GB/T 18644-2020猪囊尾蚴病诊断技术

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T18644—2020

代替

GB/T18644—2002

猪囊尾蚴病诊断技术

Diagnostictechniquesforporcinecysticercosis

2020-12-14发布2020-12-14实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T18644—2020

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

缩略语

3……………………1

显微镜检查

4………………1

试剂

4.1…………………1

仪器设备

4.2……………1

虫体采集

4.3……………2

压片制备

4.4……………2

显微镜检查

4.5…………………………2

显微镜检查结果判定

4.6………………2

法

5PCR……………………2

试剂

5.1…………………2

仪器设备

5.2……………2

引物

5.3…………………3

样品

5.4…………………3

操作程序

5.5PCR………………………3

扩增产物电泳检测

5.6…………………4

试验成立条件

5.7………………………4

结果判定

5.8PCR………………………4

间接

6ELISA………………4

试剂

6.1…………………4

仪器设备

6.2……………4

样品

6.3…………………5

试验步骤

6.4……………5

试验成立条件

6.5………………………6

结果判定

6.6ELISA……………………6

7Dot-ABC-ELISA…………………………6

试剂

7.1…………………6

仪器设备

7.2……………7

样品

7.3…………………7

试验步骤

7.4……………7

试验成立条件

7.5………………………8

结果判定

7.6Dot-ABC-ELISA…………8

综合判定

8…………………8

Ⅰ

GB/T18644—2020

附录规范性附录生理盐水及猪囊尾蚴头节形态特征

A()……………9

附录规范性附录引物位置溶液配制及电泳结果

B()PCR、…………10

附录规范性附录试剂及其配制

C()ELISA……………12

附录资料性附录猪囊尾蚴重组蛋白的制备

D()TS-CC18…………14

附录资料性附录间接酶联免疫吸附试验的加样

E()…………………16

附录资料性附录猪囊尾蚴和烯醇化酶单克隆抗体的制备

F()TS-CC18…………17

附录资料性附录相关试剂配制及结果判定

G()Dot-ABC-ELISA…………………20

Ⅱ

GB/T18644—2020

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准代替猪囊尾蚴病诊断技术与相比除编辑性修

GB/T18644—2002《》,GB/T18644—2002,

改外主要技术变化如下

,:

范围部分增加了和技术见第章

———PCRDot-ABC-ELISA(1);

增加了缩略语部分见第章

———(3);

增加了病原的检测方法见第章

———PCR(5);

修改了酶联免疫吸附试验的检测抗原和检测步骤直接对血清样品进行抗体检测见第章

———,(6,

年版的第章

20023);

增加了检测循环抗原的方法见第章

———Dot-ABC-ELISA(7);

增加了综合判定见第章

———(8);

增加了生理盐水及猪囊尾蚴头节图片见附录引物位置溶液配制及电泳图片见附

———(A),PCR、(

录试剂及其配制见附录年版的附录猪囊尾蚴重组蛋白的

B),ELISA(C,2002A),TS-CC18

制备见附录间接酶联免疫吸附试验加样示例见附录猪囊尾蚴和烯醇化

(D),(E),TS-CC18

酶单克隆抗体的制备见附录相关试剂配制及结果判定见附录

(F),Dot-ABC-ELISA(G)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任

。。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国农业科学院兰州兽医研究所

:。

本标准主要起草人才学鹏骆学农张少华郑亚东郭爱疆侯俊玲

:、、、、、。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为

:

———GB/T18644—2002。

Ⅲ

GB/T18644—2020

引言

猪囊尾蚴病是由猪带绦虫Taeniasolium的幼虫所引起的一种危害严重的

(porcinecysticercosis)()

人兽共患寄生虫病世界动物卫生组织将该病列为需申报的疾病之一目前该病广泛存在于发展中

。。,

国家而且发达国家的病例也有逐年增加的趋势不仅影响养猪业的发展造成巨大的经济损失而且还

,,,,

严重威胁人类健康

。

猪囊尾蚴病的诊断包括病原学诊断与血清学诊断病原学诊断的目的在于确定临床剖检样本中虫

。

体的形态特征在显微镜下观察头节顶突上有内外两圈排列整齐的小钩即可判为猪囊尾蚴若囊尾蚴

,,。

主要寄生于肝脏则要注意与亚洲带绦虫囊尾蚴相区别目前该病的生前诊断主要采用血清学方法

,。,,

所用的抗原有虫体抗原囊液抗原或分泌代谢抗原等虽然这些抗原的检测敏感性较高但特异性差而

、,,,

且抗原来源非常有限鉴于以上原因本次对猪囊尾蚴病诊断技术的修订除间

。,GB/T18644—2002《》,

接所用抗原改为猪囊尾蚴期特异性基因重组蛋白外还增加了血清循环抗原

ELISA18ku(TS-CC18),

检测方法和病原的检测方法以满足猪囊尾蚴病流行病学调查药物治疗效果评价和动物

(CAg)PCR,、

流通风险评估等不同需求

。

本文件的发布机构提请注意声明符合本文件时可能涉及到第章间接酶联免疫吸附试验

,,6

相关的专利使用

(ELISA)。

本文件的发布机构对于该专利的真实性有效性和范围无任何立场

、。

该专利持有人已向本文件的发布机构保证他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下

,,

就专利授权许可进行谈判该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案相关信息可以通过以下

。。

联系方式获得

:

专利持有人姓名才学鹏张少华景志忠骆学农郭爱疆郑亚东窦永喜

:、、、、、、。

地址甘肃省兰州市盐场堡徐家坪号

:1。

请注意除上述专利外本文件的某些内容仍可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别这些专

,。

利的责任

。

Ⅳ

GB/T18644—2020

猪囊尾蚴病诊断技术

1范围

本标准规定了猪囊尾蚴病的显微镜检查聚合酶链式反应法法间接酶联免疫吸附试验间

、(PCR)、(

接斑点生物素亲和素复合物酶联免疫吸附试验诊断技术及综合判定

ELISA)、-(Dot-ABC-ELISA)。

本标准适用于猪和野猪的囊尾蚴病诊断

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

基因扩增领域检测实验室认可指南

CNAS-GL029:2