动物细胞工程讲课

1、植物细胞工程采用的两项重要的基本技术是和2、两项基本技术所依据的共同的理论基础是3、体内细胞全能性不表达而是分化为各种组织、器官的原因是4、植物组织培养需要经历的两个基本环节是和其中前一环节的生成物为5、植物体细胞杂交操作的第一个障碍是细胞壁，去壁的方法为具体用到了和6、诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法，其中化学法用到的化学试剂为7、细胞融合完成的标志为8、植物体细胞杂交的意义9、神奇的人工种子是利用植物组织培养技术获得再包上人工种皮制成的。10、细胞产物的工厂化生产，是利用植物组织培养技术生产紫杉醇等物质，该环节只需组培到步。细胞工程专题二：1、操作的水平：2、操作的目的：3、分类：细胞整体水平或细胞器水平按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品植物细胞工程动物细胞工程(有别于基因工程)（操作对象）所依据的共同理论基础植物细胞工程采用的基本技术植物组织培养植物体细胞杂交植物细胞的全能性细胞的全能性1、概念1）受精卵生殖细胞体细胞＞＞：已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能，叫做细胞的全能性。2、原因3、全能性的比较：从理论上讲，每个细胞都包含该物种的全部遗传物质（全部基因）.2）植物细胞

动物细胞（与细胞的分化程度有关）一般分化程度越低，全能性越高＞动物细胞的全能性受到了抑制，但细胞核还保留了全能性。4、体内细胞全能性不表达而是分化为各种组织器官的原因是：在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因选择性表达出各种蛋白质，从而构成生物体不同的组织和器官。5、全能性实现的条件：离体在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用离体的植物器官组织或细胞外植体脱分化愈伤组织再分化植物体愈伤组织：排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团脱分化：已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程再分化：由未分化的细胞形成具有一定形态结构功能的细胞的过程分化程度很低，全能性很高。胚状体丛芽1、植物组织培养的过程杂种植株融合的原生质体AB再生壁脱分化愈伤组织再分化植物体细胞杂交的过程植物细胞的融合植物组织培养植物细胞A植物细胞B原生质体B原生质体A杂种细胞AB去壁去壁人工诱导动物细胞工程专题2细胞工程思考与回忆：1、动物细胞全能性特点？

随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄。细胞核仍具有全能性。2、能否用植物组织培养的方法使动物细胞发育成动物个体？

不能。动物细胞和组织在体外培养的过程中，伴随一定的组织分化，不管采用什么手段和培养条件，由于细胞的运动、变化，细胞发生结构功能变异，结果长时间的培养只能使单一类型的细胞保存下来，最终成了简单的细胞培养。3、动物的细胞培养的理论依据（原理）？

细胞增殖动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植和克隆动物动物细胞工程常用技术其它动物细胞工程的基础一：动物细胞培养本节内容：一、动物细胞培养1、概念：动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.2、原理：细胞增殖定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。胰蛋白酶处理取出组织胚胎或幼龄动物器官组织剪碎单个细胞细胞悬液转入培养瓶内培养（贴壁生长长成单层细胞。有接触抑制现象）。①原代培养3：过程图示原代培养细胞贴壁过程■细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。■培养瓶或培养皿壁要求：表面光滑、无毒、易于帖附。■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。接触抑制

定义：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程被称为传代培养.（分瓶培养的过程）传代培养传代细胞在传至40-50代时，细胞增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。传代50代以后少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，正在朝着等同于癌细胞的方向发展。传代培养的细胞一般传到10代就不易传下去。10代以内的细胞遗传物质不变，保持正常二倍体核型。（冷冻保存的细胞为10代以内的细胞）3、总结：动物细胞培养过程动物胚胎或幼龄动物的组织、器官配置细胞悬液剪碎用胰蛋白酶处理10代细胞转入培养瓶40-50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液稀释传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变）为什么用胰蛋白酶处理？分瓶传代培养原代培养特点：细胞贴壁、接触抑制继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。遗传物质未改变：遗传物质已改变原代培养4.动物细胞培养的条件:1）无菌无毒的环境：

适宜的温度：人和哺乳动物细胞最适温度为36.5±0.5℃。适宜的酸碱度：PH：7.2-7.4液体合成培养基：（糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）等；通常还需加入血浆、血清等天然成分。4）气体环境：2）营养：3）温度和pH：“95％空气+5％CO2”的混合气体培养箱。氧气是细胞代谢必须的；CO2维持培养液的PH。对培养液和所有培养用具无菌处理；培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。问题3：为什么用胰蛋白酶处理？问题1：、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？因为其细胞生命力旺盛，分裂能力强，分化程度低。问题2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？扩大细胞与培养液的接触面积，利于细胞吸收营养。动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的蛋白质和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。

问题4：为什么用胰蛋白酶处理而不用胃蛋白酶？动物细胞培养的最适PH值为7.2-7.4，胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2-8.4，胃蛋白酶适宜PH为2.胃蛋白酶在PH为7.2-7.4的动物细胞培养中无活性。问题5：用胰蛋白酶处理不会把所培养的细胞消化掉吗？控制好时间！长时间处理当然会损伤细胞。问题6、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？问题7、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成分：（葡萄糖、氨基酸）、（水、无机盐）、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基2、成分中有动物血清等不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体问题8、动物细胞培养的原理：细胞增殖。问题9、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，为什么？10代以内的细胞遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。5.动物细胞培养技术的应用:1.蛋白质生物制品的生产如病毒疫苗(让病毒感染培养的细胞，再将繁殖的病毒灭活)、干扰素、单克隆抗体2.应用于基因工程主要用于作为受体细胞3.检测有毒物质，判断某种物质的毒性

4.细胞的生理、药理、病理研究

如用于筛选抗癌药物6、植物组织培养和动物细胞培养的比较：比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖促--动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白取材植物幼嫩部分或花药胚胎或幼龄动物的器官或组织其他条件无菌无毒，适宜条件无菌无毒，适宜条件植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的

细胞培养基特有成分

、植物激素葡萄糖、培养结果植物体培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得全能性增殖蔗糖动物血清细胞株、细胞系细胞,某些蛋白质二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、定义：

动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.3、分类：

胚胎核移植、体细胞核移植。胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易。动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难2、原理：

动物细胞核具有全能性4、体细胞核移植过程---示动物克隆---无性繁殖1.）克隆羊多利培育过程：黑面绵羊去核卵母细胞白面绵羊乳腺细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期重组胚胎胚胎移植另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利◆特别注意：克隆动物性状与供体动物完全一样吗？不可能！因为：一、供体动物只提供细胞核，而细胞质中的遗传物质（如线粒体DNA）来自于受体卵母细胞.二、生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。供体受体代孕受体黑面绵羊去核卵母细胞白面绵羊乳腺细胞核a重组细胞电脉冲刺激早期重组胚胎b另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利1、写出AB所代表细胞工程名称：a表示：

b表示:

2、实施细胞工程时，所需受体细胞大多采用卵母细胞的原因：体积大，易操作。含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。3、多利面部毛色是：

根据遗传学原理说明判断依据。4、若黑面绵羊的基因型为AA,白面绵羊的基因型为aa，则克隆羊的基因型为

核移植胚胎移植白色多利全部的核基因都来自白面绵羊aa

◆取供体细胞传代培养10代以内的细胞.为什么？◆用的是去核的减数第二次分裂中期细胞（MⅡ中期）为什么？◆激活方法：◆激活目的：◆促融方法：电刺激◆胚胎移植至代孕受体内

妊娠、分娩2.）核移植流程供体：优质高产奶牛受体：普通奶牛（卵母细胞的采集与培养）

1.体积大，易操作。2.含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。有人说它三个母亲，对吗？以概念图的形式表示体细胞核移植过程？取供体细胞取卵母细胞

供体细胞培养培养到MⅡ中期

卵母细胞去核

供体细胞注入去核的卵母细胞

供体核进入受体卵母细胞

重组胚胎

代孕母牛

生出与供体遗传物质基本相同的个体核移植胚胎移植核移植流程:1、供体细胞的采集与培养5、用物理或化学方法激活受体细胞，使其完成减数分裂进程。6电刺激促融使供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎。4、将供体细胞注入去核卵母细胞3、显微操作去除卵母细胞中的核2、受体卵母细胞的采集与体外培养7、胚胎移植入代孕母牛体内8、妊娠分娩与供体遗传物质基础相同的犊牛。5.体细胞核移植技术的应用前景(1)、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁殖(2)、保护濒危动物(3)、生产医用蛋白(4)、作为异种移植的供体6.体细胞核移植技术存在的问题看书P49-50页1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。概念过程原理动物细胞培养条件应用核移植技术动物细胞培养和核移植概念原理分类体细胞核移植过程前景、问题小结动物细胞融合与1、定义：指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。三、动物细胞融合◆杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞成为杂交细胞。

细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合

受精作用2、原理：细胞膜的流动性3、诱导方法：物理方法：振动、电激、离心化学方法：聚乙二醇（PEG）生物方法：（最常用、特有）灭活的病毒（无感染性对各种动物细胞不造成破坏，保留抗原活性可使不同动物细胞进行融合）生物法：灭活的病毒诱导融合.(利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。)病毒颗粒黏附细胞表面细胞膜连接细胞膜被病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细胞思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？

因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。4、结果：形成杂交细胞杂交细胞特点？具有两种细胞的遗传特征原因是具有两种细胞的遗传物质5、意义：可突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能6、应用：制备单克隆抗体动物细胞融合1、既然是抗体，就涉及到我们前面学过的哪一部分内容？

2、抗体的化学本质是什么？

3、抗体是由什么细胞产生的？

4、其他细胞能产生抗体吗？为什么？

5、B细胞在什么情况下增殖分化为浆细胞分泌相应抗体？

6、还有其他情况吗？四、单克隆抗体的制备（1）传统抗体的生产方法再从动物血清中分离抗体（2）该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。输入浆细胞动物体内

某抗体

某抗原1、传统抗体的获得怎样才能获得单克隆抗体？提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使浆细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖杂种细胞动物细胞培养技术（1）、设计方案：动物细胞融合创始人：米尔斯坦单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量繁殖2、单克隆抗体的制备米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。（2）、单克隆抗体制备的原理◆利用

产生特异性抗体的功能。◆利用

无限增殖的特性。◆利用

技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。◆利用

技术大量培养杂交瘤细胞。浆细胞骨髓瘤细胞动物细胞融合动物细胞培养人们获得抗体的传统方法是?将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体这种方法的缺点是什么?效率低，产量有限，纯度低，动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。运用已学知识，设想怎样获得单一类型的抗体？能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢？B淋巴细胞在体外不能无限增殖。四、单克隆抗体的制备思考单克隆抗体的制备—极富创造性的方案将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。(3).单克隆抗体McAb（概念）由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),

形成基因表达相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。

一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖杂种细胞动物细胞培养技术2.设计思路：动物细胞融合单克隆细胞系既能产生特异性抗体,又能大量繁殖单克隆抗体的制备单克隆抗体(3)、单克隆抗体制备过程杂交细胞灭活的病毒等手段小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞经免疫的小鼠提取杂交瘤细胞第一次筛选用特定的选择性培养基第二次筛选能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备分离注射细胞融合提取小鼠B淋巴细胞骨髓瘤细胞②专一抗体检测克隆化培养单克隆抗体特定抗原多种细胞能产生特异性抗体的杂交瘤细胞用选择性培养基B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞杂交瘤细胞(B-瘤细胞)体外培养小鼠腹腔内增殖B细胞瘤细胞筛选①多孔培养板1、抗原刺激的作用3、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合?B淋巴细胞－－分泌特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖小结：4、融合方法5、两两融合细胞种类2、从小鼠何处获取B淋巴细胞？6、杂交瘤细胞的特点7、两次筛选方法、目的继承双亲细胞的遗传物质，既能产生专一抗体，又能无限增殖第一次特定的选择性培养基杂交瘤细胞（除去什么细胞？）第二次克隆化培养和抗体检测产生专一抗体的杂交瘤细胞（除去什么细胞？）单克隆抗体的制备经过了几次筛选？

※知识拓展：如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？

融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。8、单克隆抗体的特点：9、骨髓瘤细胞是癌细胞吗?有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞，具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。10、此过程应用了什么技术：动物细胞融合、动物细胞培养特异性强，灵敏度高单克隆抗体的制备过程中：单克隆指什么？

11、单克隆抗体含义：克隆单个杂交瘤细胞所产生的抗体，即为单克隆抗体，其本质是蛋白质。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。动物特异性免疫分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意B淋巴细胞是一个系列。（B1,B2,B3,---Bn）细胞融合——三种融合方式:（BB;BG;GG）第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞（只有BG杂交瘤细胞存活。但BG杂交瘤细胞也是一个系列：如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培养基上不能存活。）第二次筛选：在“多孔培养板上”培养杂交瘤细胞系列

，每孔只放一个杂交瘤细胞。“克隆化培养”每个杂交瘤细胞，并进行“单一抗体检测”，“检测阳性”的孔内即是所需要的杂交瘤细胞。选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。提取单克隆抗体。1、单抗的制备过程要点：单克隆抗体的制备制备过程：1.注射抗原的目的是什么？2.诱导其融合的方法有哪些？3.融合后培养液中有几种细胞？4.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点？5.为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选？6.大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法?3）、为何要进行两次筛选？4）、如何进行第2次筛选？培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤细胞。第1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。问题强化：1）、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体(1)作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并与一定抗原发生特异性结合

3单克隆抗体的应用优点：准确、高效、简易、快速（2）用于治疗疾病和运载药物：主要用于癌症治疗，可制成“生物导弹”生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素或化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。）优点：位置准确、疗效高、副作用小）(1)作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并与一定抗原发生特异性结合

3单克隆抗体的应用优点：准确、高效、简易、快速(2)用于治疗疾病和运载药物①主要用于癌症治疗，②也可运载药物，如“生物导弹”）（导向作用，作为载体，生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）优点：位置准确、疗效高、副作用小）总结两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法

——灭活病毒一个新细胞——杂交瘤细胞一个优势——单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势单克隆抗体主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较动物细胞工程动物细胞融合动物细胞培养（基础）生产单克隆抗体概念过程应用应用细胞核移植概念过程应用构建知识网络植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞工程单克隆抗体细胞融合动物细胞培养核移植植物细胞工程例题1：1975年，英国剑桥大学分子生物学实验室的科勒和米尔斯坦，把小鼠的淋巴细胞（脾细胞）和小鼠的骨髓瘤细胞融合起来，成为杂交瘤细胞，实现在体外大量生产抗体的目的。实验过程如图所示。(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜

。(2)单克隆抗体的准确定义应为()A．一类特殊抗体B．无性繁殖系

C．单一抗体细胞的无性繁殖第产生的抗体

D．单一抗体细胞的有性繁殖系产生的抗体(3)杂交瘤细胞繁殖进行的是_______分裂，其遗传性状__________。(4)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”这是利用了

_____________

。具有一定的流动性C有丝不变抗体能与抗原发生特异性结合的特点

[例题2]（1）在用动物细胞融合技术制备单克隆抗体时，将抗原注射到小鼠体内，可获得(多选)

（

）

A．T淋巴细胞B．效应B淋巴细胞

C．抗体D．记忆细胞（2）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是(多选)（）

A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导

B．融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体

C．体外培养时，一个B淋巴细胞可以产生一种抗体，但不能无限增殖

D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显

BCD

AC