选修一 生物技术实复习

选修一生物技术实践专题1传统发酵技术的应用课题1果酒制作的菌种、原理果醋制作的菌种、原理对果酒和果醋发酵装置的理解

④检测酒精的试剂、过程和现象课题2腐乳制作的菌种、原理课题3泡菜制作的菌种、原理亚硝酸盐含量的检测方法果酒果醋腐乳泡菜微生物类型原理反应条件检测方法酵母菌醋酸杆菌，毛霉乳酸菌酵母菌的无氧呼吸产生酒精18-25℃，无氧酸性重铬酸钾与其反应呈灰绿色醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸30-35℃，通入氧气毛霉产生蛋白酶和脂肪酶等催化有机物分解15～18℃,接种乳酸菌无氧呼吸产生乳酸常温，无氧pH检测，亚硝酸盐的检测方法C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量酶1、有氧呼吸：C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶2、无氧呼吸：酵母菌制酒㈠制作果酒（前期需氧，后期厌氧）出芽生殖，增加酵母菌数量产生酒精1、若氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸，其反应式：酶

C6H12O6→3CH3COOH（醋酸）2、若缺少糖源，氧气不足时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，其反应式：

酶2C2H5OH+O2→2CH3CHO（乙醛）+2H2O酶2CH3CHO+O2→2CH3COOH（醋酸）醋酸菌制醋㈡制作果醋（一直需要氧）实验流程示意图说明：在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。发酵：发酵装置如右图注意事项①将葡萄汁装入发酵瓶，要留大约1／3

的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，密闭，将温度严格控制在18-25℃，时间控制在10-12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30-35℃，时间控制在前7-8d左右，并注意适时通过充气口充气。简易装置2－4天排气一次。（拧松瓶盖）腐乳的制作1.原理（1）毛霉等微生物能产生蛋白酶和脂肪酶。（2）蛋白酶能将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸；脂肪酶能将脂肪水解为甘油和脂肪酸。2.流程让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。3.影响腐乳品质的条件（1）盐长满毛霉的豆腐块（毛坯）与盐的质量分数比为5∶1。

盐的浓度过高，影响腐乳口味；浓度过低，不足以抑制微生物生长，导致腐乳腐败变质（2）酒卤汤中酒的含量控制在12%左右。

酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，豆腐易腐败，难以成块。（3）香辛料既可调制腐乳的风味，又具有防腐杀菌的作用。（4）含水量

以70%为宜，若过高则影响毛霉的有氧呼吸，且腐乳不易成形；若过低,则不利于毛霉的代谢和生长。（5）发酵温度

前期的发酵温度控制在15—18℃，利于毛霉的生长。（6）发酵时间前期发酵和后期发酵的作用不同，所需时间应控制好，太长或太短都会影响腐乳的品质。泡菜制作原理一、乳酸菌在无氧的条件下，利用牛奶或蔬菜中的营养物质进行无氧呼吸，产生乳酸等物质。二、乳酸大量积累后又可抑制其他对酸敏感的杂菌的生长，从而酸奶或泡菜不腐烂变质C6H12O6

2C3H6O3（乳酸）+少量能量酶制作泡菜并检测亚硝酸盐含量1.制作泡菜的原理。利用乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖制作泡菜。2.检测亚硝酸盐的原理和方法名称原理或方法显色反应在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与N-1-萘基乙二胺偶联，形成玫瑰红色产物比色将标准比色液与显色液（实验液）进行比较，以确定显色液中亚硝酸盐的含量1、加入白酒有什么作用？

白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长，它也是一种调味剂，可增加醇香感。思考：2、用水封闭坛口起什么作用？不封闭有什么结果？水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用，空气中21％是氧气，这是最简易的造成无氧环境的方法。这样，坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭，则会有许多需氧菌生长，蔬菜会腐烂。1. （2013年广州二模）下列有关传统发酵技术应用的叙述，不合理的是A. 可利用选择培养基筛选出生产所需的优良菌种B. 制作泡菜所用的微生物属于分解者C. 果醋的制作过程中醋酸杆菌只进行无氧呼吸D. 在腐乳制作过程中必须有能分泌蛋白酶的微生物参与c（2011年江苏卷）2．下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是A．腐乳制作所需要的适宜温度最高B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNAD（2012江苏卷）3．下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，不合理的是A．在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C．果酒发酵过程中发酵液的葡萄糖含量会逐渐减小D．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量D4．（2013年广东高考）（16分）某新能源研究兴趣小组尝试用木薯块根的淀粉制备燃料酒精。他们用酶将木薯淀粉讲解成单糖。查阅资料后，安装的酒精发酵装置、采用的发酵条件如图12。（1）向发酵瓶中加入5g酵母菌开始试验，发酵初期，通气阀①需要偶尔短时间打开，并在A通气口处打气，以利于__________；实验过程中，通气阀②需要偶尔短时间打开，但目的是______________。

（2）第3天，取出少量发酵液，滴加含有__________的浓硫酸永夜来检测酒精。使酵母菌进行有氧呼吸，以便其增殖排出部分CO2,保持装置内气压平衡重铬酸钾（3）检测后发现，尽管酵母菌菌种合适、淀粉酶解物充足、操作正确、发酵温度和PH值适宜，但酒精含量（+）比预期低，我们展开了讨论，认为还有其它影响因素，如__________，请设计试验对此因素进行探究并预测实验结果（用表格形式呈现；用“+”表示酒精量，最高含量为“+++++”）。（4）请对预测的结果进行分析，并得出结论。组别加酵母菌种的量三天后酒精含量15g＋27g＋＋39g＋＋＋411g＋＋＋＋513g＋＋＋＋＋如果随着酵母菌种数量增加，酒精含量也增加，则酵母菌数量是影响发酵的因素。如果随着酵母菌种数量增加，酒精含量没有增加，则酵母菌数量不是影响发酵的因素专题2微生物的培养与应用课题1培养基的种类消毒和灭菌的理解和举例纯化微生物时使用的接种方法课题2分离尿素分解菌的原理、鉴定依据选择培养基的要求课题3分离纤维素分解菌的原理、鉴定依据选择培养基的要求专题2微生物的培养与应用一.培养基：微生物生存的环境和营养物质1.基本成分：碳源、氮源、水、无机盐、生长因子⑴碳源无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物⑵氮源无机氮源：有机氮源：NH4＋、NO3-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源专题2微生物的培养与应用氧元素、氢元素H2O无机盐NaCl碳源、氮源、维生素蛋白胨碳源、氮源、磷酸盐、维生素牛肉膏提供的主要营养培养基组分培养细菌常用的培养基——牛肉膏蛋白胨培养基耐高温需保持干燥的物品，160～170℃1～2小时接种环、接种针等金属用具70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒灭菌定义方法较为温和理化方法，杀死部分有害菌体（不包括芽孢、孢子）强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂紫外线灼烧灭菌干热灭菌酒精、氯气、石炭酸等高压蒸汽灭菌二.无菌技术：防止外来杂菌的污染1.消毒与灭菌：二.大肠杆菌的纯化培养：㈡纯化大肠杆菌：1.接种：平板划线法：稀释涂布平板法：6支试管，分别加入9ml无菌水菌液1ml1ml1ml1ml1ml1ml101102103104105106稀释103倍稀释104倍稀释105倍关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。课题3分解纤维素的微生物的分离1.实验原理

纤维素+

染料→红色复合物（纤维素+

）+刚果红染料→培养基中出现以纤维素分解菌为中心的

刚果红纤维素酶透明圈2.实验流程土壤取样 制备选择培养

↓挑选产生透明圈的菌落将样品涂布到鉴别

的培养基上纤维素分解菌梯度稀释3.刚果红染色法直接对纤维素分解菌进行筛选纤维素C1酶+Cx酶纤维二糖葡萄糖苷酶葡萄糖现象1.尿素[CO(NH2)2]——重要的农业氮肥。只能被土壤中细菌分解为NH3才能被植物吸收利用CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3脲酶分离产生脲酶的细菌课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数2.培养基：以尿素作为唯一氮源。只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮源而生存。课题延伸CO（NH2）2+H2O CO2+2NH3脲酶pH升高指示剂（酚红）将变红4．（2013广东题）以下为某兴趣小组获得的实验结果及其分析，正确的是 A B CDB（2013广东六校联考）5、关于生物技术的叙述，不正确的是（双选）A．泡菜制作的过程中所利用的微生物是醋酸菌

B．植物组织培养中，培养基和外植体均要灭菌C．用刚果红染色法可以筛选纤维素分解菌D．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵AB（2012韶关二模6.下列有关生物学实验操作、材料、条件等方面的叙述,正确的是(双选）A.“探究酵母菌种群数量动态变化”实验中,用培养液培养酵母菌B.“观察细胞有丝分裂”实验中,用卡诺氏液对根尖进行解离C.“腐乳的制作”实验中,加盐和加酒都能抑制微生物的生长D.“分解尿素的细菌的分离”实验中,用尿素为唯一营养的培养基筛选目的菌AC专题3植物的组织培养技术专题4酶的研究与应用使果汁由浑浊变澄清脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶温水自变量？固定化细胞（酶）技术固定化细胞（酶）技术利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。酶更适合采用化学结合法和物理吸附法；细胞更适合采用包埋法。酶的作用机理:酶的概念:酶的本质:酶的特性：影响因素：

绝大多数酶是蛋白质，少数酶是RNA降低活化能活细胞产生催化作用有机物具有专一性、高效性，作用条件温和温度、酸碱等（低温抑制酶的活性，高温、过酸、过碱使酶失活）7．据下表推测，溶液呈蓝色的是试管编号实验温度（℃）0.1%的淀粉溶液（2ml）2%淀粉酶溶液（1ml）10分钟后加碘液（2滴）A37+－+B37－++C37+++D100+++注：“+”加入该物质，“—”未加入该物质8．酶在细胞代谢中起重要作用。下列有关酶的叙述中，不正确的是A．酶具有高效性B．酶具有专一性C．酶可以为化学反应提供能量D．酶可以降低化学反应的活化能（双选）ADC（1）分离DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同原理（2）提纯氯化钠2mol／L：DNA的溶解度最大，浓度为0．14mol／L时，DNA的溶解度最低。2.DNA的鉴定DNA+二苯胺试剂→蓝色沸水浴1.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精。2.DNA对酶、高温、洗涤剂的耐受性不同专题5DNA和蛋白质技术课题1DNA的粗提取与鉴定（一）实验材料的选取（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液（三）除去滤液中的杂质(纯化)（四）

DNA的析出与鉴定二、实验设计（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液1、动物细胞2、植物细胞——容易破碎——需要溶解细胞膜鸡血细胞溶液：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分大量进入血细胞，使血细胞胀裂；加上搅拌作用，加速鸡血细胞细胞膜、核膜破裂，

从而释放出DNA①加入一定的洗涤剂和食盐②充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液洗涤剂——离子去污剂，能溶解细胞膜，利于DNA释放食盐——NaCl，利于DNA的溶解于研磨液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，

过滤后收集滤液防止血液凝固柠檬酸钠1.DNA的溶解性2.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性（三）除去滤液中的杂质（四）DNA进一步提纯与滤液体积相等的冷却的酒精溶液(体积分数95％)，静置2－3min，溶液中会出现白色丝状物

——粗提取DNA用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水DNA的析出（五）DNA的鉴定⑴向两支试管中分别加入2mol/LNaCl溶液5ml⑵其中一支试管中加入DNA丝状物⑶各加入二苯胺试剂4ml⑷混匀后，置于沸水浴中加热5min⑸待冷却后，比较两只试管中溶液的颜色变化观察现象：溶解丝状物的溶液变为蓝色制备鸡血细胞液…………加柠檬酸钠，静置或离心↓破碎细胞，释放DNA…加蒸馏水，同一方向快速通方向搅拌↓→过滤，除去细胞壁、细胞膜等。溶解核内DNA……加入NaCl至2mol/L，同一方向缓慢搅拌↓DNA析出：加蒸馏水至0.14mol/L，过滤(可略），再溶解到2mol/L溶液中，过滤↓→除去细胞质中的大部分物质。DNA进一步纯化………与等体积95％冷却酒精混合，析出白色丝状物↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。DNA鉴定………溶解到2mol/L溶液中，

二苯胺，沸水浴，呈现蓝色实验操作（三次过滤、两次加蒸馏水）9．下列有关生物技术实践操作的叙述中，不正确的是A．果醋发酵过程中，适时充气，有利于醋酸菌的代谢B．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长C．用二苯胺试剂鉴定DNA时，在沸水浴条件下可使溶液呈绿色D．家庭制作果酒时，用洗涤剂反复冲洗葡萄表面可能影响发酵效果C课题3血红蛋白的提取和分离1、原理：相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，通过的路程较短，移动速度较快

（一）凝胶色谱法：红细胞的洗涤(离心去除杂蛋白)___________________________分离血红蛋白溶液纯度鉴定：_______________来测定蛋白质的相对分子质量

样品处理纯化：___________对血红蛋白分离和纯化血红蛋白的释放(蒸馏水涨破)凝胶色谱法电泳法2.血红蛋白的提取和分离过程生理盐水透析(除去小分子杂质)粗分离（二）电泳法：1.原理：2.类型:琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳各种分子带电性质的差异分子大小、形状的不同带电分子产生不同的迁移速度分离大分子物质：核酸、蛋白质4．（2013广东题）以下为某兴趣小组获得的实验结果及其分析，正确的是 A B CDB（2013广东六校联考）5、关于生物技术的叙述，不正确的是（双选）A．泡菜制作的过程中所利用的微生物是醋酸菌

B．植物组织培养中，培养基和外植体均要灭菌C．用刚果红染色法可以筛选纤维素分解菌D．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵AB（2012韶关二模6.下列有关生物学实验操作、材料、条件等方面的叙述,正确的是(双选）A.“探究酵母菌种群数量动态变化”实验中,用培养液培养酵母菌B.“观察细胞有丝分裂”实验中,用卡诺氏液对根尖进行解离C.“腐乳的制作”实验中,加盐和加酒都能抑制微生物的生长D.“分解尿素的细菌的分离”实验中,用尿素为唯一营养的培养基筛选目的菌AC（2010）7.广东高考若想探究海洋底泥中是否存在分解三丁基锡