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文档简介

第七章

苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析1基本结构肾上腺素第一节结构与性质2R1R2R3HX名称-CH3-H肾上腺素-H-H重酒石酸去甲肾上腺素-H-HHCl盐酸去氧肾上腺素-CH(CH3)2-HHCl盐酸异丙肾上腺素-H-HHCl盐酸多巴胺第一节结构与性质3性质

1.弱碱性:烃氨基侧链,仲胺氮。

2.酚羟基特性:邻苯二酚或酚羟基结构。

3.旋光性:手性碳原子。

4.紫外吸收特性:苯环,254nm为中心红移或蓝移。第一节结构与性质4一、

三氯化铁反应绿色,加入碱液显紫红色。二、甲醛-硫酸反应酚羟基的本类药物,与甲醛在硫酸中反应,形成具有醌式结构的有色物。肾上腺素红色盐酸异丙肾上腺素棕色至暗紫色重酒石酸去甲肾上腺素淡红色盐酸去氧肾上腺素玫瑰红→橙红→深棕红第二节鉴别试验5与三氯化铁反应、与甲醛-硫酸反应药物三氯化铁甲醛-硫酸肾上腺素0.1mol/L盐酸液中显翠绿色,加氨试液显紫色,紫红色红色重酒石酸去甲肾上腺素翠绿色,加碳酸氢钠试液显蓝色,红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红,橙红,深棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色,滴加新制5%碳酸氢钠液,显蓝紫色,红色棕色,暗紫色盐酸多巴胺墨绿色,滴加1%氨溶液,显紫红色第二节鉴别试验6肾上腺素【鉴别】

(1)取本品约2mg,加盐酸溶液(9→1000)2~3滴溶解后,加水2ml与三氯化铁试液1滴,即显翠绿色;再加氨试液1滴,即变紫色,最后变成紫红色。7盐酸异丙肾上腺素【鉴别】

(1)取本品20mg,加水2ml溶解后,加三氯化铁试液2滴,即显深绿色;滴加新制的5%碳酸氢钠溶液,即变蓝色,然后变成红色。8重酒石酸去甲肾上腺素【鉴别】

(1)取本品约10mg,加水1ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,振摇,即显翠绿色;再缓缓加碳酸氢钠试液,即显蓝色,最后变成红色。9盐酸去氧肾上腺素

【鉴别】

(2)取本品约10mg,加水1ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,即显紫色。10盐酸多巴胺

【鉴别】

(1)取本品10mg,加水1ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,溶液显墨绿色;滴加1%氨溶液,即转变成紫红色。11盐酸甲氧明【鉴别】

(1)取本品约1mg,加甲醛硫酸试液3滴,即显紫色,渐变为棕色,最后成绿色。12硫酸沙丁胺醇

【鉴别】

(1)取本品约20mg,加水2ml溶解后,加三氯化铁试液1滴,振摇,溶液显紫色;加碳酸氢钠试液即生成橙黄色浑浊。13三、

氧化还原反应I2肾上腺素红异丙肾上腺素红肾上腺素盐酸异丙肾重酒石酸去甲肾放置棕色多聚体硫代硫酸钠淡红色几乎不被氧化pH6.5三者皆氧化为红色I2pH3.5第二节鉴别试验14利用此反应区别:甲:pH3.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液乙:pH6.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液肾上腺素:均为红色重酒石酸去甲肾上腺素:甲无色、乙红色第二节鉴别试验15肾上腺素【鉴别】

(2)取本品10mg,加盐酸溶液(9→1000)2ml溶解后,加过氧化氢试液10滴,煮沸,即显血红色。16盐酸异丙肾上腺素【鉴别】

(2)取本品10mg,加水10ml溶解后,取溶液2ml,加盐酸滴定液(0.1mol/L)0.1ml,再加0.1mol/L碘溶液1ml,放置5分钟,加0.1mol/L硫代硫酸钠溶液4ml,即显淡红色。17重酒石酸去甲肾上腺素【鉴别】

(2)取本品约1mg,加酒石酸氢钾的饱和溶液10ml溶解,加碘试液1ml,放置5分钟后,加硫代硫酸钠试液2ml,溶液为无色或仅显微红色或淡紫色(与肾上腺素或异丙肾上腺素的区别)。18四、双缩脲反应是鉴别芳环氨基醇的特殊反应;可用于盐酸麻黄碱、盐酸去氧肾上腺素鉴别:D+CuSO4+NaOH显蓝紫色+乙醚,醚层(紫红色)水层(蓝色)盐酸麻黄碱第二节鉴别试验+乙醚,醚层(不显色)盐酸去氧肾上腺素19盐酸去氧肾上腺素

【鉴别】

(1)取本品约10mg,加水1ml溶解后,加硫酸铜试液1滴与氢氧化钠试液1ml,摇匀,即显紫色;加乙醚1ml振摇,乙醚层应不显色。20盐酸麻黄碱【鉴别】

(1)取本品约10mg,加水1ml溶解后,加硫酸铜试液2滴与20%氢氧化钠溶液1ml,即显蓝紫色;加乙醚1ml,振摇后,放置,乙醚层即显紫红色,水层变成蓝色。21五、

Rimini试验脂肪族伯胺的专属反应(间羟胺)供试品加水溶解,加亚硝基铁氰化钠试液、丙酮、碳酸氢钠,加热,显红紫色。丙酮必须不含甲醛成分第二节鉴别试验22重酒石酸间羟胺

(2)取本品约5mg,加水0.5ml使溶解,加亚硝基铁氰化钠试液2滴、丙酮2滴与碳酸氢钠0.2g,在60℃的水浴中加热1分钟,即显红紫色。23六、紫外光谱七、红外光谱第二节鉴别试验24盐酸异丙肾上腺素(3)取本品,加水制成每1ml中含50μg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定,在280nm的波长处有最大吸收,吸光度约为0.50。

(4)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集349图)一致。25盐酸多巴胺

(2)取本品,加0.5%硫酸溶液制成每1ml中约含30μg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定,在280nm的波长处有最大吸收。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集345图)一致。26硫酸特布他林

(2)取本品,用0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.1mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定,在276nm的波长处有最大吸收。

(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集668图)一致,如不一致时,再取本品适量,加无醛甲醇使溶解,置水浴蒸干后测定。27重酒石酸间羟胺

(3)取本品,加水制成每1ml中约含0.1mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定,在272nm的波长处有最大吸收。

(4)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集294图)一致。28盐酸甲氧明吸收系数取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含30μg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A),在290nm的波长处测定吸光度,吸收系数(E1%1cm)为133~141。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集329图)一致。29盐酸克仑特罗

(2)取本品,加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中含30μg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定,在243nm与296nm的波长处有最大吸收。

(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集351图)一致。30硫酸沙丁胺醇

(3)取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中约含80μg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A)测定,在276nm的波长处有最大吸收。

(4)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集486图)一致。31一、酮体杂质检查氢化不完全,引入酮体酮体:310nm有最大吸收药物:此波长下无吸收方法:2.0mg/ml样品液→310nm处测定规定A≯0.05

(=453,限量)第三节特殊杂质与检查32肾上腺素【检查】酮体取本品,加盐酸溶液(9→2000)制成每1ml中含2.0mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A),在310nm的波长处测定,吸光度不得过0.05。33重酒石酸去甲肾上腺素【检查】酮体取本品,加水溶解并稀释制成每1ml中约含2.0mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A),在310nm的波长处测定,吸光度不得过0.05。34盐酸去氧肾上腺素【检查】酮体取本品2.0g,置100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,取10ml,置50ml量瓶中,用0.01mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀。照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A),在310nm的波长处测定吸光度,不得大于0.20。35盐酸甲氧明【检查】酮胺取本品,加水制成每1ml中含1.5mg的溶液,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A),在347nm的波长处测定,吸光度不得过0.06。36二、光学纯度检查检查对映体控制药品质量如肾上腺素在盐酸溶液中,样品浓度20mg/ml,比旋度为-50.0°~-

53.5°对映体分离采用色谱法和电泳法。第三节特殊杂质与检查37重酒石酸去甲肾上腺素比旋度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含50mg的溶液,依法测定(附录Ⅵ

E),比旋度为-10.0°至-12.0°。38盐酸去氧肾上腺素比旋度取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含20mg的溶液,依法测定(附录Ⅵ

E),比旋度为-42°至-47°。39硫酸沙丁胺醇旋光度取本品约0.25g,精密称定,置25ml量瓶中,加水适量使溶解,用水稀释至刻度,摇匀,依法测定(附录Ⅵ

E),旋光度为-0.10°至+0.10°。40有关物质1.盐酸去氧肾上腺素供试液:20mg/ml甲醇液对照液:0.1mg/ml甲醇液层析板:硅胶G板点样:各点10μl

展开剂:异丙醇-氯仿-浓氨(80∶5∶15)显色剂:重氮苯磺酸试液规定:杂斑颜色与对照主斑比较不得更深三、有关物质的检查第三节特殊杂质与检查41盐酸去氧肾上腺素有关物质避光操作。取本品,加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含20mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取适量,加甲醇稀释成每1ml中含约0.10mg的溶液,作为对照溶液。照薄层色谱法(附录Ⅴ

B)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以异丙醇-三氯甲烷-浓氨溶液(80:5:15)为展开剂,展开,晾干,喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点,与对照溶液的主斑点比较,颜色不得更深(0.5%)。422.肾上腺素供试液:1mg/ml液对照液:0.002ml/ml液固定相:十八烷基硅烷键合硅胶流动相:硫酸氢四甲基铵溶液波长:205nm理论塔板数按去甲肾上腺素峰计算不低于3000第三节特殊杂质与检查43肾上腺素有关物质照高效液相色谱法(附录Ⅴ

D)试验,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以硫酸氢四甲基铵溶液(取硫酸氢四甲基铵4.0g,庚烷磺酸钠1.1g,0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液2ml,用水溶解并稀释至950ml)-甲醇(95:5)(用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至3.5)为流动相;流速为每分钟2ml,检测波长为205nm。供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.2%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2.5倍(0.5%)。44盐酸异丙肾上腺素有关物质照高效液相色谱法(附录Ⅴ

D)试验,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸溶液(取磷酸11.5g,用水溶解并稀释至1000ml)-甲醇(95:5)为流动相;检测波长为280nm。取系统适用性试验溶液20μl,注入液相色谱仪,间羟异丙肾上腺素峰与盐酸异丙肾上腺素峰之间的分离度应大于3.0,盐酸异丙肾上腺素峰的信噪比应大于3。记录色谱图至主成分峰保留时间的7倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.5%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0%)。45重酒石酸去甲肾上腺素有关物质照高效液相色谱法(附录Ⅴ

D)试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.05%庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH值至2.2)为流动相A;乙腈-0.05%庚烷磺酸钠溶液(1:1)(用磷酸调节pH值至2.4)为流动相B,照下表进行梯度洗脱;检测波长为280nm;流速为每分钟1.5ml。主成分峰的保留时间约为11分钟,主成分峰后应出现一个未知降解产物峰与去甲肾上腺酮峰,去甲肾上腺酮峰的相对保留时间约为1.3,理论板数按去甲肾上腺素峰计算不低于5000,主成分峰与相邻杂质峰之间的分离度应符合要求。供试品溶液的色谱图中如有与去甲肾上腺酮峰保留时间一致的色谱峰,其峰面积乘以0.3后不得大于对照溶液主峰面积的1/3(0.1%),其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1/3(0.1%);杂质总量不得过0.3%。供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积1/6倍的峰可忽略不计。46盐酸多巴胺有关物质照高效液相色谱法(附录Ⅴ

D)试验,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.005mol/L十二烷基硫酸钠-乙腈-冰醋酸-0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠(700:300:10:2)为流动相;检测波长为280nm。取系统适用性试验溶液20μl,注入液相色谱仪,盐酸多巴胺峰和4-乙基邻苯二酚峰的分离度应大于3.0。记录色谱图至盐酸多巴胺峰保留时间的3倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0%)。47一、非水滴定法非水滴定法是在非水溶剂中进行滴定的方法,主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐或有机酸盐,以及有机酸的碱金属盐类药物的含量,也可用测定某些有机弱酸的含量。酸性溶剂:有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强其相对碱度。常用冰醋酸碱性溶剂与酸性相反二甲基甲酰胺两性溶剂:兼有酸、碱两种性能,甲醇惰性溶剂:没有酸、碱性,苯、氯仿第四节含量测定48一、非水滴定法在水中碱性较弱,不能顺利地进行中和滴定(滴定突跃不明显,难以判断滴定终点)。在酸性非水介质中(如冰HAc中),则能显示出较强的碱性,滴定突跃增大,可以顺利地进行中和滴定。49(一)反应原理

B+HAC→BH++AC-HClO4+HAC→H2AC++ClO4-H2AC++AC-→2HAC

总式:B+HClO4→BH+ClO4-

BH+A-+HClO4→BH+ClO4-+HA一、非水滴定法置换滴定:用强酸(HClO4)置换出与生物碱结合的较弱的酸(HA)50(二)一般方法供试品:消耗标准液8ml计算溶剂:gHAc,用量10~30ml滴定剂:0.1mol/LHClO4/无水gHAc

溶液指示液结晶紫1~2滴终点颜色以电位滴定时的突跃点为准,同时做空白,加入醋酐应防止氨基被乙酰化。

一、非水滴定法51(三)讨论1.适用范围pKb>8的有机弱碱性药物及其盐类溶媒的选择

pKb8~10:gHACpKb10~12:gHAC+AC2O

pKb>12:AC2O

一、非水滴定法522.酸根的影响

HClO4>HBr>H2SO4>HCl>HNO3

1)氢卤酸盐

B•HX+HClO4→BHClO4+HX

释放出的HX影响滴定,加HgAC2排除

2[B]HX+HgAC2→2[B]·HAC+HgX2HgAC2量:过量1~3倍一、非水滴定法53一、非水滴定法

2)硝酸盐HNO3在gHAc中为弱酸,不影响滴定突跃HNO3具有氧化性,可使指示剂变色,应采用电位法指示终点或将HNO3破坏分解后再进行测定。硝酸士的宁3)磷酸盐与有机酸盐常规方法直接滴定544)硫酸盐在水中硫酸是二元酸,能解离出两个氢离子在冰醋酸中硫酸是一元酸,能够解离出一个氢离子,即注意N原子碱性强弱,正确判断反应摩尔比一、非水滴定法553.滴定剂的稳定性水膨胀系数0.21×10-3/C

gHAc膨胀系数1.1×10-3/C,且具挥发性。测定与标定时温度不同,对浓度校正。一、非水滴定法56一、非水滴定法校正公式:其中:

0.0011:gHAc膨胀系数

t0、t1:标定、测定时温度

N0、N1:t0、t1对应的滴定液的浓度注意:t1-t0>10C或贮存>30天重新标定574.终点指示方法电位滴定和指示剂法(1)结晶紫CrystalViolet(CV)

紫→蓝紫→蓝绿→绿→黄碱性区酸性区(2)孔雀绿:浅兰绿色→黄色(3)α-奈酚苯甲醇:黄→绿(4)喹哪啶红:红→无色一、非水滴定法58一、非水滴定法5.其他干扰有机碱性药物经碱化处理,有机溶剂提取分离出游离碱再测定。

gHAc和HClO4含有一定量的水分排除方法:费休氏(Fischer):准确测出水分根据其含水量,加入计算量醋酐同时:仪器干燥无水59肾上腺素

【含量测定】取本品约0.15g,精密称定,加冰醋酸10ml,振摇溶解后,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于18.32mg的C9H13NO3。60盐酸异丙肾上腺素

【含量测定】取本品约0.15g,精密称定,加冰醋酸30ml,微温使溶解,放冷,加醋酸汞试液5ml与结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于24.77mg的C11H17NO3·HCl。

61重酒石酸去甲肾上腺素

【含量测定】取本品0.2g.精密称定,加冰醋酸10ml,振摇(必要时微温)溶解后,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于31.93mg的C8H11NO3·C4H6O6。62盐酸多巴胺【含量测定】取本品约0.15g,精密称定,加冰醋酸25ml,煮沸使溶解,冷却至约40℃,加醋酸汞试液5ml,放冷,加结晶紫指示液1滴,用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于18.96mg的C8H11NO2·HCl。63原理:二、溴量法

重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素64溴量法测定方法空白试验48.25ml本品约0.1g精密称定碘瓶中水20ml溶解溴滴定液50ml0.05mol/L盐酸5ml密塞放置15min振摇碘化钾试液10ml密塞,振摇硫代硫酸钠滴定液滴定0.1mol/L近终点时加淀粉指示液滴定至蓝色消失0.1129g0.101515.33ml盐酸去氧肾上腺素(M=203.67)65讨论:

1)0.05mol/LBr2标准液

3gKBrO3+15gKBr+H2O→1000ml

KBrO3+5KBr+6HCl→3Br2+6KCl+3H2O2)溴、碘易挥发,防止逸失

3)溴代物水中不溶,需加HAC、CHCl3或EtOH

4)溴过量2%为宜

5)空白试验

6)化学计量关系:1:61药物=3Br2=3I2=6Na2S2O3

溴量法66盐酸去氧肾上腺素【含量测定】取本品约0.1g,精密称定,置碘瓶中,加水20ml使溶解,精密加溴滴定液(0.05mol/L)50ml,再加盐酸5ml,立即密塞,放置15分钟并时时振摇,注意微开瓶塞,加碘化钾试液10ml,立即密塞,振摇后,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液,继续滴定至蓝色消失,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相当于3.395mg的C9H13NO2·HCl。67重酒石酸间羟胺

【含量测定】取本品约0.1g,精密称定,置碘瓶中,用水40ml使溶解,精密加溴滴定液(0.05mol/L)40ml,再加盐酸8ml,立即密塞,放置15分钟,注意微开瓶塞,加碘化钾试液8ml,立即密塞,振摇,用少量水冲洗碘瓶的瓶塞和瓶颈,加三氯甲烷1ml,振摇,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液,继续滴定至蓝色消失,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相当于5.288mg的C9H13NO2·C4H6O6。68利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3+络合显色,进行比色测定;也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色,进行比色。三、比色法69例如:盐酸克伦特罗栓的含量测定

上述偶合剂可与HNO2显色,干扰比色测定,可先加氨基磺酸铵分解过量的HNO2。HNO2

+2H2NSO3NH42N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O三、比色法70盐酸克仑特罗栓【含量测定】取本品20粒,精密称定,切成小片,精密称取适量(约相当于盐酸克仑特罗0.36mg),置分液漏斗中,加温热的三氯甲烷20ml使溶解。用盐酸溶液(9→100)振摇提取3次(20ml、15ml、10m1),分取酸提取液,置50ml量瓶中,用盐酸溶液(9→100)稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液;另取盐酸克仑特罗对照品适量,精密称定,加盐酸溶液(9→100)溶解并定量稀释制成每1ml中含7.2μg的溶液,作为对照品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各15ml,分别置25ml量瓶中,各加盐酸溶液(9→100)5ml与0.1%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,放置3分钟,各加0.5%氨基磺酸铵溶液1ml,摇匀,时时振摇10分钟,再各加0.1%盐酸萘乙二胺溶液1ml,摇匀,放置10分钟,用盐酸溶液(9→100)稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ

A),在500nm的波长处分别测定吸光度,计算,即得。71盐酸克仑特罗:芳伯氨基与亚硝酸钠定量发生重氮化反应永停滴定四、亚硝酸钠法72盐酸克仑特罗

【含量测定】取本品约0.25g,精密称定,置100ml烧杯中,加盐酸溶液(1→2)25ml使溶解,再加水25ml,照永停滴定法(附录Ⅶ

A),用亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)相当于15.68mg的C12H18Cl2N2O·HCl。73取代苯环——特征吸收制剂含量测定盐酸甲氧明注射液、重酒石酸间羟胺注射液等。五、紫外分光光度法74重酒石酸间羟胺注射液

【含量测定】精密量取本品5ml(约相当于间羟胺50mg),置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀;精密量取5ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法(

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