实验八叶绿体中色素的提取和分离整理

实验八叶绿体中色素的提取和分离整理第一页，共三十六页，2022年，8月28日二、实验原理（一）叶绿体色素：1.叶绿素2.类胡萝卜素叶绿素a叶绿素b胡萝卜素叶黄素3:1(阳生)２:1(阴生)2：13：1第二页，共三十六页，2022年，8月28日叶绿素a、b的结构式第三页，共三十六页，2022年，8月28日类胡萝卜素的结构式第四页，共三十六页，2022年，8月28日（二）四种色素的化学性质均为亲脂性>亲水性，∴均不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。极性大小：叶绿素b>叶绿素a>叶黄素>胡萝卜素。∴根据相似相溶原理，在有机溶液中的溶解度：

叶绿素b<叶绿素a<叶黄素<胡萝卜素。第五页，共三十六页，2022年，8月28日（二）叶绿素的光学性质叶绿素的吸收光谱第六页，共三十六页，2022年，8月28日类胡萝卜素的吸收光谱第七页，共三十六页，2022年，8月28日实验原理：①叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、无水乙醇等能提取色素。②层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析液来分离四种色素。

第八页，共三十六页，2022年，8月28日

实验材料用具：

1、材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。

2、仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，研钵玻璃漏斗，尼龙布（或棉花），毛细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。

3、药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。第九页，共三十六页，2022年，8月28日实验过程：1、提取叶绿素的步骤

：（1）称：用天平称量5g除去叶柄的叶片（2）剪：越细越好，尽量去除叶脉等部分（3）加药品：加少量二氧化硅，碳酸钙和丙酮（约5mL）快速充分研磨。第十页，共三十六页，2022年，8月28日（4）磨：研磨要领是要用力压快速研磨。（5）过滤：用纱布（或棉花）、漏斗和试管，最后提取液置于试管中待用，及时用棉塞（或塞子）将试管塞严.第十一页，共三十六页，2022年，8月28日第十二页，共三十六页，2022年，8月28日第十三页，共三十六页，2022年，8月28日第十四页，共三十六页，2022年，8月28日第十五页，共三十六页，2022年，8月28日第十六页，共三十六页，2022年，8月28日2、分离色素的步骤①制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤纸条一端剪去两个角作标记，在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。②画滤液细线：沿铅笔线轻轻均匀地画一道线，用提取液反复划好几次，每次划完尽量吹干，不要弄破纸条。第十七页，共三十六页，2022年，8月28日③层析分离叶绿体中的色素：将3mL层析液倒入烧杯中，注意将纸条画有滤液细线的一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中。④观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。第十八页，共三十六页，2022年，8月28日实验结果：第十九页，共三十六页，2022年，8月28日问题讨论：

第二十页，共三十六页，2022年，8月28日1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？

二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是保护叶绿素不分解第二十一页，共三十六页，2022年，8月28日2、将滤液放在试管中，为什么要及时用棉塞将试管塞严？

滤液含有丙酮，丙酮有毒，防止挥发

第二十二页，共三十六页，2022年，8月28日3、

画滤液细线时重复画几次的目的是什么？

增加色素的含量，使分离后的色素带更加清晰第二十三页，共三十六页，2022年，8月28日4.为什么不能让滤液细线触及层析液？

层析液会溶解色素使色素无法分离。第二十四页，共三十六页，2022年，8月28日5.观察实验结果有什么现象？滤纸条上出现了几条色素带？每条色素带的颜色和排序如何？

滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素（最快）、叶黄素、叶绿素a（最多）和叶绿素b（最慢）。第二十五页，共三十六页，2022年，8月28日二、实验原理（一）叶绿体色素：1.叶绿素2.类胡萝卜素叶绿素a叶绿素b胡萝卜素叶黄素3:1(阳生)２:1(阴生)2：13：1第二十六页，共三十六页，2022年，8月28日绿叶中的色素类胡萝卜素（含量约1/4）叶绿素（含量约3/4）胡萝卜素（橙黄色）叶黄素（黄色）叶绿素a（蓝绿色）叶绿素b（黄绿色）第二十七页，共三十六页，2022年，8月28日实验关键:1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片.(如菠菜叶)2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复2-3次。3.层析时不要让滤液细线触及层析液。第二十八页，共三十六页，2022年，8月28日

随堂演练：1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，从上到下依次为（）

A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素

C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素

D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素A第二十九页，共三十六页，2022年，8月28日2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是（）A.提取高等植物叶绿体中的色素B.用纸层析法分离色素C.了解各种色素的吸收光谱D.验证叶绿体中所含色素的种类C第三十页，共三十六页，2022年，8月28日3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出现的最窄的一条色素带的颜色是 （）

A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色

B第三十一页，共三十六页，2022年，8月28日4.提取叶绿体中的色素时要加丙酮，其原因是 （）

A.让色素溶解

B.防止叶绿素被破坏

C.便于将叶片研磨成匀浆

D.促使叶绿体中色素分离A第三十二页，共三十六页，2022年，8月28日5.在叶绿体色素的提取和分离实验中，在滤纸条上扩散速度最快的色素是（）

A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素

D.叶黄素C第三十三页，共三十六页，2022年，8月28日6.绿色植物的光合作用中，叶绿素是 （）

A.光合作用的原料

B.光合作用的产物

C.能量转换器

D.氢的接受器A第三十四页，共三十六页，2022年，8月28日7.下列作用不属于叶绿素的功能的是 （）

A.吸收光能

B.利用光能使水分解

C.利用光能合成ATP D.固定和还原二氧化碳