标准解读

《GB/T 23385-2009 饲料中氨苄青霉素的测定 高效液相色谱法》是一项国家标准，规定了使用高效液相色谱法（HPLC）测定饲料中氨苄青霉素含量的方法。该标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混料中氨苄青霉素残留量的检测，其最低检出限为1.0mg/kg。

按照此标准进行实验时，首先需要对样品进行处理，通过提取、净化等步骤将待测物质从复杂基质中分离出来。具体来说，先将一定量的样品与提取溶剂混合，在特定条件下震荡提取后离心或过滤得到上清液；然后采用固相萃取柱或其他方法进一步纯化样品溶液，以去除干扰组分，提高目标物浓度。处理好的样品溶液可用于后续分析。

高效液相色谱分析条件包括但不限于流动相组成、流速、柱温、检测波长等因素的选择。标准中推荐了一种典型的色谱条件：使用C18反相色谱柱作为固定相，以甲醇和水（含少量磷酸）按一定比例配制而成的混合溶液作为流动相，设定适当的流速和柱温，并在紫外光下于特定波长处检测。根据保留时间和峰面积等参数，可以定性和定量地分析样品中的氨苄青霉素含量。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2009-03-26 颁布
  • 2009-07-01 实施
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GB/T 23385-2009饲料中氨苄青霉素的测定高效液相色谱法_第1页
GB/T 23385-2009饲料中氨苄青霉素的测定高效液相色谱法_第2页
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文档简介

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犅４６

中华人民共和国国家标准

犌犅／犜２３３８５—２００９

饲料中氨苄青霉素的测定

高效液相色谱法

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２００９０３２６发布２００９０７０１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

书

犌犅／犜２３３８５—２００９

前言

本标准的附录Ａ为资料性附录。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（ＳＡＣ／ＴＣ７６）提出并归口。

本标准起草单位：黑龙江省兽药饲料监察所。

本标准主要起草人：金慧然、叶建敏、范锡龙、郭文欣、陶娅、江淼、李春辉。

Ⅰ

书

犌犅／犜２３３８５—２００９

饲料中氨苄青霉素的测定

高效液相色谱法

１范围

本标准规定了用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法测定饲料中氨苄青霉素的含量。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中氨苄青霉素含量的测定。

本标准检出限为１．０ｍｇ／ｋｇ，定量限为５．０ｍｇ／ｋｇ。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—２００８，ＩＳＯ３６９６：１９８７，ＭＯＤ）

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１饲料采样（ＧＢ／Ｔ１４６９９．１—２００５，ＩＳＯ６４９７：２００２，ＩＤＴ）

ＧＢ／Ｔ２０１９５动物饲料试样的制备（ＧＢ／Ｔ２０１９５—２００６，ＩＳＯ６４９８：１９９８，ＩＤＴ）

３原理

用磷酸盐缓冲液提取试样中的氨苄青霉素，高效液相色谱仪反相色谱系统分离，紫外检测器或二极

管矩阵检测器在波长２２０ｎｍ处进行定性、定量测定。

４试剂和溶液

除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯试剂和符合ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。

４．１乙腈：色谱纯。

４．２磷酸二氢钾溶液，犮（ＫＨ２ＰＯ４）＝０．０２ｍｏｌ／Ｌ：准确称取２．７２ｇ磷酸二氢钾于１０００ｍＬ容量瓶中，

加水溶解稀释至刻度。

４．３提取液：磷酸二氢钾溶液（４．２）＋乙腈（４．１）＝１９＋１。

４．４ＨＰＬＣ流动相：取９２０ｍＬ磷酸二氢钾溶液（４．２）和８０ｍＬ乙腈（４．１），混合均匀，通过０．４５μｍ的

溶剂微孔过滤膜过滤，使用前用超声波脱气。

４．５氨苄青霉素标准贮备液：准确称取氨苄青霉素标准品（含量不少于８６．５％）５０ｍｇ（精确至０．００００１ｇ），

于５０ｍＬ容量瓶中，用超纯水溶解并定容至刻度，摇匀。其溶液浓度为１．０ｍｇ／ｍＬ，贮于４℃～６℃冰

箱中，有效期２ｄ。

４．６氨苄青霉素标准工作液：准确移取氨苄青霉素标准贮备液（４．５）适量，用水稀释成浓度分别为

１．０μｇ／ｍＬ、５．０μｇ／ｍＬ、１０．０μｇ／ｍＬ、２５．

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