检测生物中的蛋白质脂质糖类

组成细胞的化合物无机物有机物水无机盐糖类脂质蛋白质核酸知识回顾

斐林试剂苏丹Ⅲ橘黄色红色砖红色沉淀紫色苏丹Ⅳ

双缩脲试剂鉴定物质试剂实验现象还原性糖脂肪蛋白质淀粉

碘

蓝色

某些

能够使生物组织中的有关

产生

。预习提问：1、实验原理特定的颜色反应化学试剂有机化合物比较项目试剂及成分原理溶液浓度使用方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂NaOH和CuSO4溶液呈紫色2、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？还原糖中的醛基（—CHO）将Cu(OH)2中的Cu2+还原成Cu+，形成Cu2O砖红色沉淀在碱性环境下的Cu2+与蛋白质结合成紫色络合物NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mLNaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，后立即使用。先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，摇匀。(不能过量)水浴加热不需要3、以下植物器官中最好选哪几种做为实验材料？为什么？√√√没有颜色或颜色较浅；分别富含可溶性还原糖（葡萄糖、麦芽糖、果糖）、淀粉、蛋白质、脂肪。√╳有色素,会掩盖颜色反应的结果╳蔗糖不是还原糖●请检查并熟悉材料用具

1．实验材料：（梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子匀浆，豆浆）——4个小烧杯，花生种子。

2．仪器：双面刀片，试管，试管架，试管夹，大烧杯2个，温度计，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。

3．试剂：斐林试剂(甲液：质量浓度为0.1g／mL的Na0H溶液，乙液：质量浓度为0.05g／mL的CuSO4溶液)，苏丹Ⅲ染液，双缩脲试剂(A液：质量浓度为0.1g／mL的NaOH溶液，B液：质量浓度为0.0lg／mL的CuSO4溶液)，体积分数为50%的酒精溶液，碘液，蒸馏水。共7瓶梨匀浆花生种子匀浆鉴定物质材料还原性糖脂肪蛋白质淀粉●请确定具体的检测实验材料豆浆马铃薯匀浆●请熟悉检测步骤（注：1滴管是1mL）一、淀粉的检测和观察(注：淀粉易沉淀，使用前请先混匀）

第一步：向试管内注入2mL待测组织样液——马铃薯匀浆。第二步：向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。二、还原糖的检测和观察

第一步：向试管内注入2mL待测组织样液——梨匀浆。第二步:向试管内注入1ml斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。第三步：将试管放入盛有50～65℃温水的大烧杯中加热约2min。第四步：观察试管中出现的颜色变化。三、蛋白质的检测和观察

第一步：向试管内注入2mL待测组织样液——豆浆。第二步：向试管内注入双缩脲试剂A液1mL，摇匀。第三步：向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，边滴边摇。第四步：观察试管中出现的颜色变化。四、脂肪的检测和观察

方法一：第一步：向试管内注入2mL待测组织样液——花生种子匀浆。第二步：向试管中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察样液被染色的情况。1）实验原理：淀粉+碘液→蓝色一：检测生物组织中的淀粉2）实验材料：3）试剂：碘液4）检测的方法步骤①向试管内注入2mL待测组织样液。②向试管内滴加两滴碘液，摇匀。③

观察颜色变化。二：检测生物组织中的蛋白质3）试剂：双缩脲试剂A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液1）实验原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色4）检测的方法步骤①向试管内注入2mL待测组织样液。②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL

，摇匀。2）实验材料：③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴.（边滴边摇）5）实验现象三：检测生物组织中的还原性糖类1）实验原理：还原糖+斐林试剂→（温水浴）砖红色沉淀2）实验材料：3）试剂：斐林试剂甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液4)检测的方法步骤①向试管内注入2mL待测组织样液。②向试管内注入1mL斐林试剂（甲乙液等量混合均匀后再注入）。③将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热2min。④观察试管中出现的颜色变化。四：检测生物组织中的脂肪1）实验原理：脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色2）实验材料：3）试剂：苏丹Ⅲ4)检测的方法步骤①方法一：向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察样液被染色的情况。检测梨匀浆的实验现象（浅蓝色

——棕色

——Cu2O砖红色沉淀）

请小组内或小组间交流实验结果并记录，如果有差别，请分析原因？检测蛋白质的实验现象

以上实验是同学们根据生活常识，选择了富含该化合物的植物组织进行检测。

1、该组织中还含有其它化合物吗？请各小组任选一种组织样液探究是否含有另外一种化合物。

2、老师从超市购买的某品牌奶制品是否含有以上四种化合物？请同学们设计实验探究。具体分工如下：1、2组探究是否含有蛋白质？3组探究是否含有脂肪？4、5组探究是否含有可溶性

还原糖？6、7组探究是否含有淀粉？）

将以上两题的实验预测及结果填入课本P18

页的表格中。

拓展提升牛奶

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方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况(以花生为例)。

（该方法现象明显，但比较难操作，一定要注意实验操作的流程和注意事项，并注意安全）

①取材

取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮。②切片用刀片在花生子叶的横断面上平行切下若干薄片，放入盛有清水的培养皿中待用。③制片从培养皿中选取最薄的切片，用毛笔蘸取放在载玻片中央；在花生子叶薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min；用吸水纸吸去染液，再滴加上2滴体积分数为50％的酒精溶液，洗去浮色；用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片。④观察在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处，移到视野中央，将物像调节清楚；换高倍显微镜观察，视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒清晰可见。

四：检测生物组织中的脂肪5）实验现象

要点归纳

实验步骤：

①取材分组，对照编号。

第一步：取2个试管编号为A、B，向A试管内注入2mL待测组织样液——梨匀浆。向B试管内注入等量（2mL）的蒸馏水。

②对不同液体进行相同处理。

第二步:向A、B2个试管内分别注入1ml斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。

③给予相同适宜的条件，进行结果（预测）。

第三步：将A、B2个试管分别放入盛有50～65℃温水的大烧杯中加热约2min。

④观察记录实验现象，并根据结果（现象）进行分析，得出结论。

实验设计应遵循的原则：

科学性原则、可行性原则、单一（因子）变量原则、对照原则（空白对照、自身对照、条件对照、相互对照）、等量原则。检测梨匀浆中可溶性还原糖的实验现象（浅蓝色

——棕色

——砖红色沉淀）

B试管取等量（2ml）蒸馏水作对照知识结构练习：

1.某学生用徒手切片法制作花生子叶切片，用苏丹Ⅲ染液染色后，在显微镜下观察。在高倍镜下转动细准焦螺旋，有一部分细胞看得比较清晰，而另一部分细胞比较模糊，其原因最可能是

A．细准焦螺旋没有调节好

B．子叶切片切得厚薄不均

C．子叶切片染色不均匀

D．反光镜未调节好

2.把一定浓度的NaOH溶液和CuSO4溶液加入某人的尿液中，微热时，如果观察到红色沉淀，说明该尿液中含有

A．乙醇B．葡萄糖C．氨基酸 D．蛋白质√√3、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是()A.斐林试剂B.红墨水

C.双缩脲试剂D.苏丹Ⅳ染液

B拓展提高：学案P17

已知鸡蛋的蛋清主要成分是蛋白质，在碱性环境中，蛋白质与Cu2+反应产生紫色物质，即蛋白质的双缩脲反应。在此基础上，利用一定的实验材料和器具设计实验证明唾液淀粉酶是蛋白质。以下是此完整实验的一部分，请完善并回答下列问题。实验步骤：第一步：制备蛋清液。取生鸡蛋一个，打破蛋壳(不能破坏蛋黄)，取少许蛋清注入烧杯中，加入30mL清水，用玻璃棒搅拌均匀备用。第二步：取两只规格相同的试管编号为1、2，分别注入一定量的实验液体。(如图)第三步：向2支试管中各加入5滴NaOH溶液并振荡，再向2支试管中各加入2～3滴CuSO4溶液，振荡。问题：(1)第二步2号试管中加入的“某溶液”是

，加入的量是

，它体现了实验设计应遵循