶能将木聚糖降解成寡糖和单糖。还原性寡糖和单糖在沸水浴条件下可以与3,5二硝基
水杨酸(DNS)试剂发生显色反应。反应液颜色的深度与酶解产生的还原糖量成正比,而还原糖的生成
量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比。因此,通过分光比色测定反应液颜色的强度,可以计算反应液
中木聚糖酶的活力。
在37℃、pH为5.50的条件下,每分钟从浓度为5mg/mL的木聚糖溶液中降解释放1μmol还原
糖所需要的酶量为一个酶活力单位U。
4试剂与溶液
除特殊说明外,所用的试剂均为分析纯,水均为符合GB/T6682中规定的二级水。
4.1氢氧化钠溶液,浓度为200犵/犔
称取氢氧化钠20.0g。加水溶解,定容至100mL。
4.2乙酸溶液,浓度为0.1犿狅犾/犔
吸取冰乙酸0.60mL。加水溶解,定容至100mL。
4.3乙酸钠溶液,浓度为0.1犿狅犾/犔
称取三水乙酸钠1.36g。加水溶解,定容至100mL。
4.4乙酸乙酸钠缓冲溶液,浓度为0.1犿狅犾/犔,狆犎为5.50
称取三水乙酸钠23.14g,加入冰乙酸1.70mL。再加水溶解,定容至2000mL。测定溶液的pH。
如果pH偏离5.50,再用乙酸溶液(4.2)或乙酸钠溶液(4.3)调节至5.50。
4.5木糖溶液(犆5犎10犗5),浓度为10.0犿犵/犿犔
称取无水木糖1.000g,加乙酸乙酸钠缓冲溶液(4.4)溶解,定容至100mL。
4.6木聚糖溶液,浓度为100犿犵/犿犔
称取木聚糖(SigmaX06271))1.00g,加入0.32g氢氧化钠,再加入90mL
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