人体解剖生理学实验

试验二：神经--肌肉标本的制备与骨骼肌收缩[试验内容]坐骨神经—排肠肌标本的制备刺激强度与骨骼肌收缩反响的关系骨骼肌单收缩的分析骨骼肌收缩的总和与强直收缩[目的要求]学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。学习并把握蛙类坐骨神经－排肠肌标本的制备方法。学习肌肉试验的电刺激方法及肌肉收缩的记录方法。观看刺激强度与肌肉收缩反响的关系。3个时期。式的转变。[根本原理]蛙类的一些根本生命活动和生理功能与恒温动物相像，假设将蛙的神经-肌肉说明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学试验中常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本争辩神经、肌肉的兴奋、兴奋性；刺激与反响的规律和肌肉收缩的特征等，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学试验的一项根本操作技术。度为最适刺激强度。3个时期：埋伏期、收缩期和舒张期。直收缩。[动物与器材]蛙或蟾蜍、常用手术器械(手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针和玻璃分针)、蜡盘、蛙板(木质或硬泡沫塑料)、玻璃板、同定针、锌铜弓、培育皿或不锈钢盘、污物缸、滴管、纱布、粒棉线、任氏液。计算机采集系统、张力传感器(100g)[试验方法与步骤]一、神经－肌肉标本的制备破坏脑、脊髓取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净〔勿用手搓〕。左手握右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管〔5.1-1〕。然后将探针改2～3有碰及颅底骨的感觉。呼吸运动消逝,四肢完全松软，失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动，退出椎管。如蟾蜍仍有反射活动，表示脑和脊髓破坏不彻底，应重破坏。剪除躯干上部、皮肤及内脏用左手捏住蟾蜍的脊柱，右手持粗剪刀在柱两侧将腹壁及内脏剪去(留意避开坐骨神经),并剪去肛门四周的皮肤，留下脊柱和后肢。剥皮一只手捏住脊柱的断端〔留意不要捏住脊柱两侧的神经〕，另一只手捏住其皮肤的边缘,向下剥去全部后肢的皮肤〔图5.1-2〕。将标本放在干净的任氏液中。将手及使用过的探针、剪刀全部冲洗干净。分别两腿用鑷子取出标本,左手捏住脊柱断端,使标本反面朝上，右手〔也可不进展此步〕。然后将脊柱腹侧向上，左手的两剪刀沿正中线将脊柱盆骨分为两半(留意，勿伤坐骨神经)。将一半后肢标本置于盛有任氏液中备用,另一半放在蛙板上进展以下操作。7、8、9〔肛门处〕绕过坐骨联到达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌〔5.1-3〕。游离坐骨神经和腓肠肌用蛙钉或左手的两个手指将标本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半在其跟腱处穿线、结扎。剪去其它不用的组织操作从脊柱向小腿方向进展。①剪去多余的脊柱和肌肉 将后肢标本腹面对上，将坐骨神经连同2～3节脊椎用粗剪刀从脊柱上剪下来再将标本反面对上用镊子轻轻提起脊椎上而下剪去支配腓肠肌以外的神经分支，直至腘窝〔图5.1-4(A)〕，并搭放在1/3〔2/3〕，制成坐骨神经-小腿的标本。肌的结扎线剪断跟腱。用粗剪剪去膝关节以下部位，便制成了坐骨神经-腓肠肌标本〔5.1-4(B)〕。检验标本用沾有任氏液的锌铜弓触及一下〔或电刺激刺激〕坐骨神经用热玻棒、食盐〔或1%HSO滤纸〕刺激坐骨神经中枢端〔或肌肉〕，观看肌肉2 4程中肌肉收缩有何变化?二、刺激强度与骨骼肌收缩反响的关系试验仪器用品的预备(100g)见图。调整好扎线的张力，不行过松或过紧，以使肌肉自然拉平为宜(保证肌肉一旦收缩，即可牵动张力传感器的应变梁)。计算机采集系统的预备即可进展试验。试验观看启动刺激图标，观看肌肉收缩反响。假设肌肉无收缩反响，则适当增度。同法渐渐增加刺激强度，观看刺激强度与肌肉收缩反响的关系。3－4次同等高度的收缩曲线和刺激强度。将试验结果填入表。表 刺激强度与收缩反响的关系试验次数试验次数刺激强度〔mV〕收缩幅度〔mm〕三、骨骼肌单收缩的分析试验仪器用品的预备〔见上〕试验观看刺激腓肠肌选用单刺激方式，调整刺激强度、使肌肉收缩的幅度适中(30mm左右)。将试验3个时程：埋伏朋、收缩期与舒张期。〔2〕刺激坐骨伸经将神经搭在肌槽的刺激电极上，刺激输出与肌槽上的刺激电极连接(图2－。在刺激参数部不变的状况下，比较刺激神经与刺激腓肠肌的单收缩曲线。四、骨骼肌收缩的总和与强直收缩试验仪器用品的预备〔见上〕试验观看收缩的总和变化。强直收缩3－5mm调整1.5次/s(5)、6次/s(10)、10次(2—9)有间歇，使肌肉休息片刻。[留意事项]用金属器械触碰神经干。标本的兴奋性。制备标本时，神经纤维应尽可能长一些，将附着于神经干上的结缔组织使标本兴奋性稳定,再开头试验效果会较好。各仪器应妥当接地，仪器之间、标本与电极之间应接触良好。经常滴加任氏液，保持标本潮湿[思考题]?为什么??如何保持标本的机能正常？是什么？及生理过程？刺激骨骼肌与刺激神经的单收缩曲线有何不同？完全强直收缩的条件与机制。试验三：影响神经冲动传导的因素观看试验目的：备方法。〔包括双相和单相动作电位〕。学习和把握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。何种影响？试验原理：蛙类的一些根本生命活动和生理功能与恒温动物相像，假设将蛙的神经-肌肉说明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学试验中常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本争辩神经、肌肉的兴奋、兴奋性；刺激与反响的规律和肌肉收缩的特征等，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学试验的一项根本操作技术。奋过程所发生的这种电位变化称神经干动作电位。假设将两个引导电极置于正常完整的神经干外表，当神经干的一端兴奋之后，兴奋波会先后通过两个引导电极(r1r1’,5.5-1)，可记录到两个相反方一个方向的电位偏转波形，称为单向动作电位。化而转变，这一点不同于单根神经纤维的动作电位。传导速度各不一样。蛙类坐骨神经干中以Aα类纤维为主，传导速度(V)大约为35～40m/s。测定神经冲动在神经干上传导的距离(d)与通过这段距离所需的时(t)，V=d/tt1，t2，t2～t1动作电位起点的间隔时间)；然后再测量标本屏蔽盒中两对引导电极起始电极之d(5.5–15.5-2r1～r2速度(V)＝d/(t2～t1)•m•s-1。动作电位的传导速度与动作电位产生的速度亲热相关,都是以离子运动为根底动作电位在神经干上传导的速度产生影响。仪器与试剂及材料：蟾蜍或青蛙、神经标本屏蔽盒、电子刺激器、示波器或计算机生物信号采集〔或尖头无齿镊〕、金属探针〔解剖针〕、玻璃分针、蛙板〔或玻璃板〕、蛙钉、细线、培育皿、滴管、双凹夹、培育皿、倍氯化钾任氏液、0.5试验方法与步骤：神经－肌肉标本的制备坐骨神经标本的制备定后开头试验。仪器及标本的连结用浸有任氏液的棉球擦拭神经标本屏蔽盒上的电极，标本盒内放置一远中端置于引导电极上。假设使用刺激器、示波器进展试验，则参照图5.5-1连接仪器。Hz，0.1～0.2ms，强度依据标本兴2ms/cm。外触发输入接刺激器的触发输出端。触发选择置于外触发同步。开启至荧光屏中间。5.5-2CH1、CH2观测和测定双相动作电位缓慢增大刺激强度，在伪迹后消灭的先上(负相波)后下(正相波)的电作电位波形的变化。读出波宽为某一数值时的阈刺激。增大刺激强度的过程中，伪迹和动作电位均随之加大，但当强度加大加大。这是区分刺激伪迹与动作电位的牢靠方法之一。5.5-3)电位上下相的振幅和整个动作电位持续时间数值。将神经干标本放置的方向倒换后，双相动作电位的波形有无变化？5．观看单相动作电位用镊子将两个引导电极r1,r13mol/L数值。6．动作电位传导速度的测定换一根坐骨神经，按步骤3〔1〕搭放在神经屏蔽盒的电极上。进入“神经干〔则可在一个通道内显示两个通道的图形个通道中〔或示波器的上、下线〕观看到先后形成的两个双向动作电位波形。t1，下线为t2(t2～t1d(即测定r1～r25min导速度。5min的传导速度。试验结果：V＝d/(t2～t1)(m/s)。留意事项：用金属器械触碰神经干。标本的兴奋性。制备标本时，神经纤维应尽可能长一些，将附着于神经干上的结缔组织使标本兴奋性稳定,再开头试验效果会较好。各仪器应妥当接地，仪器之间、标本与电极之间应接触良好。经常滴加任氏液，保持神经标本潮湿，但要用滤纸片吸去神经干上过多上，以免影响动作电位的波形。测定动作电位传导速度时，两对引导电极间的距离应尽可能大。思考题：神经被夹伤或经KCl溶液处理后，动作电位的其次相为何消逝?特性有冲突吗？为什么?引导电极调换位置后，动作电位波形有无变化?为什么?t1算神经动作电位传导速度?用一对引导电极能否测定神经动作电位传导速度?的？4℃附：刺激伪迹渐渐增大刺激强度时，在屏幕的左侧基线上第一个波即为伪它的产生气制有二，一是通过刺激电极与记录电极之间的电容偶合进入放大器，激器、示波器功能状态的标志。但伪迹太大，会使动作电位发生畸变。细胞膜的电缆学说细胞外液和细胞内液均为含电解质的液体，可以看作为两个导体，有肯定的电阻；细胞膜是含脂质的膜，相对地视作绝缘体，与前变小，是膜外电阻、膜电阻及膜内电阻引起的后果。双极记录法本试验使用的记录方法为双极记录法，所记录到的电位变反映了膜外电位的转变。刺激的极性法则以直流电作用于神经时，在通电、断电时均可产生兴时发生兴奋的缘由；阳极下的兴奋性降低，称为阳极电紧急．断电后，阴极下的兴奋性降低，称为阴极后压抑；阳极下的兴奋性上升，称为阳极后加强，是断电时发生兴奋的缘由，通常所说的刺激发生在阴极下，刺激时阴极下的外向电流，指的就是通电的状况而言的。记录介质通常所说双相动作电位的波形，其记录介质是空气或油。假设上滴过多的任氏液。试验四：蛙类离体心脏灌流及药物影响〔综合设计性试验〕试验目的：学习离体蛙心灌流的试验方法，了解离体器官的争辩方法。了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调整意义。。试验原理：坏，例如酸碱度及离子浓度的急剧转变等，心脏的活动就会受到影响。释放乙酰胆碱，使心肌收缩力气减弱，心率减慢。的影响与其内部所含物质的成份有关。动物与器材：蛙心夹,计算机采集系统,张力传感器,滴管,培育皿,污物缸,纱布,棉线,橡皮泥,,0.65%NaCl1%CaCl1%KCl3%2.5%NaHCO1:50002方法与步骤：取一只蛙或蟾蜍,双毁髓后背位于蜡盘中,认真识别心脏四周的大血管。在左动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎,再从左右两动脉下方穿一线,并打一活蛙心套管,然后将盛有少量任氏液的斯氏蛙心套管,由开口处插入动脉圆锥.当套管进到大动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,提取蛙心夹连线并使蛙心套管尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推动,经动脉瓣插入心室腔内。此时可见吸去套管中的血液,更换颖任氏液。稳定套管后,轻轻提起备用线,将左右动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然心室内余血,使血管内灌流液不再有残留血液,保持套管内液面高度全都,进展试验。将插好的离体心脏套管固定在支架上,用蛙心夹住少许的心尖部肌肉.再传感器上,调整显示器的心脏收缩的曲线幅度适中。试验观看度。试验工程设计及结果观看温度对无机离子蛙心活动的影响A0.65%NaClB0.65%NaCl1%CaCl2心跳变化。

1～2C1%CaCl1～21%KCl1～22观看心跳变化。0.012～3观看心跳变化。递质和激素对蛙心活动的影响A0.01%1～2滴，观看心跳变化。B3%1～2察心跳变化。待心跳变化明显时，马上参加2.5%NaHCO3逐步恢复。心血管药物对蛙心活动的影响

溶液1～2滴，观看心跳试验结果。观看自己提取的植物制剂和人民常饮用的化合物对例题蛙心的活动影响有机化合物：乙醇、甲醇等。〔鲜组织用量多些泡冷却后备用。设计试验观看的工程数量10进展试验。留意事项：3复正常后再进展下一项试验。错。响试验结果。蛙心插管内液面应保持恒定高度。保持记纹鼓转速均匀全都。思考题：本试验说明心肌的那些生理特征？用试验说明内环境相对恒定的意义。试分析任氏液中适量离子,钙离子,钾离子对心肌的影响。为何强调试验保持灌流液面的恒定?灌流量对心脏活动的有什么影响？试想,活的机体在心交感神经兴奋时或迷走神经兴奋时对心脏有何影响？附：离子和药物对离体蛙心活动的影响的解释K＋对心脏活动的影响：总体看来心肌对细胞外K＋浓度变化比较敏感；但是不同部位心肌的敏感性细胞外液钾浓度增高时，对兴奋性的影响与其浓度增高的程度有关。当K＋浓度轻度或者中度上升时，细胞内外K＋的浓度梯度减小，K＋外流的力气减弱,静〔RP〕确实定值减小,和阈电位(TP)差值减小,细胞的兴奋性增高；当K＋的浓度大幅度的上升，RP〔膜内－55mv〕时，钠通道的开放舒张状态。此时，仅由Ca2＋的内流来构成动作电位，故上升支小而缓慢，使兴奋传导速度减慢，传导性降低。程加速，平台期缩短，不应期也缩短。K＋Ca2＋在细胞膜上有竞争性抑制；因此当膜外K＋的浓度上升时，平台期内流的Ca2＋削减，心肌细胞内。4Ca2＋对心脏活动的影响：Na＋用。因此，细胞外Ca2＋浓度发生变化时，与Ca2＋Na＋