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文档简介
书--谷研生物公司销售本试剂 研究使用检测范围5U/L-120使用目的
本试剂盒用于测定人、血浆及相关液体样本中过氧化物酶(POD)含量。本试剂盒应抗体夹心法测定标本中人过氧化物酶(POD)水平。用纯化的人过氧(POD),再与HRP标记的过氧化物酶(POD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化物酶(POD)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人过氧化物酶(POD)浓度。试剂盒组130倍浓缩洗涤20ml×17终止6ml×12酶标试6ml×18标准品(2400.5ml×13酶标包被12孔×89标准品稀释1.5ml×146ml×1说明1显色剂A显色剂B液
6ml×16ml×1/
封板 2密封 1标本后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性操作步 释5号标准150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释4号标准150µl5号标准品加入150µl标准品稀释
3号标准2号标准1号标准
150µl4号标准品加入150µl标准品稀释150µl3号标准品加入150µl标准品稀释150µl2号标准品加入150µl标准品稀释加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔50µl然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备洗涤:揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如重复5次,拍干加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外温育:操作同3洗涤:操作同5A50µlB50µl,轻轻震荡混匀,3715分钟终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结计以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计封板膜只限使用,以避免交叉污染底物请避光保存严格
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