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文档简介

实验五厌氧菌和分枝杆菌一、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌与肉毒梭菌形态及染色性

二、产气荚膜梭菌的厌氧培养实验三、结核病人痰液涂片-抗酸染色1．破伤风梭菌：革兰阳性杆菌，菌体细长、笔直，芽胞大于菌体，呈正圆形，位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状，为本菌典型特征。2．产气荚膜梭菌：革兰阳性粗大杆菌，芽胞椭圆形，位于次极端，不比菌体粗。小白鼠腹腔液涂片，革兰染色或荚膜染色，可见菌体呈单个或成双排列，四周有明显的荚膜。3．肉毒梭菌：革兰阳性短粗杆菌，芽胞椭圆形，大于菌体，位于次极端，使菌体呈汤匙形或网球拍状破伤风梭菌产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌动物试验一）试验目的了解产气荚膜梭菌的体外培养特性。二）实验材料1、泥土。2、培养基。

3、凡士林。三）实验方法1、用无菌镊子取少量泥土与培养基中；2、将凡士林加热熔解后，玻璃管吸取凡士林液体覆盖在培养基表面。3、放于37℃温箱中培养12~18小时。四）实验结果汹涌发酵的特点分

枝

杆

菌

一、结核杆菌形态染色片二、结核杆菌培养特征三、抗酸染色——肺结核患者痰标本的直接涂片检查

结核杆菌(抗酸染色)固体培养基上菌落呈干燥、坚硬、颗粒状、乳白色或米黄色，不透明，表面皱纹状，形似花菜。在液体培养基内呈表面生长，形成菌膜。

抗酸染色一）实验目的初步掌握抗酸染色法二）实验材料１、肺结核患者痰标本。2、抗酸染色液等。三）实验方法

１、用接种环挑取痰液涂片，干燥、固定。２、用抗酸染色法染色。３、镜检【染液】

抗酸性染液（一）（石炭酸复红液）

抗酸性染液（二）（3%盐酸酒精）

抗酸性染液（三）（碱性美兰液）（1）初染：将已固定的标本片置于染色架上或用染色夹夹好，玻片上加一小块吸水纸片（防止染液流洒），然后滴加石炭酸复红染液，在酒精灯上微微加热，直到染液冒出蒸气为止（不可煮沸和煮干，以免出现染料沉渣），离开火焰维持3~5min，水冲洗。室温较低时需反复加热2~3次。

（2）脱色：用3%盐酸酒精脱色30sec，脱色时应轻轻晃动玻片，直到基本无红色脱下为止，水冲洗。

（3）复染：滴加碱性美兰液

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