临床输血学检验(技术)：7血液成分制备保存和临床应用

第八章血液成分的制备、保存和临床应用临床血液教研室真正使输血变得容易的人－卢因森

纽约的卢因森博士发明了实用的枸橼酸钠抗凝剂。方便献血；方便输血；方便保存；方便运输；使建立血库成为可能。第一节血液成分制备为什么要进行血液成分的制备？

全血（wholeblood，WB）制品是将人身体中直接采集得到的血液混合了一定比例抗凝剂的血液制品。百年历史，现直接输注全血的越来越少，被成份输血代替。现主要用于血液成分的分离与加工全血并不全的理由1.血液离开血循环，发生“保存损害”2.保存液是针对红细胞设计的。3.血小板需要在22±2℃保存4.粒细胞命短，难以保存。5.凝血因子FⅤ、FⅧ不稳定，需要-20℃以下保存。6.全血除红细胞外，其它成分浓度低。输注全血的适应证

1．急性大量出血。血容量不足（失去30％）且有进行性失血的休克病人。

2．全血置换

成分输血bloodcomponenttherapy：把血液中各种有效成分(红细胞、血小板和血浆)，用先进的技术加以分离、提纯，分别制成高浓度、高纯度、低容量的各种成分制剂，临床根据病情需要，按照缺什么补什么的原则输用，来达到治疗病人的目的。P120血液成分制备Bloodcomponentpreparation定义：在规定的时间和温度范围内，将采集出来的全血用物理方法分离成体积小、纯度高、临床疗效好、不良反应少的单一血液成分（如红细胞、血小板、血浆等）的技术。成分血成分血是指通过离心、过滤等方法制备的治疗性血液成分。一份全血通常可分离2~4份有临床治疗价值的血液成分。成分输血的优点1.制剂容量小，纯度高，治疗效果好2．针对性强，不良反应少．3．减少输血传播性疾病的发生4．便于保存，使用方便5．一血多用，节约血液资源血液成分的种类血细胞成份：

红细胞制剂粒细胞制剂血小板制剂血浆成分血浆蛋白制品：白蛋白，免疫球蛋白等。成分血制备方法制备方式有2种1.手工制备：将采血袋采集的全血分离制成一种或几种血液成分，如悬浮红细胞等；2.使用血细胞分离机从符合要求的献血者血液中采集出一种或几种血液成分而制备成单采成分血，如单采血小板等。一、以采集的全血为原料血制备

成分血从全血中分离制备成分血主要使用多联塑料采血袋采集的全血，用大容量低温离心机来完成。根据血液中不同成分的相对密度不同而将其分离。血液成分制备原理

（离心）细胞相对密度红细胞1.090－1.111粒细胞1.080－1.095淋巴细胞1.050－1.078血小板1.030－1.060血浆1.025－1.030手工法制备成分血虹吸或挤压的方法来制备1、多联塑料采血袋：采血袋是使用医用聚氯乙烯（PVC）血袋材料制成，无毒、无菌，透明度高，且血袋在血液成分制备的过程中，不会变形，低温贮存后，不会破裂，是一种安全、放心的耗材。单袋，二联袋，三联袋，四联袋，可采血200-400ml.1950年：CarlWaiter发明并获得了塑料采血容器的专利。为成分输血提供了条件。高频热合机2、大容量低温离心机二、血细胞分离机采集单采成分血由于各类成分血在临床的应用数量和比例是有差别的，因此，采用全血来制备各类成分血这种方式无法满足临床的要求，这促使人们去发展一种可以有选择的采集某种成分血的技术。单采利用血细胞分离机从献血者体内采出血液并连续分出预期的成分血，同时其他血液成分还输给献血者，简称为单采（apheresis）。20世纪80年代美国和欧洲大公司研发的自动化在线，即通过静脉通路将被采集者的身体与血细胞分离机相连，形成一个密闭的循环。

第二节红细胞成分血的制备与保存

P121红细胞成分血是指以全血内红细胞为主要组分的一类成分血。临床上需要输血的患者80%以上需要补充红细胞。红细胞的比重为1.090－1.111采用大容量冷冻离心机分离红细胞制剂浓缩红细胞悬浮红细胞去白细胞红细胞洗涤红细胞冰冻解冻去甘油红细胞辐照红细胞年轻红细胞

是成分输血的主要组成部分。临床上红细胞输注是贫血患者的一种辅助性替代治疗手段，不能作为根治贫血的手段或盲目用于提高血红蛋白的水平。

浓缩红细胞

concentratedredbloodcells,CRBC

定义：浓缩红细胞也称压积红细胞或少浆血，是将采集到多联塑料血袋内的全血中的大部分血浆分离出后剩余部分所制成的红细胞成分血。是早期的红细胞制品。CRBC可以在全血有效保存期内的任何时间分离出部分血浆制备而成。CRBC的特点含有全血中的全部红细胞、白细胞、大部分血小板和部分血浆。具有补充红细胞的作用。临床输用时不得与任何药物在同一输液器内输注。红细胞比容为0.65-0.80,血浆残留量约30%,该制品由于粘滞度大，输注不够顺畅，已逐渐被含添加剂的红细胞悬液所替代。保存：保存温度为2℃～6℃，含ACD-B、CPD血液保养液的浓缩红细胞保存期为21天；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液保养液的浓缩红细胞保存期为35天。2.悬浮红细胞

suspendedredbloodcells,SRBC定义：将采集到多联塑料血袋内的全血中的大部分血浆分离出后，剩余部分加入红细胞添加液制成的红细胞成分血。红细胞悬液的红细胞比容为0.50-0.65。该制品具有保存期长（可达35天）、输注顺畅的优点。分浆夹表中红细胞添加液的各“种类”与“对应的全血保养液”呈一一对应关系，不能交叉应用，即全血保养液如果为ACD-B，那么在制备悬浮红细胞时只能添加MAP。保存：保存温度为2～6℃，MAP、SAGM添加液红细胞保存期为35天，AS系列添加液红细胞保存期为42天。SRBC的特点是目前国内外临床应用最为广泛的一种红细胞制品。适用于大多数需要补充红细胞和提高血液携氧能力的患者。含有全血中的全部红细胞、一定量白细胞、血小板、少量血浆和保存液的混悬液。何时选择悬浮红细胞输注？（1）血红蛋白＞100g/L，可以不输血。（2）血红蛋白＜70g/L，应考虑输血。不应仅仅以Hb水平作为指征，还应结合患者临床情况综合评估考虑。在存在输血指征的情况下，最适合的方法是给予2U红细胞输注并评估临床疗效。

3.去白细胞红细胞

leukocyte-reducedredbloodcells,LRBC定义：使用白细胞过滤器清除悬浮红细胞中几乎所有的白细胞，并使残留在悬浮红细胞中的白细胞数量低于一定数值的红细胞成分血；或使用带有白细胞过滤器的多联塑料血袋采集全血，并通过白细胞过滤器清除全血中几乎所有的白细胞，将该去白细胞全血中的大部分血浆分离出后，向剩余物内加入红细胞添加液制成的红细胞成分血。为什么要去除白细胞？1.减免白细胞介导的同种免疫的发生。提高输血疗效，降低输血风险。临床常见的非溶血性发热输血反应、血小板输注无效等，55%-75%是因为输入异体血液中的白细胞所致。2.降低白细胞携带病毒性传染病的输入传播。血液制品中白细胞数量与输血副作用的相关性白细胞数量作用细胞副作用≥109粒细胞、单核细胞非溶血性发热反应≥107单核细胞、B淋巴细胞HLA免疫反应≥108CD4+HTLV-Ⅰ感染≥107淋巴细胞、粒细胞、单核细胞CMV感染≥107CD4+、CD8+TA-GVHD去除白细胞的方法过滤法：经血液过滤器制备。高效去除白细胞可达99％的白细胞，红细胞回收率大于90％，血小板回收率大于85％。白细胞滤除：将采集全血进行悬挂，通过压力差，使全血通过白细胞过滤器过滤后，转移至一个空袋中。核对血袋上的献血条码，如一致则用热合机热合封闭连接管，移去空的全血袋及白细胞过滤器，产生带有1袋去白细胞全血的多联血袋。白细胞滤除要在血液采集后48小时内完成。用带有1袋去白细胞全血的多联血袋制备成去白细胞悬浮红细胞，方法同“悬浮红细胞”

去除99%以上的白细胞1.残余白细胞：200ml全血制备：≤2.5×106300ml全血制备：≤3.8×106400ml全血制备：≤5.0×1062.保存同“悬浮红细胞”。

4.洗涤红细胞

washedredbloodcells,WRBC定义：采用物理方式在无菌条件下将保存期内的全血、悬浮红细胞用大量等渗溶液洗涤，去除几乎所有血浆成分和部分非红细胞成分，并将红细胞悬浮在NaCL注射液或红细胞添加液中所制成的红细胞成分血。不仅降低白细胞和血小板，而且使血浆蛋白含量降低，是一种减除白细胞与血浆蛋白的良好方法。适用于有输血过敏史、自身免疫性贫血等病人。盐水联袋式洗涤红细胞红细胞回收率：≥70%白细胞清除率：≥80%血浆蛋白清除率：≥98%保存：保存温度为2～6℃，如果在开放环境制备或最后以生理盐水混悬，洗涤红细胞保存期为24小时。如果是在闭合无菌环境中制备且最后以红细胞保存液混悬，洗涤红细胞保存期与洗涤前的红细胞悬液相同。5.冰冻红细胞

frozenredbloodcells,FRBC

最大优点：长期保存定义：采用特定的方法将自采集日期6天内全血或悬浮红细胞中的红细胞分离出，并将一定浓度和容量的甘油与其混合后，使用速冻设备进行速冻或直接置于-65℃以下的条件下保存的红细胞成分血，称为冰冻红细胞。

冰冻红细胞制备与保存技术多应用于稀有血型（目前主要是指RhD阴性）红细胞保存，是临床稀有血型紧急用血的重要保障措施。目前，冰冻红细胞的制备方法有两种：高浓度甘油(40%)慢冻法和低浓度甘油(20%)超速冷冻法，其中前者最为常用。冰冻解冻去甘油红细胞采用特定的方法将冰冻红细胞融解后，清除几乎所有的甘油，并将红细胞悬浮于一定量的0.9%氯化钠注射液中的红细胞成分血，属于红细胞成分血的一种。甘油的洗脱方法一般分为盐水洗涤法和糖液洗涤法，前者较为常用。保存：含20%甘油的冰冻红细胞在-120℃以下保存；含40%甘油的冰冻红细胞在-65℃以下保存，保存期为自采血之日起10年；冰冻解冻去甘油红细胞的保存温度为2～6℃，保存期为24小时，应尽早使用。6.年轻红细胞

youngredbloodcells,YRBC是一种新的红细胞制品。国内尚处于研究应用阶段。是一种具有较多网织红细胞、酶活性相对较高、平均细胞年龄较小的红细胞成分。由于年轻红细胞体积稍大，比重较大，可用血细胞分离机制备。YRBC的特点新生红细胞的平均年龄为30～40天。由于新生红细胞输入病人体内后的存活时间较长（半存活期为45天，而成熟红细胞为29天），可以延长输血的效果，延长输血的间隔时间，减少输血的次数。目前国外主要用于需要长期输血的重型β海洋性贫血病人，作为延迟继发性血色病发生的一种措施。保存：同“全血”。7.辐照红细胞

irradiantredbloodcells

用电离辐射的方法（包括60Co、137Cs等）灭活红细胞制品中的活性淋巴细胞，以预防输血相关性移植物抗宿主病（TA-GVHD）的发生。该制品主要适用于临床上免疫功能障碍的患者，特别是如白血病、淋巴瘤、再生障碍性贫血、接受大剂量化疗或放射治疗的患者，此外还有早产儿、低体重新生儿等免疫功能尚未发育完善者。辐照红细胞的特点γ射线作用于细胞核的DNA，使淋巴细胞丧失有丝分裂的活性或停止增生。红细胞经γ射线照射后，淋巴细胞完全失去活性或死亡，而辐照后的红细胞并没有放射活性。照射剂量：25~30Gy的γ射线照射红细胞，完全可以防止TA-GVHD的发生。不宜长时间贮存。红细胞制剂的保存各类红细胞制品（除FRBC）保存于2~6℃的冰箱中。二、白细胞制剂使用频度不及红细胞和血小板的单采（抗生素和GM-CSF等因子的使用）手工制备白细胞已被机器单采代替机器单采白细胞：可给单采者输入羟乙基淀粉以增加粒、红细胞的分离度。白细胞为室温保存，24小时保存期三、血小板制剂血小板：是血液有形成分中相对密度最小的一种血细胞，约为1.040.为什么需要单独输注血小板？

因为血小板在新鲜血液中，活性下降很快，6h后大约只有40%存活，12h后只有20%存活。血小板保存条件与全血不同，要求在20-24℃

，不停振荡保存。所以认为“全血中含有所需的各种血液成分，在输全血的同时即能补充所需的血小板”，这种想法是认识上的误区。血小板制品的种类手工制备和血液成分分离机：浓缩血小板制剂机器单采：单采血小板浓缩血小板

concentratedplatelet,PC定义：采集后置于室温保存和运输的全血于采集后6小时内，或采集后置于20～24℃保存和运输的全血于24小时内，在室温条件下将血小板分离出，并悬浮于一定量血浆内的成分血。浓缩血小板的制备方法1.采集新鲜全血，4~6h分离富血小板血浆（PRP），进一步分离浓缩血小板，简称PRP法。2.从白膜中提取血小板，简称白膜法。3.机分法：采集全血，用血细胞分离机分离浓缩血小板。浓缩血小板的不足毎400ml全血可提取4.8×1010个血小板，1位成年患者1次输注治疗剂量＞3×1011，因此，每次需要输注400ml全血制备的浓缩血小板6~8袋。临床常采用多个浓缩血小板给一个患者输注才能达到治疗目的。但易产生同种免疫。2.单采血小板单采血小板：使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血小板分离并悬浮于一定量血浆内的单采成分血。含有的血小板数量≥2.5×1011每袋。每份单采血小板约相当于10袋常规浓缩血小板的总量。与浓缩血小板比较，单采血小板最大的优点是相对安全，受血者只需要接受一个献血者的血小板即可达到治疗量，可以降低发生HLA同种免疫反应和输血传染病的风险几率。单采血小板的条件机采成分血需要专门的设备和场地，所以机采捐血一般都在条件较好的血液中心或血站进行；一般在临床需要时才采集，故捐献成份血的志愿者需要事先填写好《志愿捐献成份血登记表》，等候血液中心的预约通知。

单采血小板对献血者的要求捐献者除符合规定捐献全血的检查标准外，还需符合以下要求：（1）血液要求：红细胞比容（HCT）≥0.36采前血小板（PLT）计数≥150×109/L且＜450×109/L，预测采后血小板≥100×109/L。（2）时间要求：单采血小板间隔时间为1个月。每次采集过程需要1.0小时～1.5小时。（3）献血量要求：每次可献1个至2个治疗单位，或者1个治疗单位及不超过200ml血浆。全年血小板和血浆采集总量不超过10L。（4）其它要求：①口服抑制或损害血小板功能药物（如含阿司匹林类药物）停药后超过5天者；②捐献者应肘静脉粗大，充盈良好；③采集前宜吃清淡食物（如稀饭、馒头），切忌空腹献血。单采血小板的特点1.品质优良，临床输注方便浓度大，纯度高，白细胞污染率低，红细胞含量极少。1位献血者的血小板给1位患者输注。减少了同种抗体的产生。2.节省献血者资源：

1位献血者的血小板给1位患者输注血小板制剂的保存血小板水平振荡保存于20～24℃的温箱中保存：温度为20～24℃，并持续轻缓振摇。储存于普通血袋时保存期24小时，储存于血小板专用血袋时保存期5天；当密闭系统变为开放系统，保存期为6小时，且不超过原保存期。单采血小板对身体有什么影响吗？

在捐献成分血的过程中，捐献者的血液都在经严格消毒的密闭管道套材中循环和分离，每位捐血者每次使用的都是一次性全新套材，绝对不会造成交叉污染。血小板输注

platelettransfusion：针对血小板数量或功能异常的患者输注血小板，以达到止血或预防出血的目的。血小板输注的分类治疗性血小板输注:血小板计数低于＜50×109/L预防性血小板输注（占临床大部分）血小板输注要求：

①ABO血型相合②Rh阴性患者需要输注Rh阴性血小板；血小板输注的适应症出血：

目标是使血小板计数＞75×109/L

在多发性复合伤、眼部或中枢神经系统损伤，要使血小板计数＞100×109/L.预防：血小板计数＜10×109/L（长期骨髓造血功能衰竭而病情稳定的患者不适用）血小板计数＜20×109/L，且存在其他的出血风险因素（如败血症）输注血小板的相对禁忌症1.血栓性血小板减少性紫癜（TTP）2.免疫性血小板减少（ITP）3.药物诱发的血小板减少和脾亢、菌血症等引起的血小板减少。成分献血与捐献全血的简单比较捐献全血成分献血（富含血小板的血浆）采集量200ml或400ml250ml－270ml采集时间5分钟左右1小时左右恢复时间2周左右2－3天献血间隔期六个月4周根据《全国无偿献血表彰奖励办法》，国家“无偿献血奉献奖”分为金、银、铜奖，分别奖励自愿无偿献血达到40次、30次、20次的无偿献血者。无偿成分献血1次则按照献全血4次（以每次200毫升计算）计算。四、血浆制备和保存

什么是血浆？指抗凝全血经离心去除细胞有形成分后的淡黄色液体，含有水、电解质和蛋白质，主要是白蛋白、免疫球蛋白和各种凝血因子。新鲜冰冻血浆（FFP

）：freshfrozenplasma1.定义：在全血采集后6小时（保养液为ACD）或8小时（保养液为CPD或CPDA-1）内，在全封闭的条件下，将分离出的新鲜液体血浆速冻呈固态的成分血。2．保存保存温度低于-18℃，保存期为自采血之日起1年，解冻后2～6℃保存，应24小时内输注。何时选择FFP输注？输注FFP的主要作用是补充凝血因子

并不推荐常规使用FFP来纠正实验室凝血异常，除了：1.出血（PT延长、APTT延长1.5倍）2.计划侵入性操作3.手术剂量：10-15ml/kg血浆输注的注意事项原则上是ABO同型输注，在缺乏同型血浆时，也可考虑进行ABO不同型相容性输注。冰冻血浆1．定义采用特定的方法在全血有效期内，将血浆分离出并冰冻呈固态的成分血，或从新鲜冰冻血浆中分离出冷沉淀凝血因子后将剩余部分冰冻呈固态的成分血。2．制备方法（1）保存期内的全血，按照“浓缩红细胞”或“悬浮红细胞”制备方法分离出血浆并冰冻呈固态。（2）新鲜冰冻血浆在有效期内分离出冷沉淀凝血因子后，将剩余的血浆冰冻呈固态。（3）新鲜冰冻血浆超过1年保存期后自然转为冰冻血浆。3．保存保存温度低于-18℃。保存期为自血液采集之日起4年，解冻后2～6℃保存，应24小时内输注。单采新鲜冰冻血浆1．定义使用血细胞分离机在全封闭的条件下自动将符合要求的献血者血液中的血浆分离出并在6