专题3课题2月季的花药培养

（一）被子植物的花一、基础知识花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊1.花的结构2、花的作用被子植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分(二)被子植物花粉粒的形成花丝花药：囊状结构，内有很多花粉粒1、雄蕊的结构雄蕊2.被子植物的花粉发育小孢子母细胞（2n）（）时期（n）单核（）期（n）双核期（）细胞核（n）（）细胞核（n）（）细胞（n）（）细胞（n）（）个精子(n)（）分裂（

）分裂单核（）期（n）（

）分裂1)被子植物的花粉是在

花药

中由

花粉母细胞

经过

减数分裂形成的。2)结合教材内容填下列示意图：减数小孢子四分体居中靠边有丝生殖花粉管生殖营养有丝2有丝分裂有丝分裂减数分裂1个花粉母细胞4个小孢子4个花粉管细胞核（营养细胞）4个生殖细胞（核）8个精子4个花粉粒同一个花粉粒中，精子和营养细胞的基因型相同。1、被子植物花粉的发育要经历哪些阶段？小孢子四分体时期、单核期和双核期等。2、花粉发育过程中的四分体和减数分裂中的四分体相同吗？不相同，花粉发育中的四分体是：花粉母细胞减数分裂形成的4个连在一起的单倍体细胞（小孢子）。减数分裂中四分体：是联会配对后的一对同源染色体（含有四条染色单体）思考与讨论4、营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么？

3、在正常情况下，一个基因型为AaBb的小孢子母细胞可以产生几个几种精子？8个2种思考与讨论控制花粉的萌发并提供营养。①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养细胞和两个精子。③同一个花粉粒中，精子和营养细胞的基因型相同。一个成熟的花粉粒即为雄配子体，有两种情况：1．产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过

阶段发育为植株，二是通过

阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中

的种类及其

的配比。2．填写培育花粉植株的途径图解：3．胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到丛芽的过程称为

，而把从愈伤组织到丛芽的过程称为

。（三）产生花粉植株的两条途径（）花药中的花粉（）（）胚状体愈伤组织丛芽生根移栽胚状体愈伤组织激素浓度脱分化再分化分化分化再分化（四）影响花药培养的因素影响花药培养的主要因素：

和

等。1．材料的选择：（1）不同植物的诱导成功率不同；（2）同一植物的不同生理状况：①从花药来看，应当选择（初花期）的花药；②从花粉来看，应当选择（单核期）的花粉；③从花蕾来看，应当选择（完全未开放）的花蕾。材料的选择培养基的组成1.为什么不选择使用单核期之前或之后的花粉？

单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难。2.为什么花瓣松动会给材料消毒带来困难？

外界环境中的微生物容易侵入到花药中。思考2.培养基的组成培养不同的植物，所采用的花药培养基不同：eg.小麦：N6培养基马铃薯、月季：MS培养基油菜：B5培养基3.植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等二、实验操作（一）材料的选取1．选择花药时一般通过

确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的方法是

，某些不易着色的细胞核，可采用

，它们分别可以将细胞核染成

色和

色。2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用

处理20min。该试剂的配制方法是将

按体积比为

的比例混合均匀。镜检醋酸洋红法焙花青－铬钒法红蓝黑卡诺氏固定液无水酒精和冰醋酸3：1（二）材料的消毒

花蕾（70％

酒精）大约30s（无菌水）清洗（无菌吸水纸）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（无菌水）冲洗

月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？

在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗；

酒精和氯化汞处理的时间稍长些。思考（三）接种和培养1．剥取花药：消毒后的花蕾，要在

条件下除去萼片、花瓣。剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是容易从受伤部位产生愈伤组织；二是要彻底除去花丝，原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成

2．接种花药：剥取的花药要立刻接种到

上。每个培养瓶接种

个花药。3．培养：花药培养利用的培养基是

培养基，pH为

，温度为

℃，幼苗形成之前（需要、不需要）光照。4．培养20－30d后，花药开裂，长出

或释放出

。前者还要转移到

上进行分化培养成再生植株；后者要尽快

并转移到新的培养基上。5．通过愈伤组织形成的植株，常常会出现

的变化，因而需要鉴定和筛选。无菌培养基7-10MS5.825愈伤组织胚状体分化培养基分开染色体组数

为什么通过愈伤组织形成的花粉植株会发生染色体组数的变化？（1）有的是由花粉发育形成的单倍体花粉植株：有的是由花粉中的生殖细胞核和花粉管细胞核融合后发育形成的二倍体花粉植株。（2）有些是由花粉发育形成的单倍体花粉植株，有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体花药壁植株。思考与讨论植物组织培养技术与花药培养技术的异同点相同点：理论依据、基本过程、影响因素、操作流程等。不同点：1.生殖方式：组织培养为无性繁殖；花药培养为有性繁殖。2.可育性：组织培养的植株可育；花药培养的植株高度不育，秋水仙 素处理加倍后