临床微生物标本的采集方法与运送

微生物检验与感染控制检验科微生物室何倩标本的采集与运送微生物报告单的解读临床微生物标本的采集与运送

我们应该追求：

“准确的病原学诊断”

“针对性病原学治疗”

正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！

微生物让人类步步为营，基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.棉拭子标本宜用运送培养基6.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。8.送检标本应注明来源和检验目的如何提高细菌阳性检出率？标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本（退检制度）高质量、多种分离培养基培养环境血培养标本采集与运送最新的指导原则山东省临床实验室血培养指导原则和操作指南山东省卫生厅医政处山东省临床检验中心血培养的采集时间对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本。血培养的采集次数患者：推荐同时采集２－３套（不同部位）血培养标本。（即双瓶双臂同时采集血培养标本。）婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不同部位）血培养标本。血培养的采血量成年患者：推荐采血量为每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。婴幼儿患者：推荐采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配常规血培养组合：一个需氧瓶和一个厌氧瓶作为一套血培养。当被用来做培养的采血量少于推荐值时，血必须首先接种需氧瓶，然后将剩余的血液接种入厌氧瓶。皮肤消毒推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。碘町作用1min碘伏作用1.5-2min洗必泰作用时间与碘町一样（但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）采集部位推荐从外周静脉采集血液标本。不推荐动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大。不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读提供解释。采集方法在采血之前，血培养瓶的橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作，并等待足够的消毒时间。严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非带有无菌手套。不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头。血培养标本的运送采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。血培养瓶在采血接种后在室温不超过数小时。血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。血培养标本的拒收瓶子上帖的标签错误或未帖标签。血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。血液凝固。培养基的选择推荐使用商品化的培养基使用添加抗菌药物吸附剂的血培养瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗患者血培养的检出率，增加细菌的分离率和分离速度，但同时也会增加污染菌的检出率。婴幼儿血培养推荐同时采集2次（不同部位）血培养标本。采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）推荐采用儿童专用血培养瓶。分枝杆菌血培养必须采用特殊的商品化分枝杆菌血培养瓶。所有培养基都必须孵育至少4周。感染性细菌性心内膜炎急性：在经验性抗生素用药前30min之内采集血培养。在30分钟至1小时之内连续抽取数套血培养。最初采集3套血培养。假如这些血培养在24小时之内结果是阴性的，再采集2套血培养，总共5套。导管相关的血流感染短期外周导管：通过静脉穿刺获得病人的两套外周血培养。无菌操作拔去导管并半定量培养。中心静脉导管及静脉留置口：至少两套血培养，其中至少一套采集自外周血静脉，另一套应该从导管口或VAP隔膜无菌采集，两套血培养采集时间应相近。痰培养标本采集与运送病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原体、衣原体与立克次体原虫寄生虫咳痰途经口咽部唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。不可避免地受到污染我国痰细菌培养现状标本送检率低苛养菌检出率极低结果重复性差报告速度慢感染菌与污染菌不易区分药敏结果与治疗反应存在差距下呼吸道感染病原学诊断注意事项痰标本的正确采集（包括导痰）痰标本及时运送和处理的重要性痰标本的洗涤与匀化痰涂片：质量评估和细菌、真菌初步报告接种平板：质量与质控，血、巧克力、麦康凯、沙保弱培养环境：CO2培养时间：24h，48h菌落观察要点结果报告：所有菌种（群），包括半定量临床意义判定其他病原体的检测：结核、真菌、厌氧菌、非典型病原体咳痰标本的采集标本采集方法医师或护士直视下采集标本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液临床上约半数咳痰标本不合格！关于咳痰标本在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后1～2h内必须立即进行实验室处理；咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本;取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口;深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导;无痰可用3％～5％NaCl5ml雾吸约5min导痰；也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰；咳痰标本不合格如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，白细胞小于10个，标本不合格。报告中注明“标本不合格”。几种下呼吸道直接采集的标本经气管穿刺吸引（transtrachealaspiration,TTA）经胸壁针刺吸引（transthoracicneedleaspiration,TNA）经支气管镜采样支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar

lavage,BAL）经支气管镜直接吸引防污染样本毛刷（protectivespecimenbrush,PSB）开胸肺活检（open-lungbiopsy，OLB）经人工气道吸引分泌物（endotrachealaspirates，ETA）痰培养的送检次数对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检；怀疑深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。痰培养的运送和保存尽快（<2h）送至实验室。如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放置时间不可超过24h。厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。痰培养的拒收光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显。没有标签或贴错标签。运送容器选择不当或有渗漏。标本采集不符合要求。同一天同一试验重复送检2次。延时送至实验室的标本。尿培养标本采集与运送你知道吗？尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误的培养结果。诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。多次收集或24小时尿不能用作培养。室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。尿培养标本清洁中段尿导尿导管尿经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液送检标本以晨起第一次尿液为佳不能立即送检者，可暂存4℃冰箱，但保存不超过8h清洁中段尿液尽量取早晨第一次尿液弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿详细告知病人以下操作步骤女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗尿道区域分开阴唇，开始排尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿导尿管尿液集尿袋内的尿液不能用作培养；导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中耻骨上穿刺吸取尿液常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少量尿液的小儿难以实施。方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，局麻穿刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高于耻骨联合2cm处进针刺入膀胱；取20ml尿液；置于无菌容器中并送往实验室。可用于厌氧菌检测集尿法采集尿液怀疑结核分枝杆菌感染时，可用一清洁容器留24h尿液取其沉渣10-15ml送检。粪便培养标本采集与运送粪便标本的采集方法自然排便采集标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部份的粪便1～3g。液体粪便则取絮状物，一般取1～3ml，直接装入粪便容器或运送培养基中送检。直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂、水和70%酒精，将肛门周围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门超越肛门括约肌约2-4cm，与直肠粘膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉拭子置于运送培养基中送检。粪便标本的运送一般粪便标本装于无菌封闭广口塑料杯；直肠拭子置于Cary－Bair拭子转运系统。做霍乱弧菌检查的粪便标本置于碱性蛋白胨水试管中。粪便标本：室温1小时内送至。直肠拭子：室温1小时内送至。高度怀疑霍乱弧菌感染的标本室温1小时内送至，运送必须符合特殊标本的安全要求。你知道吗？住院超过3d或入院诊断不是胃肠炎的患者不做常规粪便培养。除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做常规病原检测。有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血便或液状便的效果最好。对于弧菌的培养需要提出特别申请。脑脊液标本采集与运送脑脊液标本的采集方法以70%酒精或2%碘酊消毒背部下方，并麻醉之；然后以一特制通管针，轻轻的由第三与第四腰椎间的中线部位穿刺入脊髓蛛网膜，采集约3-5ml脑脊液于3支无菌试管中，每支试管至少1-2ml；然后马上将第2支（或第1支）送至实验室。做脑脊液培养时，建议同时做血培养。腰穿时必须作彻底消毒和无菌操作。脑脊液标本的运送常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内，半小时送检是可接受的，如果送检时间超过1小时，则会影响结果，在结果报告时，在备注处注明此情况。如不能及时送检，可使用血培养瓶（怀疑脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染时，请勿使用血培养瓶）穿刺液标本采集与运送穿刺液标本的采集方法由临床医生进行。胆汁的采集方法有三种：十二指肠引流法（以“B”管—来自胆囊，做细菌培养意义较大）、胆囊穿刺法及手术采取法，由临床医生采取，约2ml左右放入无菌密封容器立即送检。其它穿刺液的采集方法：2%碘酊消毒要穿刺的皮肤后，由临床医生穿刺采集标本（2ml左右），装入无菌密封容器立即送检。穿刺液标本的送运采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。保温立即送检，保证在≤15min内送至实验室，实验室收到标本后应立即接种。为提高阳性率，像胸腹水等标本，可接种到血培养瓶中送检。手术切口与软组织感染标本采集与运送皮肤组织标本标本的选择更大程度上依赖于感染的程度和性质而不是可疑的病原体。对大多数开放伤口，采集前应先去除表面菌群。除非有渗出物，干燥、结痂伤口一般不做培养。闭合脓肿应取渗出物和脓肿壁标本。开放脓肿处理同开放伤口。烧伤伤口应在广泛清洗和清创术后采集培养。建议取活检标本，伤口表面定量培养不一定有意义。代表性的标本应采自病灶活动区域或基底部有而不仅仅是脓液。采集方法未破裂脓肿：不能用拭子。消毒覆于脓肿表面的皮肤，用注射器将脓肿内容物吸出。然后切开脓肿、引流，取部分脓肿壁送检。送检时，标本都置于厌氧培养基中。开放病灶和脓肿：尽量去除表面菌群，用拭子采集病灶及底部或边缘的标本，置于需氧培养基中。也可对渗出液作厌氧培养。开放病灶不能做厌氧培养。烧伤伤口：清创，出现渗出液后以拭子用力采集，仅作需氧培养。也可送检活检组织标本。脓疱或水疱：酒精消毒使之干燥，对于患儿用23号针头挑破脓疱，拭子采集脓疱液和基底部标本。标记：不要只写“伤口”标记标本，应有专门的描述和解剖来源。注明渗出液来自开放伤口还是闭合伤口。注意事项迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。皮肤消毒对培养结果至关重要。革兰染色对标本进行评估。涂片中如出现上皮细胞提示标本已被污染。没有上皮细胞而有白细胞说明标本采集正确。不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶活动区域或基底部采集标本。小儿要求：小儿感染常出现皮疹如水泡等，应在这些地方仔细采集标本培养以发现病原体。创伤标本如没有炎性细胞可能说明采集了表皮正常菌群，与疾病过程无关，应重新采集。生殖道标本采集与运送生殖道标本的采集方法推荐使用男性或女性专用拭子。男性前列腺：用肥皂和水清洗阴茎头，通过直肠按摩前列腺，用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内。男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2～4cm，旋转拭子，至少停留20s，而使之容易吸收。女性阴道：擦除过多的分泌物和排出液，用2支无菌拭子从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物。1支需要涂片,1支拭子做培养。女性尿道：患者排尿1h后采集，拭去尿道口的渗出物，用拭子通过阴道，靠着耻骨联合，按摩尿道，采集尿液。宫颈：用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见，用拭子从宫颈上拭去黏液和分泌物，丢掉拭子，用新的无菌拭子紧帖宫颈内道轻轻采样。后穹窿：送抽吸液。生殖道标本的运送标本采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。常温2h内送至。眼、耳、鼻、喉标本采集与运送采集方法眼结膜标本：预先沾湿拭子，在结膜上滚动采集标本。眼角膜标本：在麻醉下，用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑，立即送检。眼部感染所获得的标本量很少，建议医师取样后直接接种在培养基平板上培养。内耳：接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液体，对破裂的鼓室，借助耳科诊视器，用拭子收集液体。外耳：用湿拭子将耳道的任何碎屑或痂皮拭去，在外耳道用力旋转拭子取样。采集方法鼻标本：用一根无菌棉拭子伸进一侧鼻孔约2.5cm，与鼻黏膜接触，轻轻旋转拭子，蘸取黏膜上分泌物，缓慢取出，直接送检。鼻咽：用无菌拭子经鼻轻轻插入鼻咽后部，慢慢旋转拭子5s以吸收分泌物，放入无菌管中。咽部检体，与采集前患者应用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，但拭子要避免接触口腔和舌粘膜。标本的运送标本采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。眼、耳、鼻、喉标本采集后应立即送检，防止干燥，禁止冷藏。耳部标本常温2h内送至。眼部标本应≤15min送至。如何解读细菌学检验报告病原菌的分类病原菌致病菌（种类少，毒力强）条件致病菌（种类多并在不断增加，毒力弱）临床上常将病原菌和致病菌称谓混用。但前者包含的范围显然较后者为广，或者可认为通常所说的致病菌是广义的概念。病原菌：是指能入侵宿主引起感染的微生物，包括细菌、真菌、病毒等。病原菌按致病性分类如下：条件致病菌与菌群失调条件致病菌：某些细菌在正常情况下并不致病，当在某些条件改变的特殊情况下可以致病，这样的细菌称为条件致病菌或机会致病菌。这种特定的条件大致有以下几种：寄居部位的改变、免疫功能低下、菌群失调。

菌群失调：是宿主部位正常菌群各类菌间的比例发生较大幅度变化而超出正常范围的状态。由此产生的一系列表现，称为菌群失调症或菌群交替症。条件致病菌的主要特点毒力弱或无明显毒力；常为耐药菌或多重耐药菌；引起感染的对象是长期使用抗生素,

机体免疫功能下降的患者。条件致病菌的几种身份病原菌：会于宿主体内繁殖并侵入或破坏组织，引起感染的微生物。患者由这类菌引起感染，用细菌报告提示的抗生素治疗，疗效明显。定植菌：（定植：细菌或真菌在人体的某个部位定居下来形成相对稳定的寄生状态,不会随外界机械冲击而完全离开原来寄居部位。）会于体内繁殖但不会入侵或破坏组织的微生物。以下现象提示报告的细菌为定植菌：①用细菌报告提示的抗生素治疗，该菌消失，感染症状依然存在。②或是由于该菌泛耐药，临床凭经验联合用药，感染症状好转，但该菌依然存在。污染菌：留取标本过程中，污染了非感染部位的细菌。按其治疗无效，多次送检可排除。二、药敏试验与报告解读

基本概念药敏试验的临床价值报告解读与相关问题药敏试验概念:

测定抗感染药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用的方法称为药物敏感性试验，简称药敏试验。目的：检测可能引起感染的细菌对一种或多种抗菌药的敏感性。方法：纸片法、稀释法、Etest法结果判断标准:

目前我国药敏试验判断标准参照CLSI标准文件，CLSI文件是我国的卫生部部颁文件。CLSI简介临床最常用到CLSI标准文件是抗菌药物敏感性试验标准文件。本文件是针对需氧菌药敏的标准指南。其主要内容包括需氧菌纸片法和稀释法药敏试验的选药（抗菌药物分组）、结果判断标准（折点）和质量控制。CLSI根据细菌学、药动学和临床资料设定并定期修订抗生素对不同细菌敏感折点，通过折点将细菌分为敏感（S）、中介（I）、耐药（R）。CLSI最新版本M100-S19敏感:

最高血药浓度＞4倍MIC，使用常规剂量有效；中介：最高血药浓度≈MIC，加大剂量或药物浓缩部位有效；耐药：最高血药浓度＜MIC，无效。CLSI推荐的药敏试验药物分组抑菌环直径和最低抑菌浓度（MIC）分界值标准肠杆菌科菌抑菌环直径和MIC解释标准抑菌环直径与MIC抑菌环直径:是指含抗菌药物的纸片能够抑制所有肉眼可见细菌生长的范围。

MIC(minimalinhibitoryconcentration，最小抑菌浓度）：是指在体外试验中，抗菌药物能抑制培养基中细菌生长的最低药物浓度。是抗菌药抗菌活性指标，显示出药物抑制病原微生物的能力。抗生素的等效性抗生素的等效性：是指用一种相关抗生素的试验结果预测同类抗生素体内抗菌活性。如头孢噻吩与其他一代头孢具有等效性，可用头孢噻吩结果预测其他一代头孢。此特性允许检测少数几种抗生素而不影响临床对其他抗生素的广泛选择。细菌的耐药性细菌耐药性：是细菌抵抗抗菌药物杀菌、抑菌作用的一种防御能力，一种生物学的表型。天然耐药（固有耐药）：耐药性为某种细菌固有的特点称细菌的天然或固有耐药性。天然耐药非常稳定，据此就可预测某一细菌或可能存在的细菌对某种抗生素是否耐药。获得性耐药：由于细菌获得耐药基因，使原来敏感的细菌变为耐药称细菌的获得性耐药。获得性耐药是目前临床面临的最主要的耐药问题。由天然敏感菌基因突变或获得一段基因片段，使其基因型改变而产生耐药。获得性耐药不断在变化（其变化频率与抗生素应用相关），不能预测，需要做药敏试验。2.药敏试验的临床价值评价抗菌药物敏感性，新抗菌药物的药效学评价。评价指标：MIC、抑菌环直径、MIC50、MIC90指导细菌感染治疗时的抗菌药物选择。鉴于获得性耐药不断在变化，天然抗菌谱已无法指导对多数细菌治疗时的抗菌药物选择。因此，病原学检查和药敏试验对临床抗感染治疗具有重要意义。监测细菌耐药性变化，为医院制订预防措施提供依据。3.报告解读与相关问题报告单简介药敏试验药物选择特殊耐药机制的解读阴性报告结果的解读各种标本阳性结果的解读相关问题与临床可能的抱怨药敏试验药物选择

药敏试验药物选择原则代表药物在药敏试验中的作用药敏试验药物选择原则代表性：所选药物应具有代表性及对同类药物有提示作用，同类药物通常只选择一种或几种代表品种；预报性：选择药物可对抗菌药物使用或耐药机制有提示作用。如金葡菌对苯唑西林耐药提示对所有β-内酰胺类耐药；革兰阳性球菌耐庆大霉素提示对氨基糖苷类耐药；肺炎链球菌选择苯唑西林提示青霉素耐药性。如大肠和克雷伯菌药敏中选三代头孢（头孢他啶、头孢噻肟）或氨曲南可提示细菌是否产ESBLs；在肠球菌药敏中选高浓度庆大霉素或链霉素可提示能否采用联合用药方案。特殊性：选择感染部位有较高浓度的抗菌药。如尿路感染的尿液标本可选择呋喃妥因，中枢神经系统感染的脑脊液可选氯霉素、头孢呋辛等（能通过血脑屏障）。代表药物在药敏试验

中的作用——代表性代表性药物在药敏试验中的作用不仅仅局限于该药物本身,还代表与其相关的抗菌药物类似药物，药敏结果可用于解释相关药物头孢孟多、头孢尼西和头孢呋辛亚胺培南和美洛培南环丙沙星和左氧氟沙星洛美沙星、诺氟沙星和氧氟沙星头孢噻肟和头孢曲松青霉素G和氨苄西林阿奇霉素、克拉霉素和红霉素万古霉素、替考拉宁代表药物在药敏试验

中的作用——预报性特殊耐药机制的解读常见特殊耐药表型ESBLs(产超广谱β内酰胺酶）MRS（耐甲氧西林葡萄球菌）包括MRSA(耐甲氧西林金黄色葡萄球菌）和MRSCN（耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌）BL（产β内酰胺酶）HLAR（高水平氨基糖苷类耐药肠球菌）AMPC酶碳青酶烯酶特殊耐药机制的解读CLSI规定不能报敏感的抗菌药和细菌组合CLSI.PerformanceStandardsforAntimicrobialSusceptibilityTesting;NineteenthInformationalSupplement.M100-S19ed.2009,28(1):23.阴性报告结果的解读阴性报告提示以下可能非感染性疾病感染已治愈感染未治愈，但各种原因导致病原体未检测出来采样运送不当:标本采集、送检、保存不当，导致病原菌死亡，污染菌大量增殖；抗生素影响：经抗菌治疗，标本中含大量抗生素，病原菌受到伤害，不能正常生长；苛养菌：如嗜血杆菌、军团菌、淋球菌等因培养基营养成份不佳或培养条件限制，导致漏检；特殊病原体：常规培养无法检测的病原体如厌氧菌、结核杆菌、衣原体、支原体、病毒等。检验技术受限:实验室条件和人员技术影响。血培养阳性结果的解读临床因素–病史、体征、白细胞计数、影像学、病程、其它部位的培养结果实验室因素–微生物鉴定–血培养阳性率（阳性瓶/总数）–每套血培养阳性的瓶数–微生物阳性检出时间–菌株种类（如凝固酶阴性葡萄球菌）•传统方法（生化、抗菌谱）痰培养阳性结果的解读痰培养结果包括：涂片染色结果、分离致病菌的鉴定结果、药敏试验结果。痰涂片革兰染色报告的内容白细胞和鳞状上皮细胞数量。包括白细胞和鳞状上皮细胞数/低倍镜、细胞内是否含有细菌和胞内细菌染色及形态学特性。细菌学镜检的描述性报告。痰标本直接涂片的目的和意义评价标本质量。判别标本是否适合做细菌培养。初步判定病原菌。判断病原菌的有无、数量及其类别。有助于初步报告、选择培养基和对培养结果的综合分析。痰培养阳性结果分析常见有三种情况第一种情况：患者有典型的呼吸道感染症状，按细菌报告选抗生素疗效明显这类患者的痰标本共同特征：痰涂片革兰染色:见大量的白细胞，并见白细胞吞噬或伴行大量形态一致的非上呼吸道正常菌；痰培养：生长大量非上呼吸道正常菌，痰培养与痰涂片所见一致结论：报告的细菌为病原菌。痰培养阳性结果分析第二种情况：患者有典型的呼吸道感染症状，按细菌报告选用的抗生素治疗无效，改为凭经验联合用药这类患者痰细菌检验时有如下特征：痰涂片：大量白细胞，吞噬或伴行的是革兰阳性球菌（形似葡萄球菌）、革兰染色阴阳不定的小球菌或杆菌（形似厌氧菌）、出芽的念珠菌，偶见革兰阴性杆菌；痰培养：生长大量阴性杆菌，痰涂片所见的大量细菌不生长或少量生长，痰涂片镜检与痰培养结果不一致。结论：报告的细菌为定植菌痰培养阳性结果分析第三种情况：患者的感染已基本治愈，做痰检的目的是希望得到一张阴性报告作为停止治疗、出院的凭证这类患者的痰做细菌检验时的特征：痰涂片：显示标本来自上呼吸道,大量上皮细胞,大量阴性杆菌，少量白细胞。痰培养：生长大量阴性杆菌，较常见的是绿脓杆菌和不动杆菌结论：报告的细菌为定植菌。肺部细菌性感染病原诊断：确定意义①血或胸液培养到病原菌②纤支镜或人工气道吸引标本 细菌>105cfu/ml（2+）

BALF（支气管肺泡灌洗液）：细菌≥104cfu/ml（1-2+）

PSB（防污染样本毛刷）、PBALF（防污染灌洗）：细菌>103cfu/ml（1+）肺部细菌性感染病原诊断：有意义①合格痰标本培养致病或条件致病菌≥3+②少量生长，但与镜检结果一致 （肺球、流感、卡他莫拉菌）③入院3天内多次培养到相同细菌肺部细菌性感染病原诊断：无意义①痰培养到上呼吸道正常菌 草链、表葡、非致病奈瑟菌、类白喉杆菌等②多种病原菌少量(<+++)生长③不符上述“确定”和“有意义”条款尿培养阳性结果的解读正常情况下的尿液是无菌的，但膀胱中的尿液经尿道排出体外时可受到下尿道中正常菌群的污染而出现细菌。因此对不同方法获取的尿液标本培养结果需正确评价，才能有效指导临床合理治疗。尿培养应同时做菌落计数才有意义。一般认为，清洁中段尿标本中单种细菌菌落数>105CFU/ml可能为感染；<5×104CFU/ml可能为污染，在两者之间需要根据具体情况进行评估。有文献推荐：革兰阴性菌>105CFU/ml，革兰阳性菌>104CFU/ml，念珠菌>103cfu/ml为诊断尿路感染的标准。尿培养阳性结果的解读尿培养阳性结果的解读以下因素可使尿液中细菌数量减少，判断结果时应予以注意：使用抗生素治疗，细菌生长受到抑制；尿液稀释，尿比重<1.003，营养成分减少，细菌生长迟缓；尿pH<5.0或>8.5，细菌生长受阻；尿频时，膀胱内细菌停留时间短，菌落数减少；尿道口消毒液混入标本中，影响细菌繁殖，菌落数减少；不同种类的细菌生长速度不同、营养要求不同，菌落计数有所不同。相关问题1—如何正确应用药物敏感结果？正确运用药敏试验结果应考虑以下3个方面：首先要确定病原菌，如未找到真正的致病菌，药敏实验不但不能指导用药甚至可能误导临床；重视耐药监测，这是经验用药的一个重要的参考；考虑到药敏试验的局限性：体外报告敏感的药物体内治疗不一定有效，而体外报告耐药的药物体内治疗不一定无效。原因：1.分离的细菌不是真正的致病菌。污染菌？定植菌?2.药敏标准的局限性，CLSI制定的药敏折点不能全面考虑到药物在体内的代谢，导致药敏标准有时和疗效标准不一致。

3.体外药敏条件较单一而恒定，而体内环境比较复杂。根据药敏报告治疗可能存在90/60原则即药敏报告敏感的药物90%治疗有效，但报告耐药的仍有60%有效。解决方法：1.实验室应与临床密切配合确定真正的致病菌。

2.根据药动学和药效学参数（