人类疾病动物模型

人类疾病的动物模型

AnimalModelsRepresentingHumanDiseases第一页，共83页。第一节人类疾病动物模型的概述一、概念人类疾病的动物模型(animalmodelsofhumandiseases)：指医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料借助动物复制出类似人类的疾病及某些生命现象的模型进展研究将研究结果推论到人类，说明生命的奥秘；认识人类疾病的发生和开展规律，以有效防治之第二页，共83页。二、分类(一)按产生原因分类自发性、诱发性、抗疾病、生物医学动物模型1．自发性疾病动物模型(spontaneousanimalmodels)：指实验动物未经任何有意的人工处理，在自然情况下动物自然发生的疾病，或由于基因突变的异常表现通过遗传育种保存下来的动物模型自发性疾病动物模型以遗传病和肿瘤居多例如:自发性高血压大鼠，中国地鼠自发性真性糖尿病，裸鼠、小鼠和大鼠各种自发肿瘤，肥胖症小鼠，脑中风大鼠优点：减少了人为因素，更接近自然的人类疾病缺点：疾病种类有限，饲养条件要求高，自然发病率低，发病周期长，不可能大量应用，如山羊家族性甲状腺肿、牛免疫缺陷病毒(BIV)所致者第三页，共83页。2．诱发性疾病动物模型(experimentalartificialorinducedanimalmodels)指使用物理、化学、生物等致病手段，人为地造成动物组织、器官或全身形成类似人类疾病的动物模型，又称为实验性动物模型，即人工地诱发出特定的疾病，以供研究bacteria,viruses;carcinogenicchemicals,oncogenicviruses,rays优点：可短期内复制出大量的疾病动物模型，能严格控制各种条件，合适研究目的，医学研究中常用缺点：其和自然产生的疾病模型在某些方面存在差异；有些人类疾病不能用人工方法诱发出来第四页，共83页。(1)物理因素诱发动物疾病模型指常见的物理因素(如机械损伤、放射线损伤、气压、手术等)，使用物理方法复制的动物模型比较直观、简便，常用外科手术→大鼠肺水肿,大鼠急性肝功能衰竭放射线损伤→萎缩性胃炎,大、小鼠和犬的放射病机械损伤→骨折

第五页，共83页。(2)化学因素诱发动物疾病模型指化学因素如化学药致癌、化学毒物中毒、强酸强碱烧伤、某种有机成分的增加或减少导致营养性疾病等例如，用羟基乙胺复制大鼠急性十二指肠溃疡、用D-氨基半乳糖复制大鼠肝硬化，用缺碘饲料复制大鼠缺碘性甲状腺肿，用胆固醇盐、甲基硫氧嘧啶及动物油复制鸡、兔、大鼠动脉粥样硬化症剂量：不同品种的动物对化学药物耐受量不同性质：某些化学药物的活性代谢物易造成许多组织、器官损伤预实验第六页，共83页。(3)生物因素诱发动物疾病模型主要用于传染病、寄生虫病、微生物学和免疫学等模型复制生物因平素见细菌、病毒、寄生虫、生物毒素在人类疾病中，由生物因素引起的人畜共患病(传染性或非传染性)占很大比例例如，以柯萨奇病毒(B组)复制小鼠、大鼠、猪等心肌炎；以福氏Ⅳ型痢疾杆菌或志贺杆菌复制猴的细菌性痢疾；以锥虫病原体感染小鼠，复制锥虫病；以钩端螺旋体感染豚鼠，复制钩端螺旋体所致肺出血动物模型Coxsachievirus为单股正链小RNA病毒

椎虫椎虫病钩端螺旋体钩体是唯一可用人工培养基培养的螺旋体恢复期并发症之一:眼葡萄膜炎第七页，共83页。(4)复合因素诱发动物疾病模型有些疾病模型必须使用多种因素诱导才能复制成功成模时间较长，方法较繁琐，但与人类疾病比较相似如复制大鼠或豚鼠慢性支气管炎动物模型可使用细菌加寒冷，或香烟加寒冷，或细菌加SO2等方法以四氯化碳(40%棉子油溶液)、胆固醇、乙醇等复合因素复制大鼠肝硬化自发与诱发的疾病动物模型有很多疾病可用不同的方式获得一些自发性肿瘤模型，也可用各种致癌剂诱发，但发病机制和疾病的内在特征各有特点，如自发性肿瘤和诱发性肿瘤对药物的敏感性明显不同第八页，共83页。3．抗疾病的动物模型(negativeanimalmodels)指特定的疾病不会在某种动物身上发生，可藉以讨论为何这种动物对该疾病有天然的抵抗力例如，哺乳动物易感染血吸虫病，而洞庭湖流域的东方田鼠却不感染血吸虫病，故可用于血吸虫感染和抗血吸虫病的研究

个儿大,跑得慢,喜甜味对良田庄稼危害大→灭鼠东方田鼠不感染血吸虫病血吸虫尾蚴40倍第九页，共83页。4.生物医学动物模型(biomedicalanimalmodels)：指利用动物生物学特性来提供人类疾病相似表现的疾病模型例如，沙鼠缺乏完好的脑底动脉环，左右大脑供血相对独立，是研究中风的理想动物模型鹿的正常红细胞是镰刀形的，被用于镰刀形红细胞贫血研究但这类动物模型与人类疾病存在着一定的差异第十页，共83页。(二)按系统范围分类1．疾病的根本病理过程动物模型(animalmodelsoffundamentalpathologicprocessesofdiseases)：指各种疾病共同性的一些病理变化过程模型致病因素在一定条件下作用于动物，使动物组织、器官或全身造成一定病理损伤，出现功能、代谢和形态构造的某些变化，其中有些变化是许多疾病都可能发生的、共有的，不是某种疾病所特有的，如发热、缺氧、水肿、休克、弥漫性血管内凝血、电解质紊乱、酸碱平衡失调等，称为疾病的根本病理过程第十一页，共83页。2．各系统疾病动物模型(animal

modelsofdifferentsystemdiseases)：指与人类各系统疾病相应的疾病动物模型,可分为消化、呼吸、心血管、泌尿、神经、血液与造血系统、内分泌、骨骼等系统的动物模型；也包括按科分类，如传染病、妇科病、儿科病、皮肤科病、五官科病、外科病、寄生虫病、地方病、维生素缺乏病，物理损伤疾病和职业病等动物模型(三)按模型种类分类：包括整体动物，离体器官和组织，细胞株，数学模型等疾病模型，也较常用第十二页，共83页。(四)按中医药体系分类根据中医证型分类，可分为阴虚、阳虚、气虚、血虚、脾虚、肾虚、厥脱证动物模型等按中药理论分类，解表药、清热药、泻下药、祛风湿药、利水渗湿药、温里药、止血药、止咳药、化痰药、平喘药、安神药、平肝息风药、补益药、理气药、活血化瘀药等动物模型中医药动物模型，不管从证或从药分类，每个证的动物模型不止一种动物及一种方法由于中医药的特殊理论体系、评价标准和观察指标，非常准确的动物模型并不多，有待改进和完善第十三页，共83页。三、人类疾病动物模型的意义1.防止在人体进展实验许多病如外伤、中毒或肿瘤等的研究不可能在人体进展，但可在动物身上进展动物可作为人类的替难者2.简化研究周期很多病埋伏期长、有的病程很长，如高血压、慢性支气管炎、肺心病及肿瘤等许多实验动物生命周期短，在实验室内可进展几代甚至十几代的观察动物模型可作为人类疾病的“缩影〞第十四页，共83页。3．提供发病率较低的疾病材料有些疾病不易搜集，如放射病、烈性传染病、遗传病、肿瘤，但可随时在实验动物身上复制4．可严格控制实验条件，增强实验材料可比性人类疾病很多，各种因素均起作用；同时患多种疾病；年龄、性别、体质等对疾病的发生和开展均有影响复制疾病模型应选择标准实验动物(同品系、同性别、年龄、体重等条件一样)，可用单一的病因引起疾病第十五页，共83页。5.样品搜集方便，结果容易分析动物模型可看到全部过程，有始有终可按实验目的需要随时搜集各种样品6.有助于全面认识疾病的本质通过对人和畜进展比较研究，可充分地认识同一病原体在不同机体引起的损害，全面认识该疾病的本质医学科学研究中动物模型的最终目的是为了防治人类疾病,对动物模型应有一个正确的评估第十六页，共83页。疾病动物模型的结果可靠程度取决于模型与人类疾病的相似性没有一种动物模型能完全复制出人类疾病的所有表现，模型只是一种外延法的间接研究动物模型实验结论的正确性是相对的，还须在人体得到验证一旦出现异于人类疾病的情况，要随时分析差异的程度和性质，找出相平行的共同点，正确评估其价值第十七页，共83页。四、人类疾病动物模型的复制原那么1.尽可能重现所要求的人类疾病的模型复制的动物模型应尽可能近似人类相应的疾病充分理解所用动物模型的全部信息，如动物的特性、诱发条件、疾病的表现和病变部位，分析是否能到达预期的结果如研究动脉粥样硬化，兔常用，易复制，但兔为食草动物，胆固醇剂量要高，病变部位不在主动脉弓，病理以纤维组织和平滑肌增生为主，与人发生的病变差异较大，猪却是较理想的实验动物第十八页，共83页。2．选用有实用价值的、标准化的实验动物应合适大多数研究人员使用，易于复制，便于操作及采集标本应使用标准化的实验动物和饲养条件对于慢性疾病模型，动物须有较长的生存期，以便长期观察，以免模型完成时动物已濒死或因并发症死亡例如，研究慢性支气管炎，普通级别的大、小鼠在开放环境下饲养是不适宜的(因肺炎支原体感染率高达90%，与某些因子诱发的慢性支气管炎的病变易混淆),这种实验应用SPF级大、小鼠，饲养在屏障系统内3．经济易行多用小动物如小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠等，同样可复制出相似于人类疾病的模型，其遗传背景大多明确，质量和规格可供选择，且价廉易得，便于管理除非非常重要的研究，非用不可，一般不采用灵长类

第十九页，共83页。4．不能盲目使用近交系动物近交系动物遗传背景清楚，反响均一，个体差异小，广泛地用于复制疾病模型使用近交系时应注意：①动物形成亚系后，不应再视为同一品系，要充分理解新品系的特征和背最材料②即使作为已形成模型的品系，由于不适当的育种方法和环境改变，还可发生新的基因突变和遗传漂变(geneticdrift)，即存在着变种甚至断种的危险③国外常用2种近交系交配成的杂交Fl代动物作为模型

遗传漂变:指当一个族群中的生物个体的数量较少时，下一代的个体容易因为有的个体没有产生后代，或者有的等位基因没有传给后代，而和上一代有不同的等位基因频率。一个等位基因可能〔在经过一个以上的世代后〕因此在这个族群中消失，或固定成为唯一的等位基因。这种现象就叫“遗传漂变〞C57bl/6mouseC57bl/6jmouse第二十页，共83页。第二节动物模型在

人类疾病研究中的应用

一、肿瘤动物模型研制抗癌药物，常用大鼠和小鼠，也用豚鼠、仓鼠、猪、兔、鸟，鱼及灵长类等(一)自发性肿瘤模型(animalsmodelofspontaneoustumors)是一类不经人工处置而自然发生的肿瘤模型，其发病类型、发病率与实验动物品种、品系有关如C3H小鼠的乳腺癌发病率为97％，AKR系小鼠的自发性淋巴性白血病发病率雌性为76％～99％，雄性68％～90％优点：肿瘤发生率更似于人类，实验结果易推广于人，影响肿瘤发生、开展的因素容易观察缺乏：数量有限，发生时间上参差不齐，实验时间长，而所需动物数量较多，消耗大C3H小鼠：1920年Strong将一只Baggalbino雌鼠和一只DBA雄鼠进展杂交得到该品系AKR系小鼠：最早由洛克菲勒大学以随机交配维持的动物，1928-1936年Furth作为白血病易发群维持着。Rhoades将其兄妹交配了9代，之后Lynch进展到21代C3H小鼠第二十一页，共83页。(二)诱发性肿瘤模型(animalmodelsofinducedtumors)是用化学致癌物质、物理因子或生物因子来诱导例如,二苯苄芘诱发纤维肉瘤黄曲霉毒素B1及奶油黄可诱发大鼠肝癌N-甲基-N-硝基-亚硝基胍(MNNG)诱发大鼠胃癌二乙基硝胺(DEN)可诱发小鼠肺癌γ-射线及某些病毒对某种动物诱发不同类型肿瘤对病因学研究或药物预防性研究，有独特价值但诱癌过程通常很长，个体埋伏期差异大，肿瘤细胞形态特征变化很大，有些可诱发多部位肿瘤，罕用于抗癌药物挑选模型第二十二页，共83页。致癌剂体内致癌特点1.芳香族或偶氮类2.亚硝胺类3.黄曲霉毒素B1①需长期大量给药①致癌性强，有时①毒性极强，只需②本身常为前致癌小剂量一次给药亚硝胺剂量的几十物，在体内经药酶即可致癌分之一即可致癌活化才变成致癌物③种属差异明显，②对多种动物，不同②能诱发多种不同致癌物对不同部位及器官均能致癌，动物的肿瘤种属动物的致癌能甚至可通过胎盘力有明显的不同，使子代致癌且在不同部位产生不同的肿瘤④致癌作用受营养③一些亚硝胺类③能诱发多种癌肿及激素等的影响化合物对器官有明显的亲和性第二十三页，共83页。(三)移植性肿瘤模型(animalmodeloftransplantationtumor)肿瘤细胞株/无细胞滤液→宿主动物目前抗癌药物研制中使用最多的一类肿瘤模型，主要用于肿瘤药物挑选和药效学研究通常接种一定数量的肿瘤细胞(皮下、腹腔、静脉、颅内等)，甚至是无细胞滤液(病毒性肿瘤)，使动物在几乎一样的时间内患同样的肿瘤，成功率近100％肿瘤形态、生长率、对药物的敏感性、死亡时间等非常相近移植性肿瘤模型作为药物挑选的模型是非常适宜的全世界保种的瘤株有500种以上，其中约40种常用于挑选及药效学试验多数是小鼠肿瘤，少数为大鼠或仓鼠的肿瘤，较少用豚鼠、兔、猫、犬、猪、马及灵长类动物的肿瘤接种第二十四页，共83页。挑选肿瘤时多用：小鼠白血病P388和L1210(宿主为DBA/2小鼠)Lewis肺癌及B16黑色素瘤(宿主为C57BL/6小鼠)结肠癌Colon26、Colon38(宿主为BALB/c小鼠)小鼠:Erlish腹水癌、肉瘤180(S180)、白血病L5l70Y、Friend白血病、腺癌755、Ridaway骨肉瘤、小鼠肝癌2HAC、肉瘤37、脑瘤22、小鼠宫颈癌、白血病615大鼠:肿瘤W256、吉田肉瘤这些肿瘤大多数生长较快，倍增时间短，对抗癌药物的敏感性较高DBA/2小鼠Balb/c小鼠Wistar大鼠SD大鼠第二十五页，共83页。(四)人体肿瘤的异种移植性肿瘤模型(animalmodelsoftransplantationhumantumors)应用多种人体肿瘤模型进展抗癌药物的挑选，特别是疾病定向性挑选具有合理性，也是寻找抗实体瘤新药的一个重要途径早期人体肿瘤动物异种移植模型，主要是利用动物的一些免疫迟发的部位，如鸡胚、动物的眼前房、地鼠的颊囊等，但成活率较低、生长缓慢、肿块小、难以传代第二十六页，共83页。1966年免疫缺陷性裸鼠可异种移植人体肿瘤瘤株在裸鼠体内可以传代，而且肿瘤细胞形态、染色体数量和同工酶程度等，仍保持不变，对临床常用的抗癌药物敏感性也大致相似1977年NIC提出将人的乳腺癌(MX-1)、结肠癌(CX-1)和肺癌(LX-1)作为体内第二期挑选模型各类人体肿瘤在裸鼠体内异种移植模型仍在进一步考核，为抗癌药物尤其是对实体瘤敏感药物的寻找，提供了更好的模型该类模型挑选的结果与临床相关性较其他肿瘤模型为好，可作为三期临床的参考nudemice人乳腺癌MX-1人结肠癌裸鼠原位移植第二十七页，共83页。二、心血管系统疾病动物模型

(一)高血脂和动脉粥样硬化模型

1．高胆固醇、高脂肪饲料喂养法目前常用的造成血脂紊乱，引起动脉粥样硬化的方法死亡率低，可长期观察，与临床情况有较好的相关性饲料中添加蛋黄、猪油、胆酸等可促进高脂血症常用家兔、大鼠及鹌鹑；小鼠、鸡、鸽、猪、犬及猴均可用quailrabbitrat第二十八页，共83页。(1)兔最早用于高脂血症和动脉粥样硬化模型，至今仍用兔对外源性胆固醇吸收率高达75%～95%，对高血脂去除才能低，致血中胆固醇很快升高，主动脉斑块生成率可达100%，动脉粥样硬化病变与人体相似，3个月即形成动脉粥样硬化模型但高脂饲料易使家兔内脏脂质沉着，抵抗力下降，易死亡。病变部位主要出如今心脏的小动脉，而人主要在冠状动脉的大分支；兔为食草动物，代谢与人迥异，实验及结果评价时要慎重第二十九页，共83页。(2)大鼠饲料中单纯增加胆固醇，效果不佳；参加胆酸，可增加胆固醇的吸收；参加抗甲状腺药，病理模型较理想大鼠抵抗力较强，食性与人相似，饲养方便，应用较广，病理改变类似人的早期病变，不易形成后期病变(3)鹌鹑普通饲料中参加胆固醇，通常可致高脂血症，且易发生动脉粥样硬化斑块，有时伴有钙化及溃疡，病变发生快，批间波动小，常被应用鸡、鸽均类似，但因品种不同，常有很大差异

第三十页，共83页。(4)猪猪是动脉粥样硬化比较理想的动物模型某些品种的猪在喂高胆固醇、高脂肪的饲料后，能在较短时间内产生大动脉、冠状动脉及脑血管的粥样硬化，与人类疾病非常相似，假如设法损伤主动脉或冠状动脉，那么动脉粥样硬化形成更快猪心血管的解剖和生理类似于人，体形大，便于实验研究，是制备动脉粥样硬化较理想的动物第三十一页，共83页。(5)猴猴的解剖、生理、血脂、动脉粥样硬化的部位及性质、病症及对药品的疗效等，均与人相似高脂饮食仅1～3个月，即可产生动脉粥样硬化，血中胆固醇高达～15.6mmoL/L，可伴发生心肌梗死，脑、肾动脉亦产生病变

第三十二页，共83页。2．其他方法如免疫学方法、注射药物法、乳幼大鼠法免疫学方法：通常给兔注射大鼠主动脉匀浆，可引起血脂升高；假设注射牛血清那么可引起动脉内膜的损伤，如同时给予高胆固醇饲料，那么病变较明显；给兔喂含1%胆固醇饲料，再静注BSA，可加速动脉内膜的病变给兔静脉注射儿茶酚胺类药物(如NA)或皮下注射半胱氨酸硫代内酯皆可产生动脉病变，类似动脉粥样硬化未断奶的大鼠因奶汁中脂肪含量较高，而甲状腺功能不完全，血脂程度较高，可用此模型测试药物的降脂效果，但该模型对甲状腺素及其衍生物很敏感，对抑制胆固醇生物合成的药物效果不佳半胱氨酸硫代内酯：高同型半胱氨酸(Hcy)血症是心脑血管疾病的独立危险因素，其致病主要与同型半胱氨酸在体内转变成同型半胱氨酸硫内酯(HTL)有关，Hcy通过氧化作用引起血管内皮细胞损伤、降低抗氧化物的程度、增加自由基依赖的血管平滑肌细胞数量和胶原增殖、引起/促进低密度脂蛋白氧化及其功能、降低血管反响性、降低内皮细胞的抗血栓形成才能；HTL通过诱导血管内皮细胞凋亡、损伤蛋白质、与低及高密度脂蛋白结合、引起自身免疫反响，可从多方面引起动脉粥样硬化第三十三页，共83页。(二)高血压动物模型目前动物高血压模型多从不同角度(病因/病理过程)来模拟。常用大鼠、犬，猫、兔、猴1．自发性高血压模型遗传性高血压模型有大鼠和兔，Okamoto等培育成功的SHR突变系大鼠是目前广泛应用的高血压模型，可产生脑血栓、脑梗死、脑出血、肾硬化、心肌梗死、纤维化等。现又培育出:SHRSresistant:抗脑出血和脑栓塞的自发性高血压大鼠SHRSprone:出生后出现严重高血压、脑出血和脑栓塞

SHR大鼠SHRSP大鼠卒中易感型自发性高血压大鼠第三十四页，共83页。2．实验性高血压模型电刺激大鼠及猴的中枢神经系统或电刺激犬的喉上神经或迷走神经中枢端，造成反射性高血压将儿茶酚胺或血管紧张素等注射给大鼠、猫、犬、兔，可引起急性血压升高；注射前摘除双肾，那么动物对注射加压药物的敏感性大大进步3．听源性高血压模型采用大白鼠与家鼠杂交所生的大灰鼠，在噪声刺激下，血压普遍升高，与人的高血压相似，可用于降压药的挑选。但造模时间较长并需一定的设备、条件4．肾动脉狭窄型高血压模型常用大鼠、犬或家兔，手术使一侧肾动脉狭窄(一肾模型)或双侧肾动脉狭窄(二肾模型)，均可产生持续性高血压；假设采用肾门结扎型，也可造成高血压模型第三十五页，共83页。(三)心肌缺血动物模型最常用的心肌缺血模型动物是犬，大鼠、家兔、猫、猪、豚鼠等亦常用犬的体重适中，手术较易，且抵抗力较强，不似兔在实验中易死亡；但犬的冠状动脉变异较大，侧支吻合丰富，室间隔动脉特别兴隆，故在结扎冠状动脉主干时，易死亡；而结扎侧支那么不易成功，常需多处结扎猪的冠状动脉分布和构造类似于人，但目前应用不多遗传性高血压大鼠(自发性高血压大鼠,spontaneouslyhypertensiverats,SHR)是经培育而获得的一个大鼠突变系，自发性心肌梗死的发生率高，用于抗心肌缺血药物的研究，广为重视

第三十六页，共83页。心肌缺血性动物模型，一般通过造成冠状动脉狭窄或堵塞，或辅以增加心脏负荷的方法包括电刺激、药物法及冠状动脉阻塞法电刺激法：将电极埋入右侧下丘脑背内侧核以强弱电刺激而造成心肌缺血，但目前新药研究中较少用药物造成的心肌缺血，方法较多，例如，用垂体后叶素给家兔静脉推注或滴注可致心肌缺血；异丙基肾上腺素sc可使大鼠、豚鼠、兔、犬等产生心肌缺血，心电图显示S-T段降低等，每天反复尚可造成心肌缺血坏死，是评价抗心肌缺血药物的常用模型冠状动脉堵塞法,最常用，选用犬、兔、猪等，结扎冠状动脉，均可造成心肌缺血坏死，用油质或塑料微粒也可致冠状动脉发生阻塞。用一种遇水会膨胀的纤维环(Ameriod环)，可在2～3周内造成冠状动脉闭塞，该法目前国内应用不多第三十七页，共83页。(四)心律失常动物模型动物实验性心律失常模型常用于挑选和考核抗心律失常药物1.按心律失常引发部位分房性及窦性心律失常；刺激中枢造成交感或副交感神经失调所致的中枢源性心律失常和直接作用于外周所致的心律失常2.按诱发因素药物、电刺激诱发心律失常,结扎冠状动脉引起心肌梗死所致心律失常常用动物:小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猫和犬等大鼠、豚鼠、兔和猫的心室颤抖可自行恢复犬一旦发生室颤，很难自行恢复，需用电除颤第三十八页，共83页。大鼠对强心苷不敏感，不宜用于哇巴因或地高辛造模豚鼠心率较低，心电图波形及心脏对药物的敏感性较接近于人，常用作整体或离体心律失常模型兔胸腔纵隔构造特殊，可不用呼吸机行整体开胸实验猫那么较宜于进展中枢刺激诱发的心律失常(1)药物诱发的心律失常动物模型常用小鼠、大鼠、豚鼠、兔，亦可用犬氯仿可诱发小鼠心室颤抖，用Ach后再加氯仿那么可诱发心房颤抖或心房扑动(可用于药物挑选)，但氯仿对较大动物常难诱发心律失常氯仿加用大剂量Adr能诱发兔室性心律失常Adr加速静脉注射可诱发豚鼠和犬的室性心律失常第三十九页，共83页。强心苷中毒可出现多种类型的心律失常，常用于诱发心律失常的药物为哇巴因(毒毛花苷G),亦可用地高辛、毛花苷丙(西地兰)等;动物多用豚鼠，亦用犬，哇巴因频繁给药可观察其诱发豚鼠心律失常所需剂量乌头碱可致心律失常(直接兴奋心肌、加速Na+内流),利多卡因、胺碘酮等对该模型常有效。常用大鼠，亦用兔或犬。大鼠和家兔常用静脉滴注或静脉注射，在整体情况下观察预防和治疗效果，犬心脏部分用乌头碱，部位不同而诱发不同的心律失常氯化钡或氯化钙可诱发大鼠心律失常；犬心房部分用Ach，也可诱发心律失常；脑室内用某些药物亦可引起心律失常药物诱发动物心律失常的发活力制与人体临床相差较大，用单一模型评价药物作用时须慎重第四十页，共83页。(2)电刺激引起的心律失常动物模型电刺激中枢、外周神经及心脏皆引发心律失常电刺激兔丘脑，可因交感神经活动亢进而心律失常;而猫因交感和副交感神经活动均亢进导致心律失常刺激星状神经节亦可引起心律失常心脏部分刺激，因部位及强度不同易产生不同的心律失常，其阈值可测，强度适宜时心律失常是可逆的该型心律失常更贴近自然的异位冲动，为评价抗心律失常药物的重要模型常用兔诱发心室颤抖，以其阈值为评价指标；猫亦可用，但犬心室颤抖后需用电极除颤，损伤大，故少用第四十一页，共83页。(3)冠状动脉结扎引起心肌梗死后心律失常动物模型冠状动脉结扎引起心肌梗死后，可诱发心律失常，这与人心肌梗死后心律失常很相似，是重要动物模型大鼠在结扎冠状动脉左前降支后5min可产生室性心律失常，可持续30min至数小时，该模型手术简单，动物小而易得，术后即刻产生心律失常，是挑选抗心律失常药物的常用模型犬的冠状动脉左前降支中段至上1/3处结扎，术后20h～72h之间产生多源性室性心律失常，但不少犬因早期心室颤抖死亡;而应用Harris两步结扎，死亡率降低，室速成功率进步，可在动物清醒状态下观察经心导管从冠状窦注射塑料微球，阻塞冠状动脉，亦可造成心律失常第四十二页，共83页。(五)心力衰竭动物模型常用犬、猫、豚鼠，也可用兔，一般不用大鼠，因大鼠对强心苷和PDEI的强心反响不敏感常用模型是用戊巴比妥钠静脉滴注给猫、犬或豚鼠，以LVdp/dtmax(左心室内压最大上升速率)作为心收缩力的指标，观察强心药物的治疗量、中毒量、致死量和治疗宽度普萘洛尔、维拉帕米制备豚鼠等心力衰竭模型

第四十三页，共83页。三、呼吸系统疾病动物模型

(一)肺水肿动物模型(animalmodelsofpulmonaryedema)

肺水肿多数是由于肺毛细血管壁通透性增加或毛细血管内压升高所致常用化学物质(如硝酸银、氯化铵)注射或化学毒气(如氯气、双光气(diphosgene;perchlormethylformate,过氯甲酸甲酯;superpalite)吸入等方法双光气主要作用于呼吸器官，认为是刺激呼吸道感受器，通过迷走神经将冲动传入四叠体以下中枢，再通过交感神经将冲动传至肺血管，使其通透性增高，而发生肺水肿氯化铵中毒性肺水肿，认为是通过神经系统选择性地对肺毛细血管起作用，使毛细血管扩张、通透性增加，而致肺水肿有些化学药物和毒气可直接作用于肺毛细血管，使其通透性增高，引起肺水肿

第四十四页，共83页。1．氯气吸入小鼠体重25g左右，用1g重铬酸钾加5mL浓HCl，使瓶中生成薄薄一层云雾状气体后，将动物投于瓶中，小鼠吸入氯气而致肺水肿2.NO吸入犬18～23kg、兔2.5kg、大鼠200～300g、豚鼠400～500g，分别吸入含有1.35%(犬)、0.73%(兔)、0.8%～0.9%(大鼠)、0.9%～1.1%(豚鼠)浓度的NO即可发生肺水肿3．双光气吸入将12mg/L双光气滴在滤纸上，干后放入密闭容器内，将小鼠置于容器内15min，即可形成肺水肿，全部操作应在通风柜中进展4．氯化铵中毒选择大鼠、小鼠、豚鼠，分别ip氯化铵0.6mL/100g体重(大鼠)、0.15mL/10g体重(小鼠)和～0.7mL/kg(豚鼠)，使药液浓度分别达6%、3%、6%，即可发生肺水肿5．生理盐水注射安康家兔或犬，静脉快速输入大量生理盐水，按每分钟40mL/kg体重注入动物全血量1～倍时即可发生肺水肿第四十五页，共83页。(二)肺炎动物模型1.大肠杆菌动物模型新西兰白兔，将抽取大肠杆菌液的注射器经皮肤插入环状软骨下的气管内，回抽见有大量气泡后，抬高兔头颈部，使菌液缓慢流入气管下段及肺部。1/2～1h后出现喷嚏、喉鸣、拒食、耸毛、蜷缩、颤抖持续1～3h；5～6h体温上升,12h体温显著升高,呼吸增快,不安，部分见紫绀2.肺炎克雷伯杆菌动物模型Wistar大鼠，乙醚麻醉，垂直固定，显露声门，针头插入气管内，注入细菌混悬液，保持垂直体位5min。动物5～12h后，不活泼、纳差、反响迟钝、背部微弓，继而四肢瘫痪，最后呼吸渐弱而死亡

第四十六页，共83页。3．肺炎支原体动物模型金黄地鼠，ip苯巴比妥钠麻醉，取肺炎支原体液鼻腔内滴入4.仙台病毒性肺炎动物模型仙台病毒鸡胚传代，保存于30℃，1个月内使用。ICR小鼠从鼻腔内滴入仙台病毒液。第2天起小鼠出现耸毛、蜷缩、少食、少动、呼吸急促、饮水增加、大便枯燥、体重减轻。10天左右渐渐恢复第四十七页，共83页。5.腺病毒性肺炎动物模型新西兰家兔，取头高45°仰卧位。将7型人腺病毒液(Bristo株传代，Hela细胞培养，TCID(tissuecultureinfectiousdose,组织培养感染性量)(l0-4～10-5)5ml/kg体重,分3次气管内注入，每次间隔15min。24h后耳缘静脉注入0.9％NaCl10mL，10min后静脉注射NA(200mg/L)1.5ml/kg体重,1ml/min，匀速推注，再滴入NA(60mg/L)20ml/kg体重，1h。静注NA后，出现呼吸困难，肺部X射线片可见片状阴影，病理:炎性细胞浸润、淤血、水肿、出血和微循环障碍假设仅气管注入腺病毒液，不注入NA，那么动物呼吸平稳，肺部X射线检查正常，可见炎性细胞浸润、聚集第四十八页，共83页。6．肺孢子虫肺炎动物模型Wistar大鼠(120-150g)，观察1周无异常后sc醋酸可的松，每次25mg，每周2次。同时在饮水中参加四环素(100mg/100mL)，以预防细菌感染，用药7周可诱发大鼠肺孢子虫肺炎小鼠肺孢子虫肺炎模型，从第6周开场出现精神萎靡、进食减少、毛色灰暗、体毛松散并呈斑片状脱落、呼吸急促第四十九页，共83页。(三)肺气肿动物模型(animalmodelsofpulmonaryemphysema)常用蛋白水解酶类雾化吸入或气管内滴入1．雾化吸入法：家兔或大鼠，50mL2％猪胰弹性蛋白酶或5％木瓜蛋白酶，经超声雾化器雾化后(直径5µm以下颗粒占90％以上，50mL约4h雾化完毕)经管道送入自制雾化箱。经雾化吸入箱的开口处吸入酶的气雾剂。每次吸入约4h(至酶液雾化完)，每周吸入1次，共2次。末次吸入后1个月，可作为肺气肿动物模型第五十页，共83页。2.气管内滴入法:大鼠，3％猪胰弹性蛋白酶或木瓜蛋白酶。ip戊巴比妥钠(20mg/kg)及吸入乙醚麻醉。别离气管，用4号细针穿刺两软骨环间，向气管内快速推注酶液(0.1ml/100g体重)，注毕拔出针头，使大鼠保持直立位，左、右来盘旋转1～2min，使酶液尽可能均匀地到达两侧肺的深部，滴注酶液后2个月可作为肺气肿动物模型。病理：肺泡隔数量明显减少，所存肺泡隔变窄，部分肺泡隔断裂、消失，假设干肺泡交融形成大圆囊，甚至肺泡管扩张，作为肺气肿的形态学诊断指标目前多采用气道内直接注射蛋白酶类,复制肺气肿动物模型第五十一页，共83页。(四)肺结核动物模型豚鼠(350～500

g)，分别于感染结核杆菌的前3周、6周，每鼠腹股沟皮下注射佛氏佐剂

0.1mL，在一个特制的空气传播装置内，通过结核菌雾化吸入呼吸道感染，悬液中含活结核菌应达4×104／ml，该浓度可使每只豚鼠吸入5个活结核杆菌第五十二页，共83页。接触致病菌2周期间，致病菌在接种与未接种卡介苗的豚鼠中以同样的速度繁殖，然后繁殖减慢，首先见于接种过高效卡介苗的动物，几天以后见于接种过低效介苗的动物，最后，未接种卡介苗动物也见病菌繁殖减慢。感染24天后，将接种与未接种卡介苗的动物处死，见原发病灶邻近组织损伤将2～4个致病结核杆菌气雾吸入，12～14周以后处死，未接种卡介苗的动物肺内有明显空洞，而接种卡介苗的动物却没有；吸入低度感染气雾以后3周，未接种卡介苗的动物中有相当数量的结核杆菌进入血液循环而且又回到肺，使每个肺叶中存活的结核杆菌超过100个病灶，经过一段时间血源播散导致结核杆菌繁殖，形成继发病灶，而接种卡介苗的豚鼠明显地减少和延缓了空气传播结核杆菌菌血症期第五十三页，共83页。〔五)镇咳药的挑选和药效学试验豚鼠对化学和机械刺激都很敏感，刺激喉上神经亦能引起咳嗽，且较廉价，易获得，豚鼠是镇咳药的药效学研究中最常用的模型动物豚鼠的枸橼酸法或丙烯酸引咳法以及豚鼠和猫的电刺激喉上神经法皆是常用的药效学模型大、小鼠亦常用于初筛，大、小鼠能被化学刺激诱发咳嗽，但咳嗽和喷嚏很难区别，而且变异很大小鼠的氨水或二氧化硫引咳法，常用镇咳药的初筛猫在生理条件下很少咳嗽，但机械、化学刺激均可诱发咳嗽犬无论在清醒还是麻醉状态下，均可引起咳嗽，且在反复刺激时变异少，可用于药效学试验兔对化学刺激或电刺激均不敏感，且诱发喷嚏比咳嗽为多，故兔很少作为镇咳药的挑选模型第五十四页，共83页。四、消化系统疾病动物模型

(一)胆管囊肿动物模型采用绵羊或山羊(出生后14天内)

1．胆总管远端结扎术麻醉后手术显露肝门部，在胆总管与近侧小肠段汇接点的上方(一般距幽门4～5cm)，用丝线将胆总管全周缝扎，造成胆总管完全梗阻2．胆总管置管胆囊结扎术用1号丝线近肝总管处全周缝扎胆囊管，再将胆总管前壁纵行切开，在胆总管内置入一硅胶管，在硅胶管两端约处，分别用丝线全周缝扎肝总管和胆总管，造成胆总管不全性梗阻。术后胆道造影或直接观察见胆管节段性扩张，宽度达邻近胆管2～3倍以上，或直接见胆囊憩室，示造模成功第五十五页，共83页。(二)急性胰腺炎(acutepancreatitis，AP)动物模型由于不能控制胰腺的病变程度，一些模型如食物诱导法、十二指肠闭袢法、总胆管结扎法或静脉滴注大剂量铃蟾肽(蛙皮素)法等，都不合适于评价药物的最大治疗效应牛胆酸钠诱导法、结扎胰管法，那么能制备出反映胰腺病变依次加重的急性胰腺炎模型，且稳定、可靠第五十六页，共83页。1.牛胆酸钠(sodiumtaurocholate，NaTc)诱导法选用Wistar大鼠(180～260g)，实验前禁食12h，不禁水。麻醉剖腹后经十二指肠用4号头皮针头，插入胰管开口，向内逆行注入NaTc溶液(0.1mL／100g)。％、2.0%NaTc诱导AP后12h出现轻、重度水肿型急性胰腺炎。％NaTc可诱导坏死型胰腺炎2.结扎胰管法成年杂种犬(10～15kg)，实验前禁食12h，不禁水，于胰管开口附近切开十二指肠壁，置一细塑料管于胰管内，然后向内注入胰蛋白酶和犬自身胆汁混合液2～3mL(0.3mL／kg，lmL胆汁加4mL胰酶溶液，内含4mg胰蛋白酶)，滞留5min后拔去塑料管，荷包缝合十二指肠壁,可诱发犬急性坏死型胰腺炎第五十七页，共83页。(三)慢性胰腺炎动物模型成年杂种猫，隔夜禁食后，全麻，剖腹将尼龙导管插入主胰管，缝合固定后，烧灼闭合导管外露端，造成主胰管完全梗阻或先将一根尼龙导管插入主胰管内，缓慢注入94％乙醇1.5mL，然后截下长1cm导管留置在主胰管内，最后用26号细针头均匀点状注射94％乙醇1.5mL于胰腺本质内6周后出现典型的慢性胰腺炎，26周后慢性胰腺炎的发生率为100%第五十八页，共83页。(四)胃黏膜溃疡动物模型1．应激法用饥饿、刺激、寒冷等方法造成溃疡，以水浸应激法复制的胃溃疡(大、小鼠)模型较稳定2．烧灼法用电极或冰醋酸烧灼胃壁，可造成溃疡，溃疡部位由实验者自定，此模型为治疗性给药3．幽门结扎法大鼠较宜，小鼠和豚鼠亦可用，术后18h解剖，计数胃溃疡面积或用Oabe法计算溃疡指数4．乙醇胃黏膜损伤模型大鼠禁食48h，灌服无水乙醇，计数溃疡发生情况5．药物法大鼠或小鼠，注射组胺、皮质激素、利血平、保泰松或水杨酸等，可致溃疡复制溃疡病模型时，需禁食禁食时间，各不一样禁食不理想或同笼动物由于在饥饿时咬毛、吃粪均可影响溃疡程度第五十九页，共83页。(五)肝炎动物模型除狨猴外，红面猕猴、恒河猴、野生树鼩及甲獭等均可形成一定程度的阳性结果2.乙型肝炎动物模型(1)HBV有严格的宿主选择，除人外，目前仅在黑猩猩复制成功，也不能作为常规研究(2)鸭乙型肝炎模型鸭肝炎病毒在鸭体内产生的病理过程和预后与人的乙型肝炎相似，目前多用鸭肝炎作为人乙型肝炎的模型，挑选药物，但鸭属禽类，与哺乳类动物相距甚远美国把美洲早獭用作乙型肝炎的动物模型，我国也从喜马拉雅早獭成功地别离到类人乙型肝炎病毒(3)现使用携带有HBV的肝癌细胞株(HepG22.2.15)在裸鼠身上传代，HBV能在肝癌细胞中继续繁殖，可作为抗乙型肝炎病毒药物的挑选模型第六十页，共83页。3.丙型肝炎动物模型(1)黑猩猩是公认的HCV感染最理想的模型动物，其在HCV的感染过程、致病机制和免疫应答等与人类相似，黑猩猩感染HCV后血清ALT升高，肝活检显示肝脏炎症性病理变化，核苷酸类似物和蛋白酶抑制剂结合应用可降低黑猩猩体内血清中HCV病毒载量并有效治愈黑猩猩的丙肝(2)树鼩在进化上与灵长类亲缘关系最为接近,将HCVRNA阳性患者血清接种成年树鼩，34.8%树鼩出现间歇性病毒血症，在急性感染期有病毒血症和细微炎症表现，感染后的树鼩血清可再感染新生树鼩，2/4树鼩感染２年后发生肝纤维化和肝硬化第六十一页，共83页。(3)小鼠自然状态下不能感染HCV,一直以来致力于研究HCV不能进入啮齿类动物肝细胞并在其内有效复制的原因,同时利用转基因技术和肝细胞移植等方法改造小鼠,使其可以感染HCV,目前有价值的HCV感染小鼠模型主要包括通过将人肝细胞移植到免疫缺陷小鼠体内建立的人鼠嵌合肝模型和表达人HCV受体基因的人源化转基因小鼠模型(4)HCV感染大鼠，人鼠嵌合肝模型在大鼠孕期的第15-17天ipHuh7人肝癌细胞,此时胎鼠的免疫系统尚未发育,从而对人肝癌细胞产生免疫耐受,在胎鼠出生后24h内将人Huh7肝癌细胞注射到大鼠体内,不仅不发生免疫排斥反响,而且可以在大鼠肝脏中发现人白蛋白，但血中HCV载量远低于人第六十二页，共83页。〔六)胆结石动物模型1．食饵法选用叙利亚仓鼠(60g)，喂以高糖、不含非饱和脂肪酸饲料，20天左右可形成结石2．感染法多用兔、犬或大鼠，无菌条件下暴露十二指肠，从十二指肠乳头插管，注入蛔虫卵(3万～15万/mL)或大肠杆菌悬液，数月后，可形成结石3．狭窄法选用安康成年家兔，无菌手术，探明胆囊和胆道，用银夹适当地夹住胆囊颈部，产生梗阻，6个月后可形成胆囊结石4．切除迷走神经干法常用犬、兔，麻醉，手术暴露两侧迷走神经，从食管下端切除两侧的迷走神经干，术后兔胆汁成清楚显改变，4～5周形成胆固醇结石5．异物植入法安康成年兔或犬，手术暴露胆囊，在胆囊底部剪一小口，植入灭菌的蛔虫碎片，荷包缝合胆囊，2～3个月后可形成结石第六十三页，共83页。

五、泌尿系统疾病动物模型(一)肾小球肾炎动物模型肾毒素性肾炎，给予异种抗肾血清血清病型，给予大量异种血清抗原抗体复合物型细菌抗原与肾组织抗原致病1．L型菌诱发安康白兔(2～2.5kg)，耳缘静脉注入约1000万细菌2.静脉注射抗基底膜血清加脂多糖取BALB／c小鼠肾皮质碾成匀浆，再加4mL福氏完全佐剂，多点注射，滴度为1:8时取血清，小鼠尾静脉注射，24h后注射脂多糖3．异种血清法在(♂)大鼠背部皮下多点注射(福氏完全佐剂和阳离子化牛血清白蛋白)免疫，后ivBSA第六十四页，共83页。(二)急性肾功能衰竭动物模型方法:注入油酸、NA、变性血红蛋白；甘油、二氯化汞、硝酸铀、肾动脉夹闭等1.油酸法雄性Wistar大鼠，体重180～250g。0.15ml／kg油酸直接注入大鼠的左肾动脉内，油酸用植物油稀释2．去甲肾上腺素法大鼠150-220g，用银夹阻断肾动脉，直接向肾动脉中注入NA，辅以im甘油3．变性血红蛋白法实前禁水48-72h，由大鼠尾静脉注入人的变性血红蛋白。发生肾功能衰竭的大鼠表现为呕吐、少尿及鼻、口、眼明显出血，血钾和尿素氮升高，与人的肾功能衰竭病症相似，死亡率可达93.5％4．甘油法体重150-250g的大鼠。将动物放在代谢笼中，饲喂含有嘌呤的饮食。用药前禁水24h，选择体重减轻和脱水的大鼠，以10ml／kg体重50％甘油溶液，分别在大鼠两侧后肢肌内注射。多数动物少尿或无尿，尿浸透浓度降低。甘油引起的血红蛋白尿急性肾功能衰竭与人类急性肾功能衰竭表现的病症相似第六十五页，共83页。(三)泌尿系结石动物模型一般用药物诱发泌尿结石，用食饵法复制膀胱结石1．药物诱发泌尿系结石动物模型(1)乙二酰胺饲喂法SD大鼠，体重220-240g，饲喂l.2％乙二酰胺鼠标准饲料3天以上，100％的大鼠造成泌尿系结石；4个月龄新西兰兔，体重2.0-2.3kg饲喂1％乙二酰胺兔标准饲料20天，100％复制成肾结石。输尿管结石常发部位在入膀胱口处，有的中部和上部呈栓塞样结石(2)TPA和DMT饲喂法实验动物选用F344近交系大鼠。将研磨好的对苯二酸(TPA)拌入食物制成含3%～5％的饲料或二甲基对苯二酸(DMT)拌入食物制成含1％～3％的饲料，分别饲喂14-28天。饲喂14天后可诱发出泌尿结石模型，其病症和对药物反响与人类自发性结石很相似2．食饵性膀胱结石1个月龄左右的幼年雄性大鼠，用维生素A缺乏的食物饲养，经过10-14天后动物体重下降，生长停滞，可见眼病。30～60天中有14％发生膀胱结石，180～250天以后，膀胱结石发生率可达88％,但肾结石的发生率较低，只有41％第六十六页，共83页。六、内分泌及代谢疾病动物模型〔一)糖尿病动物模型主要以鼠、兔、小型猪为主1．化学试剂诱发的高血糖动物模型常用四氧嘧啶，可引起各种实验动物胰岛B细胞功能抑制，部分B细胞破坏，该型糖尿病与人类1型糖尿病非常类似，是降糖药物研究的良好模型。但因四氧嘧啶直接损伤B细胞，对诸如磺酰脲类刺激胰岛素分泌的降糖药是不适宜的第六十七页，共83页。2．自发性糖尿病动物模型自发性糖尿病的动物，主要有高血清胰岛素型，例如，obes／SHR、SHR／N-cp、fa/fa大鼠，小鼠有ob/ob，db/db，ad/ad，KK等；低血清胰岛素模型如BB大鼠、51.0121小鼠及中国地鼠等db/db小鼠是C57BL/Ks小鼠的突变株，db与ob并不是等位基因，但是db/db小鼠仍发生肥胖，血糖可由11.1mmol/L(200mg/d1)以下的正常程度逐渐升到33.3mmol/L(600mg/d1)以上，使雌鼠丧失生殖力，寿命较短(8个月)，主要表现为肥胖、高血糖、糖尿、蛋白尿，最后死于酮症第六十八页，共83页。ob/ob为肥胖小鼠和肥胖大鼠，幼龄时，肥胖无糖尿，5-6个月龄后，肥胖稳定，血中胰岛素和葡萄糖程度上升。该鼠无生育才能，用杂合子交配才能产生子代，种系维持比较困难ad/ad为成年肥胖和糖尿病鼠，7-10周龄后才表现为糖尿病，该型鼠也是不育的第六十九页，共83页。〔二)缺铁性贫血(IDA)动物模型常用大鼠、小鼠、兔、鸡、猫、犬、猴等，其中以大鼠的IDA模型最常用，该模型成模时间短、稳定、可行性及重复性强IDA模型的复制方法通常有3种：①给予低铁饮食②给动物逐次少量放血，造成铁的慢性丧失③低铁饮食辅以定期少量放血由于放血通常采用剪尾的方法，一方面放血不但引起铁的丧失，而且还引起其他营养素的丧失，不能排除铁以外因素对贫血的影响；另一方面剪尾常易引起动物感染而死亡。目前主要采用低铁饮食的方法第七十页，共83页。通过络合剂1％EDTA-2Na除去国产饲料中的铁缺铁性贫血大鼠外在表现早期(Hb≤100g／L)以毛发生长差、脱毛；眼球肿胀突出、苍白、兴奋为主，晚期(Hb≤60g／L)那么表现为倦怠、活动减少、易感染为主，血液学及生化检查表现为血红蛋白及骨髓铁(功能池)、血清浓度(交换池)、血清运铁蛋白及肝脏铁含量(储存池)均显著低于正常对照组,尤以血红蛋白和骨髓铁的变化较敏感以低铁饲料喂养实验用大鼠5-6周即可复制出IDA大鼠模型，但应注意不同种系的大鼠对低铁饲料的反响性不同,F344、Wiser大鼠的反响性优于SpragueDawley大鼠第七十一页，共83页。七、神经系统疾病动物模型一、癫痫动物模型癫痫是一种相当复杂的多因素临床症候群癫痫形成和发作的机制，比动物实验所能捉供的资料更复杂更多样化，但由于种种原因，研究人类癫痫的发病机制仍主要依靠动物实验。但由于癫痫的遗传及后天因素非常复杂，远非任何一种动物模型所能代表，故在评价实验结果时务必慎重第七十二页，共83页。1．大鼠部分简单性癫痫模型该模型相当于急性或慢性部分简单性发作，与外伤性癫痫的发病及病理改变类似。将大鼠麻醉后切开硬膜，直流电泳仪正极接PE管(PE管远端恰好接触脑皮层外表)内的FeCl3液(100mmol／L)，负极通过针灸针接同侧颞肌，通电电泳。分别在冠状缝单侧中线以及人字缝中线两侧钻骨孔，此三孔分别旋入平头螺纹钉接触硬膜外表，作为脑电记录电极。电泳完毕立即记录EEG3h，为急性期EEG。电泳完后15天及30天记录EEG，为慢性期EEG2．大鼠复杂部分性癫痫模型目的被公认为研究脑兴奋性、可塑性及长时程增强最实用的模型为点燃效应(kindlingeffect)模型第七十三页，共83页。麻醉后在大鼠海马CAll区坐标，冠状缝后3.8cm，中线旁2.0cm，双侧颅骨钻孔，将尖端裸露的漆包线所制的电极置入双侧海马：CAll区，用牙科水泥固定，也可选择双侧杏仁核团。术后7天，通过所置入的电极每日给予电刺激，刺激数日后可记录到对该刺激反响的后放电，随着刺激天数的增加，后放电逐渐延长并复杂化，直至出现癫痫样放电并伴癫痫发作。刺激30-50天，这种痛样放电及癫痫发作开场稳定，说明动物已被点燃，以后不予刺激也有自发性癫痫发作Racine在1978年将其分为5级，即I级：面部阵挛；Ⅱ级：I级加节律性点头；Ⅲ级：Ⅱ级加前肢阵挛；Ⅳ级：Ⅲ级加后肢站立；V级为Ⅳ级加跌倒。Ⅳ、V级可作为继发性全身性癫痫模型。哺乳类动物均可建立该类模型，广泛用于抗癫痫药物的药效研究，但其发病机制仍未完全说明第七十四页，共83页。3．慢性癫痫动物模型各种动物的大脑皮质感觉运动区是致病敏感区之一(1)钴法150-300g大鼠。在前囟后3mm、正中线右侧，以骨钳切除直径约为8mm的颅骨，并切开硬脑膜。将消毒的市售钴粉(200筛孔)约30mg，放在皮层运动区的前侧(面积约为10mm2，安好记录电极，缝合，每日肌内注射卡那霉素125mg/只；连续3天，以预防感染。在放置钴后2-3周，可见置钴对侧肢体发生阵挛，少数动物于部分