标准解读

GB/T 18654.15-2008 是一项中国国家标准，全称为《养殖鱼类种质检验 第15部分：RAPD分析》。该标准主要针对养殖鱼类的种质检测，特别是利用随机扩增多态性DNA（Random Amplified Polymorphic DNA，简称RAPD）技术进行遗传多样性和种质鉴定的方法进行了规定和指导。

标准内容概览：

  1. 适用范围：本部分标准适用于养殖鱼类种质资源的遗传多样性评估、品种鉴定、亲缘关系分析及种群结构研究等领域。通过RAPD技术，可以快速识别不同鱼类品种间的遗传差异。

  2. 术语与定义：标准首先明确了与RAPD技术相关的专业术语，如引物、扩增产物、多态性等，为后续操作提供统一的术语基础。

  3. 试剂与材料：详细列出了进行RAPD分析所需的各种化学试剂、DNA提取套件、引物以及实验所需的仪器设备，确保实验条件的标准化。

  4. 样本收集与处理：规范了鱼类样本的采集方法、保存条件及DNA的提取步骤，保证样本质量满足实验要求。

  5. RAPD反应体系与程序：详细描述了进行RAPD-PCR反应的混合物组成、反应条件（如温度循环设置）、以及PCR扩增的具体步骤，确保实验结果的可重复性。

  6. 电泳与成像分析：说明了如何通过凝胶电泳分离扩增产物，并通过成像系统记录结果。同时，对电泳条件、染色方法及结果分析做了具体指导。

  7. 数据处理与分析：提出了如何根据电泳图谱分析多态性位点，使用特定软件进行带型分析、构建遗传距离树或进行聚类分析，以评估遗传多样性及种间关系。

  8. 质量控制：强调了实验过程中应采取的质量控制措施，包括阴性对照和阳性对照的应用，以验证实验的有效性和准确性。

  9. 结果报告：规定了实验结果报告应包含的信息，如实验条件、观察到的多态性位点数、遗传距离计算方法及分析结论等，确保信息的完整性和透明度。

实施意义：

此标准的制定和实施，为我国养殖鱼类的种质检测提供了科学依据和技术规范，有助于提高种质资源管理的效率和精确度，促进鱼类遗传改良、保护生物多样性及提升水产养殖业的可持续发展能力。通过标准化的RAPD分析方法，可以更有效地鉴别优良品种、监控种质退化情况，为渔业科研及生产实践提供重要支持。


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  • 废止
  • 已被废除、停止使用，并不再更新
  • 2008-06-27 颁布
  • 2008-10-01 实施
©正版授权
GB/T 18654.15-2008养殖鱼类种质检验第15部分：RAPD分析_第1页
GB/T 18654.15-2008养殖鱼类种质检验第15部分：RAPD分析_第2页
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文档简介

犐犆犛６５．１５０

犅５０

中华人民共和国国家标准

犌犅／犜１８６５４．１５—２００８

养殖鱼类种质检验

第１５部分：犚犃犘犇分析

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２００８０６２７发布２００８１００１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

书

犌犅／犜１８６５４．１５—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１８６５４《养殖鱼类种质检验》分为下列部分：

———第１部分：检验规则；

———第２部分：抽样方法；

———第３部分：性状测定；

———第４部分：年龄与生长的测定；

———第５部分：食性分析；

———第６部分：繁殖性能的测定；

———第７部分：生态特性分析；

———第８部分：耗氧率与临界窒息点的测定；

———第９部分：含肉率测定；

———第１０部分：肌肉营养成分的测定；

———第１１部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定；

———第１２部分：染色体组型分析；

———第１３部分：同工酶电泳分析；

———第１４部分：ＤＮＡ含量的测定；

———第１５部分：ＲＡＰＤ分析；

……

本部分为ＧＢ／Ｔ１８６５４的第１５部分。

本部分的附录Ａ、附录Ｂ和附录Ｃ为规范性附录。

本部分由中华人民共和国农业部提出。

本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。

本部分起草单位：上海水产大学、中国水产科学研究院长江水产研究所。

本部分主要起草人：李思发、邹曙明、徐忠法、赵金良、蔡完其。

Ⅰ

书

犌犅／犜１８６５４．１５—２００８

养殖鱼类种质检验

第１５部分：犚犃犘犇分析

１范围

ＧＢ／Ｔ１８６５４的本部分规定了鱼类ＲＡＰＤ分析的试剂与材料、仪器和设备、抽样、分析步骤和结果

判定。

本部分适用于常见淡水、海水养殖鱼类。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过ＧＢ／Ｔ１８６５４的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文

件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成

协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本

部分。

ＧＢ／Ｔ１８６５４．１—２００２养殖鱼类种质检验第１部分：检验规则

ＧＢ／Ｔ１８６５４．２养殖鱼类种质检验第２部分：抽样方法

３原理

利用１０碱基的随机寡核苷酸引物，对样品基因组的ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，扩增产物进行电泳分离

和溴化乙锭染色，根据谱带多态性比较分析，判定鱼类物种的遗传特性。

４试剂与材料

除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。

４．１三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ）。

４．２氢氧化钠（ＮａＯＨ）。

４．３氯化钠（ＮａＣｌ）。

４．４十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）。

４．５氯化钾（ＫＣｌ）。

４．６氯化镁（ＭｇＣｌ２）。

４．７乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ）。

４．８硼酸。

４．９琼脂糖。

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