标准解读
GB/T 14926.58-2001 是一项关于实验动物健康检测的国家标准,专注于传染性犬肝炎病毒(Canine Adenovirus Type 1, CAV-1)的检测方法。这项标准旨在为实验动物管理和研究机构提供统一、科学、可靠的检测手段,以确保实验动物的质量控制及生物安全。
标准适用范围
该标准适用于实验用犬及其他可能受CAV-1感染的动物中,该病毒的检测与诊断。CAV-1是一种能引起犬只急性肝炎的重要病原体,对实验动物的安全和实验结果的准确性有直接影响。
检测方法概述
标准推荐了两种主要的检测技术:
-
病毒分离与培养:通过将样本接种到敏感细胞系(如犬肾细胞)中,观察细胞病变效应(CPE),并结合特异性血清学试验进行病毒鉴定,以确认CAV-1的存在。
-
血清学检测:利用酶联免疫吸附试验(ELISA)或中和试验检测动物血清中针对CAV-1的特异性抗体。这些方法能有效识别出曾经暴露于病毒或接种过疫苗的动物。
样本要求
标准详细说明了适宜的样本类型,包括血液(用于血清学检测)、组织样本(如肝脏,用于病毒分离)以及可能的其他生物学材料。样本采集、处理和保存的具体要求也做了规定,确保检测结果的准确性和可靠性。
检测结果判定与报告
标准明确了阳性、阴性及可疑结果的判定标准,并要求在检测报告中详细记录实验方法、所用试剂、操作步骤、检测结果及其解释,确保检测过程的透明度和可追溯性。
质量控制
强调了内部质控和外部质控的重要性,推荐定期进行方法验证、使用阳性和阴性对照样品,以及参与能力验证计划,以维持和提升实验室检测的准确性和稳定性。
结论
该标准为实验动物领域提供了传染性犬肝炎病毒检测的规范化流程,不仅有助于及时发现和控制疫情,还对维护实验动物模型的健康状态、保障科学研究的可靠性和动物福利具有重要意义。通过遵循这些检测方法,实验动物设施可以有效地监控和管理CAV-1的传播风险。
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文档简介
ICS65.020.30B44中华人民共和国国家标准GB/Tr14926.58-2001实验动物传染性犬肝炎病毒检测方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofinfectiouscaninehepatitisvirus(ICHV)2001-08-29发布2002-05-01实施中华民民共.和.发布国家质量监督检验检疫总局
GB/T14926.58-2001前本标准规定了传染性犬肝炎病毒的检测方法、传染性犬肝炎是犬的主要烈性传染病之一,在我国犬群中广泛流行,是普通级犬和SPF犬的必检项目。因此增加该病毒的检测方法。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:田克恭。
中华人民共和国国家标准实动物GB/T14926.58-2001传染性犬肝炎病毒检测方法Laboratoryanimal一Methodforexaminationofinfectiouscaninchcpatitisvirus(ICHV)1范围本标准规定了传染性犬肝炎病毒(ICHV)的检测方法、试剂等本标准适用于犬ICHV的检测引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T14926.50—2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.54-2001实验动物血凝抑制试验原理根据免疫学原理,采用ICHV抗原检测犬血清中ICHV抗体;或根据ICHV在一定的条件下,能凝集人"O”型红细胞,这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理,检测犬血清中ICHV抗体。4主要试剂和器材4.1试剂4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原用ICHV感染MDCK细胞,接种3~4天后,当病变达十十十~十十十时收获。冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4.1.1.2正常抗原MDCK细胞冻融破碎后.经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液4.1.2血凝素ICHV接种MDCK细胞,培养3~4d.当病变达十十十~十十十十时收获培养物。冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液分装后低温保存。4.1.3阳性血清ICHV实验感染或自然感染的犬血清。4.1.4阴性血清无ICHV感
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