临床血液学检验技术：1血发生及其调控

《临床血液学检验技术》是以血液学的理论为基础，以临床血液病为研究对象，以化学、物理、免疫和分子生物学等检验技术和方法为手段，来分析和研究血液、造血器官的病理变化，从而为临床血液病的诊断、治疗和预后提供实验依据。既属于血液学，又属于检验医学。理论课：36学时，1-16周，每周一下午。实验课：64学时，1-16周，每周四下午。带上理论教材和实验指导！造血及造血调控第一节血细胞的起源与造血器官血液学发展史microscop－RBC1673y

－WBC1749y

－PLT1842y19世纪60年代认识到骨髓有幼稚血细胞，成熟后进入血液。骨髓穿刺术－1929y正常成人外周血象、髓象一个50Kg体重的成年人每天约生成：1400亿个RBC750亿个WBC1200亿个PLT造血---hematopoiesis定义：造血是指血细胞在造血系统生成和发育的过程，是生命活动的重要部分。造血主要涉及造血器官、造血干/祖细胞以及造血调控等。造血器官定义：能够生成并支持造血细胞分化、发育和成熟的组织器官称为造血器官，主要包括骨髓、胸腺、淋巴结、肝、脾等。造血器官的演变造血过程分：1.胚胎期造血2.出生后造血

胚胎期造血器官

1.中胚叶造血：卵黄囊，2w-9w2.肝脏造血：肝、脾、淋巴结，6w-7m3.骨髓造血：14w-出生后胚胎期造血特点胎儿发育时期不同，造血器官不同。经历了卵黄囊造血期－肝造血期－骨髓造血期各器官造血不是截然分开，而是此消彼长，互为交替。血细胞生成顺序：红系粒系巨核系淋巴系和单核系。出生后造血器官1.骨髓造血2.淋巴造血骨髓:骨骼內海绵状组织骨髓－出生后最重要的造血器官功能：骨髓是出生后唯一产生红、粒、血小板的场所，也可产生淋巴、单核细胞。结构：骨髓分红髓和黄髓。P12图1-3红髓的特点（1）分布（2）结构1.胸腺2.脾3.淋巴结淋巴器官造血P12髓外造血P13在某些病理情况下，胎儿出生2个月后其骨髓以外的肝、脾、淋巴结等组织又恢复其制造红、粒和血小板的造血功能。髓外造血多见于儿童，是机体对血细胞需求特别增高或对骨髓造血障碍的一种代偿。第二节造血干细胞和造血祖细胞P15一切血细胞都来源于造血干细胞

什么是干细胞？干细胞(stemcells)

：是一类具有多向分化潜能和自我复制功能的早期未分化细胞,在特定的条件下,它可以分化成不同的功能细胞,形成多种组织和器官。ExamplesofStemCellsFoundinAdultSomaticTissues

按照生存阶段干细胞分为：

胚胎干细胞(embryonicstemcell,ESC)

成体干细胞(adultstemcell,ASC)。造血干细胞间充质干细胞血管干细胞造血干细胞来自胚胎干细胞

胚胎干细胞是胚胎发育早期囊胚（受精后约5－7天）的内细胞团中未分化的细胞，它具有高度的分化潜能，可进一步分裂、分化发育成为完整个体，可以无限增殖并分化成为多种细胞类型，从而可以进一步形成机体的任何组织或器官。一、造血干细胞

(hemotopoieticstemcell,HSC)小鼠HSC的研究人类HSC的研究

HSC的定义小鼠造血干细胞的研究1961年由Till&McCulloch建立的小鼠脾结节实验技术等一系列小鼠体内实验证明了小鼠体内存在造血干细胞。小鼠HSC体内实验的研究（一）结论：小鼠骨髓中存在血液细胞的祖先，在特殊情况下，可先在脾内形成造血结节（CFU-S），而后促进照射小鼠造血功能的恢复。小鼠HSC体内实验的研究（二）结论：转移的脾结节生成细胞（CFC-S）具有重建照射小鼠全部造血功能的能力。脾结节实验中相关名称的介绍（CFU-S:ColonyFormingUnit－Spleen）脾结节生成单位：代表每一个脾结节（CFC-S:ColonyFormingCell－Spleen）脾结节生成细胞：能够生成脾结节的原始细胞拉斯克奖素有“美国的诺贝尔奖”之美誉，是美国最具声望的生物医学奖项。

2005年的拉斯克奖

BasicMedicalResearch:Foringeniousexperimentsthatfirstidentifiedastemcell-theblood-formingstemcell-whichsetthestageforallcurrentresearchonadultandembryonicstemcells.

UniversityofToronto,OntarioCancerInstitute,Ontario,Canada

人类造血干细胞的实验研究体外半固体培养技术培养人造血祖细胞CFU-GM用流式细胞仪测CD34+细胞（CD34抗原：是分离纯化HSC的主要标志，见P16－17

）。免疫缺陷小鼠体内重建造血。什么是造血干细胞？造血干细胞是由胚胎干细胞发育而来，具有高度自我更新和多向分化能力，并且在造血组织中含量极少，形态难以辨认，外观似小淋巴细胞的一群异质性的细胞群体。P16造血干细胞含量CD34＋细胞占有核细胞比例：骨髓：0.5％－1.5％外周血：0.05％－0.15％脐血：0.1％每10000到15000个骨髓细胞中才能找到

1个干细胞；在血液中则降到1/100000。造血干细胞的性质Self-renewal－自我更新MultilineageDifferentiation－多向分化G0phase－G0期造血干细胞的造血功能自我更新能力保持了干细胞自身数量和质量的相对稳定，维持正常机体造血功能的恒定，保证血细胞的不断更新。多向分化能力补充了外周血循环中衰老和死亡的各系血细胞数量。血细胞生成增殖分化干细胞增殖：保证干细胞数量分化：形成各系血细胞干细胞Happenningofacuteleukemia白血病骨髓象指一类由造血干细胞分化而来但失去了自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群。它介于造血干细胞与形态学可辨认的前体细胞之间的由多向分化到单向分化的过渡阶段细胞。

二、造血祖细胞

(hematopoieticprogenitorcell,HPC)CFU-ColonyFormingUnit

集落形成单位CFU-GMCFU-E

1.多向祖细胞：CFU-HPP，LTCIC，CFU-GEMM（CFU-MIX），CFU-GM2.单向祖细胞：BFU-E，CFU-E，

CFU-G，CFU-M，CFU-Eo，CFU-Bas,CFU-Meg,CFU-TL，CFU-BL造血祖细胞的种类粒系：CD33、CD13单核系：CD14淋巴系：CD19、CD7NK细胞系：CD56红系：CD71巨核系：CD41、CD61造血祖细胞表面标志:CD34+Lin＋三、骨髓间充质干细胞Mesenchymalstemcell,MSC分化为：成骨细胞，脂肪细胞，心肌细胞和血管内皮细胞等。自学P17第三节血细胞的发育P18造血干细胞造血祖细胞骨髓细胞髓血屏障

血细胞

骨髓外周血

造血细胞的生长发育包括：增殖分化成熟释放1.增殖：通过有丝分裂增加细胞数量除HSC外各阶段细胞皆为对称性地有丝分裂巨核细胞：多倍体2.分化：是发育过程中失去某些潜能同时又获得新功能的过程。3.成熟指由原始经幼稚到成熟细胞的发育过程

4.血细胞的释放髓血屏障：marrowbloodbarrier,MBBMBB结构：内皮层、基膜和外膜层。MBB功能：成熟血细胞出髓干细胞回髓（homing,归巢）血细胞的命名P201.红细胞系统2.粒细胞系统3.巨核细胞系统4.单核细胞系统5.淋巴细胞系统6.浆细胞系统血细胞发育成熟的一般规律1.血细胞形态演变规律（实验课体会）胞体、胞浆、胞核、核仁、核染色质、颗粒。2.血细胞免疫表型分化特征（了解）

P20：CD分子

一、造血微环境(HIM)P13

由骨髓基质细胞和细胞外基质构成，包括骨髓微血管系统、末梢神经、骨髓基质细胞以及基质细胞分泌的细胞因子，是造血干细胞生长、分化和自我更新的场所。

HIM:hematopoieticmicroenvironment第三节造血调控

HIM组成1.骨髓微血管系统：调控血细胞的释放。

2.基质细胞：黏附造血干细胞并支持和调控造血细胞定居、分化、增殖、成熟的重要场所。

3.细胞外基质：糖蛋白，蛋白多糖和胶原。调节细胞黏附和增殖分化。

4.基质细胞分泌因子：因子-受体

骨髓血窦及造血微环境模式图1.造血生长因子：SCF(干细胞因子)Flt-3配体（FL）集落刺激因子（CSF）

EPO

白介素（IL）

TPO二、造血的体液调控P30造血负调控：

TGF-β