第四章-定量分析

第四章药物的含量测定方法与验证主要内容药品分析方法的验证定量分析方法的分类与特点233定量分析样品的前处理方法31定量分析？药品定量分析－定量分析是依据统计数据，建立数学模型，并计算出分析对象的各项指标及其数值的一种方法。定性分析与定量分析是统一的，相互补充的；定性分析是定量分析的基本前提，没有定性的定量是一种盲目的、毫无价值的定量；定量分析使之定性更加科学、准确，它可以促使定性分析得出广泛而深入的结论。药物含量测定基于化学或物理学原理的含量测定基于生物学原理的效价测定药物的含量系指所含主成分的量，是评价药物的重要指标第一节、定量分析方法的分类与特点含量测定项采用的定量分析方法容量分析法光谱分析法色谱分析法

基本原理：将已知浓度的滴定液由滴定管加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化学计量反应完全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗的体积可以计算出被测物的含量。化学计量关系特点：所用仪器价廉、易得；操作简便、快速、测定结果准确（相对标准差一般应不大于0.2％)；专属性较差，适用于含量较高的样品指示剂指示反应化学计量点的到达一、容量分析法(滴定法)容量分析的相关计算滴定度－指每1mL规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量滴定度（T）的计算(mg/mL)：P144-145aA+bBcC+dD

T(mg/mL)=m(a/b)M

WA=TVBm-滴定液的摩尔浓度（mol/L）；a-被测药物的摩尔数；b-滴定液的摩尔数；M-被测药物的摩尔毫摩尔质量（mg/mmol）；含量计算（1）直接滴定法

VxT含量（%）=x100%W实际滴定度－药典给出的是规定浓度下，实际滴定度要乘以校正因子

F=实际摩尔浓度/规定摩尔浓度

VxTxF含量（%）=x100%W间接滴定法生成物滴定法药物+AB（定量反应）剩余量滴定法（回滴定法）

先加入过量的滴定液A，使其与药物定量反应，但反应完全后，再用另一滴定液来回滴反应后剩余的滴定液A

药物B滴定剂例：P146

(VBo-VBs)xTAxFB含量（%）=x100%W实例－溴量法凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。如司可巴比妥钠的测定原理为：

精密量取维生素C注射液4mL（相当于维生素C0.2g），加水15mL与丙酮2mL，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4mL与淀粉指示液1mL，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液显蓝色，并持续30秒钟不退。已知：注射液规格2mL:0.1g，消耗0.05mol/L碘滴定液（F=1.005）22.45mL，维生素C的分子量为176.12，反应摩尔比为1:1，问：（1）每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相当于多少mg的维生素C？（2）求本品相当于标示量的百分含量？课堂练习12023/2/112维生素C1摩尔维生素C与1摩尔碘相当T＝0.05×176.12×1/1=8.806mg/ml标示量%=T×F×V/W×标示量×100%8.806×22.45×1.005=0.2×1000

×100%=99.34%课堂练习2烟酸片的含量测定：取本品20片，精密称定重量为7.1680g，研细，取片粉0.3729g，加新沸放冷的水50mL，加热使溶解，放冷，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗25.20mL，每1mLNaOH滴定液（0.1mol/L）相当于12.31mg烟酸，已知烟酸片规格0.3g，NaOH滴定液（0.1mol/L）的F=1.005，计算每片含烟酸的量。光谱－记录由能级跃迁所产生的辐射能随波长的变化所得的图谱光谱分析法－利用物质的光谱进行定性定量和结构分析的方法。分光光度法－测定被测物质在光谱的特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性或定量分析的方法。中国药典收载的光谱分析法包括紫外可见分光光度法（UV-VIS）红外分光光度法(IR)原子吸收分光光度法(AAS)荧光分析法(FL)光焰光度法(FP)二、光谱光谱分析法紫外分光光度法（UV-VIS）基于物质分子对紫外光谱区（200-400nm）和可见光区（400-760nm）的单色光辐射的吸收特性建立的光谱分析法。朗伯－比耳定律：单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的浓度范围内被该物质吸收光的量与该物质的浓度和液层的厚度（光程）成正比。吸光度A一般在0.3～0.7（误差最小）浓度点n＝5，用浓度c对A作线性回归处理，得一直线方程，r应大于0.999(n＝5)，方程的截距应近于零。A为吸光度T为透光率C为吸光物质的浓度

L为吸收层厚度A=ECLUV－VIS的特点

(1)灵敏度高（10-410-7g/mL)

(2)准确度高(RSD,25%)

(3)仪器价格低廉、操作简单、易于普及

(4)应用广泛注意事项仪器校正－波长，准确度溶剂要求－光谱纯（甲醇、乙醇、扣除空白）含量测定方法＊对照品比较法原料药百分含量D：为稀释体积固体制剂含量液体制剂含量吸收系数法1

含量％＝×100×WA×D×100%

E%cm示例4-6定量计算复习对照法固体制剂------1.容量分析法

（1）直接滴定法（2）剩余滴定法

2.紫外分光光度法（1）吸收系数法（2）对照法

习题1.维生素B12注射液规格为1mL：0.1mg，含量测定方法如下：精密量取本品7.5mL，置25mL量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，混匀，置1cm石英池中，以蒸馏水为空白，在361±1nm波长处测得吸收度为0.593，以E1%1cm为207，计算得维生素B12相当于标示量的百分含量2.烟酸片的含量测定：取本品20片，精密称定重量为7.1680g，研细，取片粉0.3729g，加新沸放冷的水50mL，加热使溶解，放冷，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗25.20mL，每1mLNaOH滴定液（0.1mol/L）相当于12.31mg烟酸，已知烟酸片规格0.3g，NaOH滴定液（0.1mol/L）的F=1.005，计算每片含烟酸的量。3.HPLC测定复方SMZ片中SMZ含量，以SG为内标，测得标准液中：SMZ峰高14.90cm，浓度8.0mg/mL，SG峰高13.80cm，浓度4.0mg/mL。样品液中SMZ峰高11.92cm，SG峰高16.20cm，浓度4.0mg/mL。（进样量均为5μl）,样品液中SMZ的浓度为：课堂习题非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝酸钠液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00mL。每1ml亚硝酸钠液（0.1mol/L）相当于17.92mg的C10H13O2N。计算非那西丁的含量为（）A.95.55%B.96.55%C.97.55%D.98.55%E.99.72%三、色谱分析法色谱分析法是基于混合物各组分在体系中两相的物理化学性能差异（如吸附、分配差异等）而进行分离和分析的方法分离原理：吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法与排阻色谱法分离方法：纸色谱、薄层色谱法、柱色谱、纸色谱、气相色谱法、高效液相色谱法。色谱法分类高效液相色谱法

特点：高压、高效、高速高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。1.仪器要求：高效液相色谱仪AgilentHP11002.对色谱柱要求高效液相色谱：硅胶和化学键合硅胶（C18，CN，苯基）离子色谱：离子交换填料分子排阻色谱：凝胶或高分子多孔小球色谱柱是HPLC的心脏部件，它包括柱管与固定相两部分。3.对检测器要求紫外检测器荧光检测器示差检测器蒸发光散射检测器电化学检测器质谱检测器4.流动相要求紫外检测器：溶剂无干扰蒸发光散射检测器、质谱检测器：不含不挥发性盐C18：水、甲醇、乙腈、缓冲液离子色谱(IonChromatography)利用溶液中不同离子与离子交换剂间的交换能力的不同而进行分离的方法。利用多孔性物质对不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。固定相为化学情性多孔物质——凝胶，它类似于分子筛，但孔径比分子筛大。凝胶内具有一定大小的孔穴，体积大的分子不能渗透到孔穴中去而被排阻，较早地被淋洗出来；中等体积的分子部分渗透；小分子可完全渗透入内，最后洗出色谱柱。这样，样品分子基本上按其分子大小，排阻先后由柱中流出。M.W.tR空间排阻色谱(SizeExclusionChromatography)5.系统适用性试验理论塔板数（N）：色谱柱分离效能分离度（R）：Rs>1.5重复性：RSD<2.0%(n=5)拖尾因子：0.95-1.05(图例)测定法内标法加校正因子测定法外标法As为内标物质的峰面积或峰高；AR为杂质对照品的峰面积或峰高；Cs为内标物质的浓度；CR为杂质对照品的浓度。Ax为供试品中杂质峰面积或峰高；Cx为供试品中杂质的浓度；As为内标物质的峰面积或峰高；Cs为内标物质的浓度；f为校正因子。

Ax

含量（Cx）＝CR──────AR

气相色谱法(略）以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。原理：各组分在固定相与载气(流动相)间分配系数不等，按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。色谱系统适用性问题同高效液相色谱

测定法加入对照品溶液前后校正因子应相同，即：

Ais/Ax=（Cx+△Cx）/Cx则待测组分的浓度Cx可通过如下公式进行计算：

Cx=△Cx/(Ais/Ax)-1前处理的主要目的净化浓缩增强响应、提高选择性（比如化学衍生）浓缩痕量的被测组分，提高方法的灵敏度，降低检测限；去除样本中的基体与其他干扰物质；通过衍生化，使被测物转化成为检测灵敏度更高的物质或转化为与样本中干扰组分能够分离的物质，提高方法的灵敏度和选择性保护下游分析仪器以及测试系统、避免影响整机性能及寿命第二节、定量分析样品的前处理方法为什么要进行前处理?概述对样品进行前处理以满足所用分析方法对样品的要求含金属、卤素、硫、磷、栖等特殊元素的药物分析前处理方法结构决定性质，同时也决定了样品的前处理方法泛影酸碘番酸磺溴酞钠三氯叔丁醇碘苯酯含金属有机物金属原子不直接与碳原子相连金属原子直接与碳原子以共价键相连-破坏后分析含金属有机药物酒石酸锑钾富马酸亚铁卡巴胂金属有机药物该类药物的分析方法通常可分为不经有机破坏的分析方法经有机破坏的分析方法

一、不经有机破坏的分析方法特点：不对药物分子中的有机结构部分进行完全破坏，仅选用适当的溶剂使待测元素电离或经简单回流使之解离为无机盐后测定。水解后测定还原分解后测定

碱水解后测定法

含卤素的有机药物溶解于适当溶剂中，加氢氧化钠溶液回流使其水解，卤素转变为离子，用间接银量法测定。适用于含卤素的不稳定有机药物。如：卤素和脂肪碳相连（2)酸水解后测定法含金属的有机药物与适当的矿酸共热，将不溶性金属盐类水解置换为可溶性盐，然后用配位滴定或剩余酸滴定。（一）经水解后测定法

原理三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热回流水解，氯元素全部转变成氯化钠，然后用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定量过量的硝酸银滴定液，使Cl-生成AgCl沉淀，过量的硝酸银，以Fe3+为指示剂，用硫氰酸铵液回滴定。例三氯叔丁醇的测定CCl3-C(CH3)2-OH+4NaOH

△回流(CH3)2-CO+3NaCl+HCOONa+2H2ONaCl+AgNO3

AgCl↓

+NaNO3

AgNO3+

NH4SCNAgSCN↓+

NH4NO3（淡棕红色）(Ksp=1.56×10–10)(Ksp=1.0×10-12)Fe3+

+SCNˉFe(SCN)2+

（2)酸水解后测定法含金属的有机药物与适当的矿酸共热，将不溶性金属盐类水解置换为可溶性盐，然后用配位滴定或剩余酸滴定。3.经还原分解后测定法

本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应，使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法测定。本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连，且一个苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。例泛影酸的含量测定取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于20.46mg的C11H9I3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+11NaOH+Zn回流△COONaNH2

H2N+3NaI+2CH3COONa+2Na2ZnO2+H2ONaI+AgNO3AgI+NaNO3二、经有机破坏的分析方法含金属药物、卤素、氮、硫、磷等与碳原子以共价键相连，结合比较牢固，水解或氧化还原的方法难以凑效，需采用有机破坏的方法。湿法破坏干法破坏使用硫酸作为分解剂（消解剂或消化剂），常加入氧化剂（硝酸、高氯酸、过氧化氢）作为辅助分解剂。分解剂组合方式：硫酸-硝酸法硫酸-高氯酸法硫酸-硫酸盐法

湿法破坏（凯氏定氮法，含氮有机药物定量分析方法）

硫酸-硫酸盐法原理是首先将试样放入凯氏烧瓶中，加入浓硫酸及催化剂(硒、汞或铜盐)加热分解消解试样，使试样中的氮转化为铵态氮(硫酸铵)；有机结构被氧化成二氧化碳和水（消解），消解好的试样转移入蒸馏器中，加浓苛性钠液，使挥发出的氨气(NH3)用过量的标准酸溶液吸收，剩余的酸用标准碱溶液返滴定；或用硼酸作吸收液，再用标准酸溶液直接滴定。1.有机物中的氨根在强热和CuSO4，浓H2SO4

作用下，硝化生成（NH4）2SO4

反应式为：2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04

（其中CuSO4做催化剂）

2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3

，收集于H3BO3溶液中

反应式为:(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O

3.用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据H2SO4消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得含氮（蛋白质）的含量

反应式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3

本法是往样品中加入浓硫酸作氧化剂，加入硫酸盐提高硫酸的沸点，增强硫酸的氧化破坏能力，且防止硫酸的分解损失。

消解剂：硫酸，并加入硫酸钾（无水硫酸钠）－提高硫酸沸点进而提高消解温度。催化剂：加快消解速度、缩短消解时间。常用的催化剂包括汞或汞盐、硒粉、铜盐、二氧化锰。辅助催化剂：适用于某些难以分解的含氮杂环类药物。包括30％的过氧化氢、高氯酸。使用注意事项适用范围：含有氨基或酰胺类结构的药物。偶氮类、肼结构：需加锌粉先还原后消解以避免生产氮气而影响测定杂环类：先用HI酸或红磷还原为氢化杂化，后消解；含氮量高>10%，加入少量多碳化合物还原剂（如蔗糖、淀粉）以利于氮转变为氨通过高温灼烧的方式实现对有机结构的破坏。适用于含卤素、硫、磷、硒及砷盐等有机合成药物的前处理。高温炽灼法氧瓶燃烧法

干法破坏高温炽灼法－将含待测元素的有机药物经高温灼烧灰化，使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐。适用对象：含卤素类药物鉴别、含磷药物的定量测定和药物中砷盐的检查。加入无水碳酸钠、硝酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化。含碘药物鉴别含氟、氯、溴等元素药物的鉴别含磷药物的定量测定砷盐的检查

氧瓶燃烧法－将含待测元素的有机药物置于充满氧气的密闭的燃烧瓶中充分燃烧，使有机结构彻底分解为二氧化碳和水，而待测元素转化为不同价态的氧化物（或无氧酸），被吸收到适当吸收液中，再采用适宜的方法分析。特点：设备简单、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析适用对象：含卤素、硫、磷等元素的鉴别、限度检查和含量测定。（2）仪器与材料①仪器装置燃烧瓶为500、1000或2000ml无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状②称样用材料及称样（样品制备）:

A.固体样品无灰滤纸；B.液体样品纸袋；C.软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹③吸收液

吸收液：

作用将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态；吸收液的选择氟水

（茜素氟蓝比色法）

氯

氯化氢水中溶解度低，NaOH溶液溴H2O-NaOH

NaOH-二氧化硫（还原剂）饱和溶液碘NaOH－水-二氧化硫饱和溶液硫浓H2O2

与水的混合液

（SO3SO42-)

硒硝酸溶液（SeO3H2SO4)

（3）操作方法①燃烧瓶燃烧前的准备用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧气1min，立即用表面皿覆盖瓶口。②样品的准备取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。③样品的燃烧点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。①根据被燃烧分解的样品量选用适宜大小的燃烧瓶。药典规定的燃烧瓶体积为500、1000或2000ml三种，采用常量或半微量分析（4）注意事项待分解样品量燃烧瓶的体积

3~5mg（微量分析）

150~250ml

20~30mg（半微量分析）

300~500ml

50~60mg

1000ml

0.6~0.7g或更多

2000ml或特殊结构的燃烧瓶正确选用燃烧瓶的目的在于：样品能在足够的氧气中燃烧分解完全；有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸收液中；防止爆炸的可能性。②测定含氟有机药物时，用石英制燃烧瓶③铂丝燃烧时起催化作用④应同时做空白试验⑤燃烧时要注意防爆⑥燃烧产生的烟雾完全被吸收例碘苯酯的含量测定原理碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分解，转变为碘化物，继而氧化为游离的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氢氧化钠反应，生成碘化物与碘酸盐，加入溴-醋酸溶液，使全部转变为碘酸盐，过量的溴以甲酸及通空气去除。加入碘化钾，使与碘酸盐反应析出游离碘，用硫代硫酸钠液滴定，碘与淀粉结合所显的蓝色消失即为终点。碘苯酯I2(HIO3,HIO,HI)

取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用氢氧化钠试液2ml与水l0ml为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液(取醋酸钾10g，加冰醋酸适量使溶解，加溴0.4ml，再加冰醋酸使成1000m1)l0ml，密塞，振摇，放置数分钟，加甲酸约lml，用水洗涤瓶口，并通入空气流约3～5min以除去剩余的溴蒸气，加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)相当于1.388mg的C19H29IO2。

测定法滴定度的计算2mol碘苯酯→1molI21molI2→1molNaIO+1molNaI1molNaIO→1/3molNaIO3+2/3molNaImolNaI+Br2→molNaIO3即2mol碘苯酯→2molNaIO32molNaIO3+10molI-→6molI2即2mol碘苯酯→6molI2→12molNa2S2O3反应摩尔比为1∶6第三节药品质量标准分析方法验证一、目的

证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草和修订说明中。二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药物合成方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。三、需验证的分析项目

鉴别试验；杂质定量或限度检查；

原料或制剂中有效成分含量测定；

制剂中其它成分（降解产物、防腐剂等）的测定；

溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。四、验证内容

1.准确度

2.精密度

3.专属性

4.检测限

5.定量限

6.标准曲线

7.线性范围

8.耐用性重复性中间精密度重现性

准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用百分回收率表示。测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。

（一）准确度（accuracy）空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M。加样回收试验

加入已知纯度对照品的量为原制剂中含量的80%、100%、120%,每一浓度测3份.规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次。数据要求UV、HPLC、GC法

98.0102.0%容量法

99.7100.3%体内药物分析

85.0115.0%RSD≤2%杂质定量测定的准确度可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较。是指在规定条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差（d）、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)（变异系数，CV）表示。（二）精密度（precision）精密度偏差（d）：测量值与平均值之差标准（偏）差（SD或S）相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）重复性

在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度；在规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次或把被测物浓度当作100%，至少测6次进行评价。2.中间精密度

同一实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备所得结果的精密度。考察随机变动因素的影响。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备验证内容3.重现性

不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。如建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果，协同检验的过程、重现性结果均应记载在起草说明中。RSD允许值容量分析

≤0.2%重量分析法

≤0.5%氧瓶燃烧法、凯氏定氮法

≤0.5%紫外、原子吸收分析法

≤1%HPLC、GC、TLC分析法

≤

2%指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。是指该法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。

（三）专属性（specificity）

专属性不够,应采用多个方法予以补充1.鉴别反应不含被测成分的样品,以及结构相似或组分中的有关化合物,均呈负反应2.含量测定和杂质测定注明成分在谱图中的位置杂质是否干扰含量测定(是否和主峰分离)降解试样峰纯度检查(PDA)两法比较测定结果检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。是限度检查效能指标，反应方法是否灵敏,无需定量测定。常用%、ppm、ppb表示。

（四）检测限（limitofdetection，LOD）

1．非仪器分析目视法用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。5g/mL10g/mL20g/mL50g/mL100g/mL

2．信噪比法用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比（S/N）3∶1或2∶1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测限。

3．数据要求应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。指样品中被测物能被定量测定的最低量，结果应具有一定准确度和精密度。常用%、ppm、ppb表示。（五）定量限（1imitofquantitation，LOQ）常用信噪比法确定定量限，一般以信噪比（S/N）为10∶1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定，也可用仪器所测空白背景响应标准差（SD）的10倍为估计值，再经试验确定。在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。数据要求：应列出回归方程、相关系数和线性图