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文档简介
digeneHC2HPV检测临床应用及其优势介绍WH市场部HybridCapture®2(HC2)--杂交捕获二代利用基因杂交、化学发光、信号放大的原理在分子水平同时检测被WHO确认的13种高危型-HPV病毒DNA96test/kit(88病人标本/盒)HC2HPV检测流程:样本收集:样本类型及采样注意事项样本处理过程检测步骤HC2HPV检测
采样器用于HPV检测的最常见的样本
是:
Thehc2DNACollectionDevice采样器™采集的STM标本TheThinPrep®样本(Hologic)新鲜宫颈活检标本(截面为2-5mm的宫颈活检组织)HC2HPV检测宫颈取样插入宫颈口1-1.5cm,直到刷子最外圈接触到外宫颈逆时针方向,旋转三圈,停留十秒将刷子底部放到转移管中,在划线处折断杆子,将整个刷子留在转移管中HC2HPV检测宫颈取样标本保存HPV标本的保存
1、室温下:保存2周
2、2-8℃:再保存1周
3、-20℃:保存3个月或更长
标本保存注意事项使用专用的DIGENEHPV采样器(含试剂,可抑制细菌生长,保持DNA完整性)
注:切勿将小刷子扔掉,以保留足量标本采样前三天内不要阴道内用药或冲洗,避免经期采样采样前不要进行醋酸/碘液涂抹开盖、折断小刷子时勿大力震荡试管,以免试剂溅出影响检测或标本溅出造成污染少量血液不影响检测结果在试管壁上标明患者名称和年龄盖紧瓶盖HC2HPV检测流程:样本收集:样本类型及采样注意事项样本处理过程检测步骤不同类型的样本
hc2DNACollectionDevice采样器TheThinPrep细胞保存液细胞溶解:只保留DNA保留细胞不同类型的样本处理Thinprep样本在进行hc2检测前进行转换样本转换试剂盒CCUPreservCyt(即Thinprep样本)的转换流程Step1Step2Step3Step4Step5摇动/漩涡混合10sec.取出4mL加入400uL转换缓冲液加盖和漩涡混合离心15min取出上清液Step10Step9Step8Step7Step6取出残余液态150uL变性液加盖漩涡混合30sec65°水浴15min.漩涡混合15-30sec.在水浴30min.漩涡混合5sec.去盖,取75uL加入微孔板用Digene自己的采样标本,可直接进行检测!
Step1Step2Step3500uL混有指示剂的变性剂加入样本加盖和漩涡混合(MST)65°水浴45min.漩涡混合5secHC2HPV检测流程:样本收集:样本类型及采样注意事项样本处理过程检测步骤HC2技术的检测步骤DenaturespecimenHybridizewithRNAprobeCapture
anddetecthybridsLuminescenceHc2检测方法分为简单的5部变性溶解细胞,释放DNA单链杂交全长病毒RNA探针与病毒靶DNA结合捕获DNA:RNA复合物被包被在微孔板上的抗体捕获
一抗特异性结合DNA:RNA复合物
杂交检测用二抗结合捕获后的复合物二抗偶联有碱性磷酸酶发光信号产生 加入碱性磷酸酶的底物
产生化学发光信号HC2HPV检测步骤-----简单的5步
Step1:变性溶解细胞,解链和变性核酸,释放HPVDNA单链Step2:杂交全长病毒RNA探针与HPV病毒靶DNA结合,形成RNA:DNA复合物Step3:捕获RNA:DNA复合物被包被在微孔板上的抗体捕获一抗特异性结RNA:DNA复合物
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