标准解读
GB/T 14926.56-2001 是一项中国国家标准,全称为《实验动物 狂犬病病毒检测方法》。这项标准规定了对实验动物进行狂犬病病毒检测的具体操作规程、技术要求及判定标准,旨在确保实验动物的质量控制和生物安全,预防狂犬病在实验动物群体中的传播,同时也为相关科研活动和疾病监测提供科学依据。
标准内容概览:
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范围:明确了该标准适用于各种实验动物(如鼠、兔、猴等)体内狂犬病病毒的检测。
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规范性引用文件:列出了实施该标准时需要参考的其他相关国家标准或国际标准文献。
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术语和定义:对标准中使用的专业术语进行了明确界定,包括狂犬病病毒、抗原、抗体等关键概念。
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检测方法概述:介绍了标准推荐的几种检测技术,主要包括直接检测病毒抗原的方法(如免疫荧光试验IFT)、检测病毒核酸的分子生物学方法(如PCR)以及血清学方法检测特异性抗体等。
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样本采集与处理:详细说明了不同种类实验动物样本(如脑组织、血液)的采集部位、采集方法、保存条件及预处理步骤,以确保样本质量满足检测要求。
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检测步骤:
- 免疫荧光试验(IFT):详细步骤包括样本固定、抗体标记、荧光显微镜观察等,用于直接检测样本中的病毒抗原。
- PCR检测:涵盖核酸提取、引物设计、扩增条件设定及结果分析,用以检测病毒核酸的存在。
- 血清学检测:如酶联免疫吸附试验(ELISA)或快速免疫层析试验,用于检测动物血清中的狂犬病病毒抗体。
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结果判定:提供了每种检测方法的具体阳性、阴性判定标准,确保检测结果的准确性和可比性。
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质量控制:强调了实验室应执行的质量控制措施,包括使用阳性和阴性对照、定期校准仪器设备、操作人员培训等,以保证检测结果的可靠性。
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安全防护:提醒执行检测的操作人员应采取适当的安全措施,防止样本处理过程中狂犬病病毒的感染风险。
实施意义:
该标准的实施有助于统一实验动物狂犬病病毒检测的技术流程和判定标准,提升检测效率与准确性,为实验动物管理和公共卫生安全提供重要技术支撑。通过规范化的检测手段,能有效监控实验动物群中狂犬病的流行情况,保障科学研究的顺利进行及人类健康安全。
如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。
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文档简介
ICS65.020.30B44中华人民共和国国家标准GB/Tr14926.56—2001实验动物狂犬病病毒检测方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofrabiesvirus(RV)2001-08-29发布2002-05-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局
GB/T14926.56-2001前本标准规定了狂犬病病毒的检测方法。狂犬病病毒属人兽共患病原。是普通级犬和SPF犬的必检项目,因此增加该病毒的检测方法。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:田克恭。
中华人民共和国国家标准实验GB/T14926.56-2001狂犬病病毒检测方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofrabicsvirus(RV)1范围本标准规定了狂犬病病毒(RV)的检测方法、试剂等本标准适用于犬RV的检测。)引用标准下列标准所包含的条文.通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时.所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T14926.50—2001实验动物酶联免疫吸附试验GB/T14926.54—2001实验动物血凝抑制试验原理根据免疫学原理.采用RV抗原检测犬血清中RV抗体:或根据RV在一定的条件下,能凝集鹅红细胞·这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理,检测犬血清中RV抗体、4主要试剂和器材4.1试剂4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特异性抗原在生物安全柜内,用RV感染BHK21细胞,接种6d后,当病变达十十十~一十十十十时收获。冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。4.1.1.2正常抗原BHK21细胞冻融破碎后·经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液4.1.2血凝素RV接种BHK21细胞,培养4~5d.当病变达土十~+十土时收获。。冻融三次或超声波处理后,低速离心去除细胞碎片,上清液分装后低温保存。4.1.3阳性血清RRV弱毒株抗原免疫的犬血清。4.1.4阴性血清无RV感染、未经免
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