宫颈癌基因南阳讲课

宫颈癌基因南阳讲课第一页，共三十二页，2022年，8月28日

HPV癌基因E6/E7mRNA

主要内容

报告解读、处理建议1

临床意义、适用范围

32第二页，共三十二页，2022年，8月28日

主要内容1

HPV癌基因E6/E7mRNA

1第三页，共三十二页，2022年，8月28日2.型别：120多种（依据L1DNA）1.结构：

外壳蛋白：L1蛋白（72个五聚体），

L2蛋白（12个）。

内部遗传物质：闭环、双链DNA。

（不含RNA）3.分类：依据生物特性、致癌性

高危型HPV(HR-HPV)：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、66

低危型HPV（LR-HPV）：6、11、42、43、44

什么是E6/E7mRNA?第四页，共三十二页，2022年，8月28日L1:主要衣壳蛋白，是疫苗的主要成分。

L2:次要衣壳蛋白，是市售抗体的主要识别位点。E4：结合并破坏细胞角蛋白网，形成挖空细胞的外观。E2：负性调节E6和E7，维持凋亡和细胞周期的调控。通常在病毒发生整合时失活。HPV的主要致癌基因E6通过抑制p53而阻断凋亡E7通过抑制pRB使细胞周期失控。XHPV的基因片段及功能E6/E7mRNA?第五页，共三十二页，2022年，8月28日高危亚型HPV感染宫颈上皮细胞，将产生两种癌蛋白：E6和E7蛋白。癌蛋白可与宿主细胞的细胞周期调节蛋白（抑癌蛋白如P53、RB等）相结合，导致细胞周期控制失常，发生癌变。

（人民卫生出版社、妇产科学、2004年1月第6版）致癌原理E6/E7mRNA与宫颈癌的关系E6、E7mRNA--是宫颈病变开始和进展的必由之路!第六页，共三十二页，2022年，8月28日HPV感染在宫颈细胞内的表达过程基因改变早于细胞改变第七页，共三十二页，2022年，8月28日E6/E7mRNA：是致癌基因E6/E7表达的直接产物；是最终致癌物-E6/E7癌蛋白合成的模板；

是宫颈病变开始和进展的必要条件！

小结第八页，共三十二页，2022年，8月28日

主要内容1

E6/E7mRNA的临床意义与适用范围

2第九页，共三十二页，2022年，8月28日高危的HPV感染宫颈上皮细胞癌基因E6、E7mRNAE6、E7癌蛋白E6、E7癌蛋白与抑癌蛋白P53、RB等结合宫颈细胞CIN或癌变癌基因E6、E7DNAHPV病毒学检测病毒癌基因学检测细胞形态学检测HPVL1DNAHPVL1mRNAHPVL1蛋白HPV复制繁殖HPV感染后演变路径及宫颈癌筛查&诊断方法应用第十页，共三十二页，2022年，8月28日检测方法检测靶标主要检测意义巴氏涂片

宫颈上皮细胞提示宫颈细胞已发生的病变情况，筛查的基本方法。主要用于评估现阶段宫颈（病变）情况。液基细胞学（TCT）HPV病毒学HPV

病毒DNA提示是否有病毒感染。主要用于评估现阶段宫颈是否有病毒感染。癌基因E6/E7mRNA检测病毒癌基因E6/E7mRNA提示病毒癌基因已经转录表达。可用于了解人体宫颈细胞或组织癌变的发展趋势。阴道镜检宫颈内表面提示已经发展到宫颈表面的病变及其位置。主要是更直接辅助检查现阶段宫颈（病变）情况。宫颈活检宫颈组织提示宫颈组织病变情况，确诊金标准。临床意义----特异性强、阳性预测值高第十一页，共三十二页，2022年，8月28日正常宫颈感染HPV轻度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)中度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ)高度宫颈上皮内瘤变(CINⅢ)原位癌浸润癌依靠免疫力80%自行消退06-18个月至少2年后5-10年后一过性感染持续性感染62%转为正常16%进一步进展22%维持原状54%转为正常30%进一步进展16%维持原状100%HPV感染致宫颈癌模式图什么样的感染者会进一步进展呢？哪种检测方法能提示？第十二页，共三十二页，2022年，8月28日E6/E7mRNA检测1、发现已感染HPV，且癌基因已经表达的宫颈病变高风险者,特异性强、阳性预测值高；2、弥补：细胞学检测敏感性；

HPV检测特异性；阴道镜/活检的漏检等。3、预测发展趋势，指导后续治疗、随访。

提供关键的癌变信息，治疗更及时，预防更有效！

小结第十三页，共三十二页，2022年，8月28日适用范围（不局限于30岁以上人群）：

1、筛查：细胞学+E6/E7mRNA检测；

2、辅助诊断：

（1）细胞学+E6/E7mRNA检测；（2）若HPV（+）→E6/E7mRNA检测；（3）病理组织+E6/E7mRNA检测。

3、手术后及随访时:

组织学+癌基因E6/E7mRNA；

细胞学+E6/E7mRNA检测。第十四页，共三十二页，2022年，8月28日TCT结果正常的女性，在正常筛查间隔内一定是安全的吗？TCT结果：ASCUS，如何评估风险？直接镜检&活检：过度检查？随访：漏诊？

30岁以下妇女，感染率高，清除率高，HPV（+）率高，该如何评估风险？筛查常见问题第十五页，共三十二页，2022年，8月28日.IntracellularHumanPapillomavirusE6,E7mRNAQuantificationPredictsCIN2+inCervicalBiopsiesBetterThanPapanicolaouScreeningforWomenRegardlessofAge.ArchPatholLabMed.2012；136:956-960.第十六页，共三十二页，2022年，8月28日E6/E7mRNA检测；联合TCT筛查基因改变早于细胞形态改变，辅助提高细胞学敏感性，ASC-US分流30岁以下女性筛查效率。筛查应用第十七页，共三十二页，2022年，8月28日CIN1风险评估？随访时间确定。CINII-III的患者，手术方式术后随访。

特殊病例：未生育女性、妊娠女性？随访间隔？辅助诊断常见问题：第十八页，共三十二页，2022年，8月28日正常宫颈感染HPV轻度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)中度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ)高度宫颈上皮内瘤变(CINⅢ)原位癌浸润癌依靠免疫力80%自行消退06-18个月至少2年后5-10年后一过性感染持续性感染62%转为正常16%进一步进展22%维持原状54%转为正常30%进一步进展16%维持原状100%HPV感染致宫颈癌模式图第十九页，共三十二页，2022年，8月28日预测性能ASCUS&LSIL者，2年内跟踪诊断至CIN2+女性：HPVE6、E7mRNA作为监测手段：检测呈阳性数量约是阴性数量的69.8倍。HPVDNA作为监测手段：检测呈阳性数量约是阴性数量的5.7倍。TorMoldenetc.PredictingCIN2+whendetectingHPVmRNAandDNAbyPreTectHPV-ProoferandconsensusPCR:a2-yearfollow-upofwomenwithASCUSorLSILPapsmear.InternationalJournalofCancer.Int.J.Cancer,2005,114:973–976.第二十页，共三十二页，2022年，8月28日E6/E7mRNA检测——

辅助活检后人群的后续处理，提高诊断水平：组织学CIN1，建议采用E6/E7mRNA检测：

E6/E7mRNA检测阳性，建议缩短随访时间；E6/E7mRNA检测阴性，建议根据医嘱随访。组织学CIN2+，建议采用E6/E7mRNA检测：

E6/E7mRNA检测阳性，建议积极治疗；E6/E7mRNA检测阴性，建议保守治疗，密切随访。辅助诊断应用第二十一页，共三十二页，2022年，8月28日手术后残端是否会残留病毒？复发的可能性多大？

术后随访间隔是多久，确定依据是什么？术后随访常见问题：第二十二页，共三十二页，2022年，8月28日DetectionofResidual/RecurrentCervicalDiseaseafterSuccessfulLEEPConization:thePossibleRoleofmRNA-HPVTest.

Leep锥切术成功后检测剩余/复发的宫颈疾病：mRNAHPV检测可能发挥的作用。14%-70%的阳性切缘患者5-15%的干净切缘患者存在复发宫颈疾病的风险。E6/E7mRNA检测的随访第二十三页，共三十二页，2022年，8月28日DetectionofResidual/RecurrentCervicalDiseaseafterSuccessfulLEEPConization:thePossibleRoleofmRNA-HPVTest.CurrentPharmaceuticalDesign2013,19,1450-1457.术后，mRNA（+）比mRNA（-）复发的几率更高n=116（CIN患者经LEEP刀治疗后）第二十四页，共三十二页，2022年，8月28日E6/E7mRNA检测，辅助术后的后续处理：手术后，病理组织学诊断+E6/E7mRNA检测术后随访，细胞学+E6/E7mRNA检测。

术后随访应用第二十五页，共三十二页，2022年，8月28日病例分析----30岁已婚女性2013.12.3体检：

E6/E7mRNA(+)低度风险TCT正常未进行干预性治疗，3个月复查2014.3.25细胞学：ASC-US

E6/E7mRNA(+)高度风险术后病检结果：宫颈1点、6点慢性宫颈炎，部分区域呈湿疣性改变；12点处小灶区域CIN2LEEP第二十六页，共三十二页，2022年，8月28日3:2012.9月，广东一家医院，一病人66岁TCTHSIL，E6、E7mRNA检测阴

性，TCT阅片老师认为那个标本报告为癌都不为过，所以进行活检，但

活检结果为CIN1--2级，临床医生对活检不满意，并考虑到该病人年龄比较大，行使锥切后活检，活检结果CIN1。1：2012.3月，河北一医院对一LEEP术后45岁病人加做E6，E7mRNA检

测，发现拷贝值为2万多，两周后重新取样检测，发现E6,E7mRNA

检测仍有一万多拷贝，于是重新取样活检，发现切缘为CIN3级。2：2012.7月浙江余姚市一医院，一病人HPV检测阴性，TCT检测正常，

E6、E7mRNA检测一万多拷贝，主任对该检测结果质疑，对该病人进行活检，病理结果CIN2—3级。病例第二十七页，共三十二页，2022年，8月28日

主要内容1

报告解读及处理建议

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细胞学E6、E7mRNA结果解读临床处理建议正常-未检测到癌基因转录。1年后复查细胞学和E6/E7mRNA。+癌基因转录，未观察到细胞形态的改变。酌情进行阴道镜检或6个月后复查细胞学和E6/E7mRNA。ASC-US-未检测到癌基因转录。6-12个月复查细胞学和E6/E7mRNA。+癌基因已经开始转录，细胞形态处于转变期。异常-癌基因此时处于转录不活跃状态。+癌基因已经开始转录，细胞形态已经明显改变，处于细胞形态改变状态。阴道镜/活检如无病变，半年后复查E6/E7mRNA如E6/E7mRNA（+），查细胞学细胞学＞ASC-US,阴道镜检如E6/E7mRNA（-），半年后查E6/E7mRNA+细胞学。阴道镜/活检无病变：严密随访CIN2+:相应手术治疗第二十九